mmp-9在去勢(shì)大鼠正畸牙齒壓力側(cè)牙槽骨表達(dá)的研究

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1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文MMP--9在去勢(shì)大鼠正畸牙齒壓力側(cè)牙槽骨表達(dá)的研究姓名：李靜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：馬文盛201203中文摘要MMP．9在去勢(shì)大鼠正畸牙齒壓力側(cè)牙槽骨表達(dá)的研究摘要目的：建立去勢(shì)大鼠骨質(zhì)疏松的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，對(duì)去勢(shì)大鼠和正常大鼠牙齒施加正畸力，觀察并比較基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrixmetalloproteinase．9，MMP．9)在兩種大鼠正畸移動(dòng)牙齒壓力側(cè)牙周膜中的表達(dá)的區(qū)別，探討MlVIP一9與正畸牙齒移動(dòng)壓力側(cè)牙槽骨吸收的關(guān)系，以及骨質(zhì)疏松對(duì)正畸力作用下骨代謝的影響。方法：6月齡Wistar大鼠50只按體重隨機(jī)分為10組，即對(duì)照組

2、：A1組(加力0天)、A2組(加力5天)、A3組(加力7天)、A4組(加力1O天)、A5組(加力14天)；去勢(shì)組：B1組(加力0天)、B2組(加力5天)、B3組(加力7天)、B4組(加力1O天)、B5組(加力14天)。每組5只。切除去勢(shì)組大鼠雙側(cè)卵巢，造成雌激素缺乏的骨質(zhì)疏松實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，對(duì)照組大鼠只切除卵巢周圍的小塊脂肪組織，不切除雙側(cè)卵巢。術(shù)后飼養(yǎng)6個(gè)月后于各組大鼠上頜第一磨牙與中切牙間安裝鈦鎳螺旋彈簧，打開彈簧使其產(chǎn)生約0．49N的拉力，牽引上頜第一磨牙向近中移動(dòng)，建立正畸牙齒移動(dòng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。在預(yù)定的時(shí)間切取各組大鼠左后肢股骨、脛骨及椎骨，使用雙1fl‘“r,X線骨密度檢測(cè)儀

3、，應(yīng)用小動(dòng)物軟件測(cè)定其骨密度。切取大鼠雙側(cè)上頜骨標(biāo)本(包括上頜磨牙和牙周組織)，固定，脫鈣，包埋、切片，HE染色觀察移動(dòng)牙齒壓力側(cè)牙周組織的形態(tài)學(xué)變化；抗酒石酸酸性磷酸酶染色觀察壓力側(cè)牙周組織中破骨細(xì)胞的數(shù)目；免疫組化染色觀察移動(dòng)牙齒壓力側(cè)牙周組織中MMP．9表達(dá)的變化，應(yīng)用圖像分析軟件ImagePro．plus6．0對(duì)MMP一9的含量進(jìn)行半定量分析。采用SPSSl8．0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，若資料服從正態(tài)分布，采用均數(shù)(Ⅳ)和標(biāo)準(zhǔn)差(S)進(jìn)行描述，若資料不服從正態(tài)分布，采用中位數(shù)(M)和四分位數(shù)間距(Q)進(jìn)行描述。統(tǒng)計(jì)推斷時(shí)，服從正態(tài)并方差齊，采用兩獨(dú)立樣本比較的t檢

4、驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；反之，則采用兩獨(dú)立樣本比較的Wilcoxon秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=O．05。中文摘要結(jié)果：1骨密度測(cè)量結(jié)果：去勢(shì)組大鼠切除雙側(cè)卵巢6個(gè)月后，測(cè)量其左后肢脛骨、腰椎(L2,---L4)和股骨骨密度的測(cè)量值分別為O．14士0．01、o．17+0．01和O．18+0．01，對(duì)照組左后肢脛骨、腰椎(L2～L4)和脛骨骨密度的測(cè)量值分別為0．15-4-0．01、0．21-4-0．01和0．20-3：0．02，且P<0．05，去勢(shì)組各組骨密度值高于對(duì)照組，去勢(shì)組與對(duì)照組各組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2HE染色結(jié)果：對(duì)照組未加力大鼠牙周膜寬度正常，成纖維細(xì)胞數(shù)量、排列正常，牙

5、周膜纖維排列規(guī)則有序，牙槽骨邊緣連續(xù)且無明顯的骨吸收及骨新生現(xiàn)象。對(duì)照組加力7天、10天、14天大鼠移動(dòng)牙齒壓力側(cè)牙周膜較未加力組明顯變窄，成纖維細(xì)胞數(shù)量減少，牙周膜纖維排列紊亂；加力5天組矛1：17天組偶見無細(xì)胞結(jié)構(gòu)的玻璃樣變組織以及直接的骨吸收，隨著加力時(shí)間延長(zhǎng)可見潛掘性的骨吸收，加力10天后玻璃樣變組織逐漸被清除。去勢(shì)組未加力大鼠牙周膜寬度正常，牙周膜纖維部分排列紊亂，骨小梁變薄變窄。去勢(shì)組加力7天、10天、14天大鼠移動(dòng)牙壓力側(cè)牙周膜變窄，血管數(shù)量增加，牙周膜內(nèi)成纖維細(xì)胞排列更加紊亂；牙槽骨骨小梁變窄變薄，骨髓腔增大，破骨細(xì)胞增多；在加力10天組和14天組壓力側(cè)牙周膜內(nèi)偶見玻璃

6、樣變組織，加力5天組和7天組未見玻璃樣變組織。3壓力側(cè)牙周組織中破骨細(xì)胞TRAP染色結(jié)果：去勢(shì)組和對(duì)照組大鼠移動(dòng)牙齒壓力側(cè)牙周組織中TRAP染色呈陽性的破骨細(xì)胞數(shù)量在受力后均增多。結(jié)果顯示在加力0天、5天、7天、10天時(shí)去勢(shì)組與對(duì)照組各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(pO．05)，在相同加力時(shí)間點(diǎn)上去勢(shì)組破骨細(xì)胞數(shù)都多于對(duì)照組。4壓力側(cè)牙周組織中MMP．9的表達(dá)：MMP．9陽性著色部位主要位于牙周膜成纖維細(xì)胞、破骨細(xì)胞、單核巨細(xì)胞(破骨細(xì)胞前體)和巨噬細(xì)胞的胞漿。結(jié)果顯示在加力0天、5天、7天、10天、14天時(shí)去勢(shì)組與對(duì)照組

7、各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p