海藻多糖提取、純化及其補(bǔ)體結(jié)合活性的研究

海藻多糖提取、純化及其補(bǔ)體結(jié)合活性的研究

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1、碩士學(xué)位論文海藻多糖提取、純化及其補(bǔ)體結(jié)合活性的研究RESEARCHONEXTRACTION,PURIFICATIONANDCOMPLEMENTFIXATINGACTIVITYOFPOLYSACCHARIDESINKELPRESIDUE趙瑞希哈爾濱工業(yè)大學(xué)2015年6月國內(nèi)圖書分類號:X792學(xué)校代碼:10213國際圖書分類號:579密級:公開理學(xué)碩士學(xué)位論文海藻多糖提取、純化及其補(bǔ)體結(jié)合活性的研究碩士研究生:趙瑞希導(dǎo)師:閆培生教授申請學(xué)位:理學(xué)碩士學(xué)科:生物學(xué)所在單位:海洋科學(xué)與技術(shù)學(xué)院答辯日期:2015年6月授予學(xué)位單位:哈爾濱工業(yè)大學(xué)Cl

2、assifiedIndex:X792U.D.C:579DissertationfortheMasterDegreeinScienceRESEARCHONEXTRACTION,PURIFICATIONANDCOMPLEMENTFIXATINGACTIVITYOFPOLYSACCHARIDESINKELPRESIDUECandidate:ZhaoRuixiSupervisor:Prof.YanPeishengAcademicDegreeAppliedfor:MasterofScienceSpeciality:BiologyAffiliation:S

3、chooloftheMarineScienceandTechnologyDateofDefence:June,2015Degree-Conferring-Institution:HarbinInstituteofTechnology摘要摘要中國是海洋大國,“21世紀(jì)海上絲綢之路”的戰(zhàn)略構(gòu)想為促進(jìn)我國從海洋大國向海洋強(qiáng)國的邁進(jìn)制定了目標(biāo),因此發(fā)展海洋經(jīng)濟(jì),提高海洋科研水平,海洋生物質(zhì)資源化等都具有重要戰(zhàn)略意義。本研究以海帶加工產(chǎn)業(yè)中產(chǎn)生的廢渣為原料,研究并評價(jià)海帶渣生物質(zhì)資源利用的可行性,期待能夠?qū)⒑гD變廢為寶‖,既克服其帶來的環(huán)境污染難題,

4、又可以帶來較高的經(jīng)濟(jì)效益。課題首先以海帶渣為材料,進(jìn)行了海藻多糖提取工藝的優(yōu)化研究。采用均勻設(shè)計(jì)法進(jìn)行方案設(shè)計(jì),探討了海藻多糖提取工藝中不同提取溫度、提取pH、提取時(shí)間、提取次數(shù)以及不同料液比對多糖提取率的影響。通過建立不同優(yōu)化模型,采用多種回歸分析方式進(jìn)行分析,確定了以多糖提取率為優(yōu)化指標(biāo)的海藻多糖提取工藝:提取溫度123.7℃,提取pH為8.25,提取時(shí)間96.6min,提取三次,料液比為1:9.7。該模型預(yù)測海帶渣多糖提取率的預(yù)測值為2.19%,驗(yàn)證實(shí)測值為2.44%,優(yōu)化條件下獲得的多糖提取率比優(yōu)化前的多糖提取率提高約50%,并且顯著高

5、于同時(shí)設(shè)置的四組不同多糖提取方法。其次,本研究對均勻設(shè)計(jì)法提取的海帶渣粗多糖進(jìn)行了補(bǔ)體結(jié)合活性的測定,并根據(jù)不同多糖補(bǔ)體結(jié)合活性的ICH50值進(jìn)行了方案優(yōu)化。結(jié)果表明不同均勻設(shè)計(jì)提取方案所得海帶渣粗多糖均具有良好的補(bǔ)體結(jié)合活性,ICH50值最低為5.6873μg/mL,最高為47.7665μg/mL。以補(bǔ)體結(jié)合活性為指標(biāo)建立優(yōu)化模型,多種回歸分析模型預(yù)測和實(shí)際驗(yàn)證結(jié)果顯示用有偏回歸分析模型得出的優(yōu)化模型提取多糖的補(bǔ)體結(jié)合活性得到了進(jìn)一步提高,ICH50值達(dá)到3.6865μg/mL。采用柱層析法對提取的海帶渣粗多糖進(jìn)行分離純化。首先對4種大孔樹脂

6、進(jìn)行動態(tài)吸附篩選,確定大孔樹脂D3520為后續(xù)實(shí)驗(yàn)所用樹脂,海帶渣粗多糖經(jīng)D3520純化后,實(shí)際回收率達(dá)到62.4%,色素去除率為65.0%,蛋白質(zhì)脫除率為70.1%,多糖純度提高了2.38倍。經(jīng)離子交換樹脂DEAESepharoseCL-6B純化后分為10個(gè)不同多糖級分,總多糖回收率為69.94%,且主要組分的純度接近80%。選擇分級組分HD-7和HD-8用Sephadex-G75進(jìn)一步純化結(jié)果顯示該兩個(gè)組分均被進(jìn)一步分離為兩個(gè)不同的多糖組分。綜上所述,本研究確立了一套兼顧海帶渣多糖提取率與補(bǔ)體結(jié)合活性的提取方法,并建立了一套海帶渣粗多糖的分

7、離純化方法。本課題為海帶渣資源化利用提供了新的思路和科學(xué)依據(jù),為后期海帶多糖生物活性的深入研究和應(yīng)用提供有力的依據(jù)。-I-摘要關(guān)鍵詞:海帶渣;多糖;提取;分離純化;補(bǔ)體結(jié)合活性;-II-哈爾濱工業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractChinaisabigmaritimepower.Thestrategicconceptionof"21stCenturytheSilkRoadontheMaritime"setsagoaltopromoteourcountryfromabigmarinepowertothepowerfulmarinepower.T

8、hus,itisstrategicallyimportanttodevelopthemarineeconomy,improvethelevelofma

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