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《調(diào)控sirt1arenrf2信號(hào)通路對(duì)pq中毒小鼠肺損傷的保護(hù)作用》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目:遢控曼亙基!呈螋叢墼2值曼道路盟里Q生耋型∑答辯委員會(huì)成員:王堂皇j匕立跡麴醫(yī)陵復(fù)趁抖萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄舢舢Ⅷ刪刪㈣舢川刪Y2691881一、英文縮略詞表?????????????????????.1二、論文摘要???????????????????????.3中文摘要?????????????????????????.3英文摘要?????????????????????????.6三、論文正文???????????????????????.9前言?
2、?????????????????????????????????..9第一部分NEF2與SIRTl的相互作用及過表達(dá)慢病毒載體的構(gòu)建1引言??????????????????????????????????..112材料和方法???????????????????????113結(jié)果??????????????????????????????????..214討論??????????????????????????????????..255參考文獻(xiàn)????????????????????????26第二部分過
3、表達(dá)慢病毒載體的驗(yàn)證?????????????.281材料和方法???????????????????????282結(jié)果??????????????????????????????????..293討論??????????????????????????????????..314參考文獻(xiàn)????????????????????????3l第三部分調(diào)控NIU2/AI吲SII汀1信號(hào)通路對(duì)百草枯中毒小鼠肺損傷中氧化應(yīng)激水平的影響??????????????????.33萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文1引言???
4、???????????????????????.332材料和方法???????????????????????333結(jié)果??????????????????????????????????..414討論??????????????????????????????????..505參考文獻(xiàn)????????????????????????52四、全文小結(jié)???????????????????????54五、已發(fā)表或待發(fā)表論文??????????????????55六、致謝?????????????????????
5、???56七、綜述????????????????????????57八、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明??????????????????66萬方數(shù)據(jù)中文縮略詞中英文對(duì)照表萬方數(shù)據(jù)2萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文調(diào)控SIRTl/ARE/NRF2信號(hào)通路對(duì)PQ中毒小鼠肺損傷的保護(hù)作用中文摘要目的:氧化應(yīng)激在百草枯(paraquat,PQ)中毒發(fā)病機(jī)制中的作用己得到廣泛認(rèn)同,核因子E2相關(guān)因子2(nuclearfactorE2.relatedfactor.2,Nrf2)作為調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)氧化.抗氧化平衡的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子參與PQ
6、肺損傷的病理生理過程。研究其調(diào)節(jié)方式及機(jī)制將有助于深化對(duì)PQ中毒發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)。積累的資料表明,沉默信息調(diào)節(jié)因子l(silentinformationregulator1,Sirtl)可通過多種途徑調(diào)節(jié)抗氧化分子的表達(dá),并且與Nrf2的穩(wěn)定性和活性關(guān)系密切,有可能由此參與Nrf2介導(dǎo)的氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)過程。本研究旨在通過體外實(shí)驗(yàn),證明Nrt2與Sirtl蛋白間存在相互作用的前提下,運(yùn)用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)調(diào)節(jié)二者的表達(dá),探討Sirtl/ARE/Nrf2信號(hào)通路對(duì)于PQ中毒小鼠肺損傷的保護(hù)作用,為PQ中毒肺的抗氧化損傷治
7、療提供理論依據(jù)。方法:實(shí)驗(yàn)一:培養(yǎng)小鼠原代II型肺泡上皮細(xì)胞,用PQ暴露后,利用免疫共沉淀技術(shù)(co.immunoprecipitation,CO.IP),分別以Nrf2和Sirtl作為一抗,正反驗(yàn)證在氧化應(yīng)激條件下,N咆蛋白與Sirtl蛋白是否具有相互作用;構(gòu)建攜帶Nrf2和Sirtl基因的過表達(dá)慢病毒載體。實(shí)驗(yàn)二:通過綠色熒光表達(dá)量驗(yàn)證慢病毒載體的轉(zhuǎn)染效率,并以PCR和Western.blot技術(shù)分別從基因和蛋白水平檢測Nrf2及Sial的表達(dá)情況,進(jìn)一步驗(yàn)證過表達(dá)慢病毒載體構(gòu)建。實(shí)驗(yàn)三:利用骨髓間充質(zhì)干
8、細(xì)胞系(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSC)較強(qiáng)的遷移能力及向受損肺組織“歸巢”的特性,建立攜帶Nrf2、Sirtl的BMSC系,再用其對(duì)PQ中毒小鼠進(jìn)行干預(yù)。145只ICR小鼠分為以下8組:①空白對(duì)照組②NS組③PQ組④PQ+NS組(亙)PQ+LV-MSC.GFP組(查)PQ+LV-MSC.Nrf2組OPQ+LV-MSC-Sinl組⑧PQ+LV-MSC.Nrf2