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1、562010,Vol.27No.12化學(xué)與生物工程Chemistry&Bioengineering多環(huán)芳烴降解菌的篩選及其對天然水的凈化效果分析魏妍,楊嬌艷,王文玲,李騰,楊劭(華中師范大學(xué)湖北省城市水環(huán)境生態(tài)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖北武漢430079)摘要:采用水-硅油雙相體系篩選法,從武漢石化廠活性污泥中分離到一株能以多環(huán)芳烴(Polycyclicaromatichydrocarbons,PAHs)萘、菲、芴、芘、熒蒽為唯一碳源的高效降解菌株W3,16SrDNA序列分析表明W3屬于假單胞菌屬(Pseud
2、omonascitronellolis)。在多環(huán)芳烴初始濃度為30mg!L-1的無機(jī)鹽-硅油培養(yǎng)液中培養(yǎng)5d后,W3對萘、菲、芴、芘、熒蒽的降解率分別達(dá)到(94.00?2.83)%、(81.15?1.63)%、(87.65?4.71)%、(91.65?1.63)%和(8720?6-1212)%。用W3對湖水中的多環(huán)芳烴進(jìn)行降解,結(jié)果表明,在投菌量為3%、細(xì)菌密度為3.15#10個(gè)!mL時(shí),5d后W3對萘、菲、芴、芘、熒蒽的降解率分別達(dá)到(3407?707)%、(2478?051)%、(5695?5
3、06)%、(1967?318)%、(3510?522)%;當(dāng)細(xì)菌密度為4.76#107個(gè)!mL-1時(shí),5d后W3對萘、菲、芴、芘、熒蒽的降解率分別達(dá)到(59.27?854)%、(44.35?10.79)%、(6664?235)%、(26.40?6.36)%和(53.86?4.07)%。關(guān)鍵詞:多環(huán)芳烴;微生物降解;假單胞菌屬;微生物修復(fù)中圖分類號:X172文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1672-5425(2010)12-0056-05多環(huán)芳烴(Polycyclicaromati
4、chydrocarbons,者在此選用水環(huán)境中存在較廣泛的5種PAHs萘、PAHs)是指一類具備由2個(gè)或2個(gè)以上苯環(huán)以線狀、菲、芴、芘、熒蒽作為研究對象,利用水-硅油雙相體角狀或成簇形式構(gòu)成的獨(dú)特結(jié)構(gòu)的持久性有機(jī)污染系篩選本土的PAHs高效降解菌株,并開展高效降解物。美國EPA已將16種PAHs列入優(yōu)先控制污染菌初步的水體應(yīng)用研究,以期為PAHs污染水體的微[1]物黑名單。PAHs污染物主要分布在大氣、土壤、水生物修復(fù)奠定一定的理論和應(yīng)用基礎(chǔ)。[2]體沉積物及水體水相中。PAHs會在生物體內(nèi)積累1實(shí)驗(yàn)并通過細(xì)
5、胞毒性、遺傳毒性和免疫毒性對生物體產(chǎn)生致癌、致畸、致突變作用,對自然界生物安全和人類健1.1菌種[3]康構(gòu)成巨大威脅。PAHs在環(huán)境中的去除途徑有微采集武漢石化廠活性污泥,靜置,取上清作為菌種[4]生物降解、生物富集、光降解、化學(xué)氧化等。其中微來源。生物降解具有環(huán)保、高效、廉價(jià)的優(yōu)點(diǎn),被公認(rèn)為是去1.2培養(yǎng)基及PAHs母液的配制[5][8,9]除環(huán)境中PAHs的主要途徑之一。20世紀(jì)70年篩選培養(yǎng)基為無機(jī)鹽-硅油培養(yǎng)液;分離純代,研究人員開展了利用微生物修復(fù)PAHs污染土壤化培養(yǎng)基為牛肉膏固體培養(yǎng)基。[6]
6、的嘗試,80年代科學(xué)家認(rèn)識到微生物修復(fù)是PAHs萘、菲、芴、芘、熒蒽母液均用二甲基亞砜配制,濃-1污染環(huán)境修復(fù)最具良好前景的技術(shù),并首先用于石油度為15g!L,用0.22m的有機(jī)濾膜過濾,滅菌,[7]污染環(huán)境的修復(fù)。備用。土壤中PAHs的生物修復(fù)技術(shù)研究較多,但天然1.3PAHs降解菌的篩選及分離純化水體中PAHs污染物的生物修復(fù)技術(shù)尚未建立。作將采集的活性污泥靜置30min,取上清5mL于基金項(xiàng)目:十一五水專項(xiàng)東江項(xiàng)目(2008ZX07211003),湖北省自然科學(xué)基金重點(diǎn)資助項(xiàng)目(2008CDA10
7、1),武漢市科技計(jì)劃項(xiàng)目(200760423164)收稿日期:2010-09-16作者簡介:魏妍(1985-),女,湖北公安人,碩士研究生,研究方向:環(huán)境微生物技術(shù);通訊作者:楊劭,教授,博士生導(dǎo)師。Email:snowdrift1985@163.com,yangshao@tom.com。魏妍等:多環(huán)芳烴降解菌的篩選及其對天然水的凈化效果分析/2010年第12期57裝有50mL滅菌的無機(jī)鹽-硅油培養(yǎng)液(含40mL無定各樣品中PAHs的殘留量。CODMn、TN、TP等水機(jī)鹽液體培養(yǎng)基和10mL硅油)的錐
8、形瓶中,于30?、質(zhì)指標(biāo)測定參照%水和廢水監(jiān)測分析方法&(第四-1[15]170r!min振蕩培養(yǎng)3d,備用。版)。取0.1mLPAHs母液于100mL滅菌錐形瓶中1.7統(tǒng)計(jì)分析方法-1(萘、菲、芴、芘、熒蒽的終濃度為30mg!L),再加入所有數(shù)據(jù)利用GraphPadPrism4軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)50mL新鮮的滅菌無機(jī)鹽-硅油培養(yǎng)液。然后移取2分析。mL上述備用菌液到含PAHs的無機(jī)鹽-硅
