(發(fā)酵工程專業(yè)論文)鹽脅迫下釀酒酵母生理生化特性的研究

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1、:,◆IIIilII111fillIIlY1812946關(guān)于碩士學位論文使用授權(quán)的說明本學位論文作者完全了解大連工業(yè)大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定,大連工業(yè)大學有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學位論文,并且本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。保密的學位論文在解密后也遵守此規(guī)定。是否保密(是),保密期至20lo年上卜月【\日為止。學生簽名:業(yè)墜益導(dǎo)師簽名:列年J,、,摘要摘要酵母是一種理想的真

2、核模式生物,為廣泛用于工業(yè)生產(chǎn)的生物材料。細胞在其自然棲息環(huán)境中和工業(yè)培養(yǎng)過程中,常常要忍受高鹽、高糖滲透脅迫。為了揭示鹽脅迫對酵母的作用,本文以釀酒酵母2144為出發(fā)菌,氯化鈉作為滲透調(diào)節(jié)劑。研究了鹽脅迫對酵母細胞生長、形態(tài)結(jié)構(gòu)和代謝的影響,希望對相關(guān)工業(yè)生產(chǎn)提供理論依據(jù)。1.酵母細胞經(jīng)NaCl處理后,菌落生長明顯受抑制,細胞的活細胞數(shù)和生長密度均顯著降低;在0.3mol/LNaCI作用下,細胞到達穩(wěn)定期的時間與對照基本一致;而在0.6mol/L和1.0mol/LNaCI作用下,細胞生長緩慢,對數(shù)期延長;隨著NaCI濃度的依次升高,細胞

3、收縮,菌落數(shù)依次遞減;葡萄糖消耗速率減慢;發(fā)酵結(jié)束后pH值降低。2.分析了NaCl脅迫下酵母胞內(nèi)蛋白質(zhì)的變化規(guī)律。在各種濃度的NaCl脅迫下酵母細胞均出現(xiàn)了相對分子質(zhì)量為53kDa的蛋白質(zhì),隨著NaCI濃度的升高該蛋白延遲表達。在添加O.3mol/LNaCI和0.6mol/LNaCI脅迫下,培養(yǎng)到10h時均出現(xiàn)兩條蛋白譜帶其分子量依次為61kDa和65kDa。3.分析了酵母細胞對Na+的吸收特征。隨著NaCI濃度的依次升高,胞Na+呈升高趨勢而K+的含量呈下降趨勢;Na+/K+比升高且在脅迫條件下的Na+/K+明顯高于對照組。4.研究并發(fā)

4、現(xiàn)海藻糖、甘油與酵母耐NaCl機制有關(guān)。酵母菌株在NaCI脅迫下胞內(nèi)海藻糖含量明顯高于對照組。隨著NaCI濃度的增加,胞內(nèi)甘油含量有著明顯的增加。在不同鹽脅迫濃度下,酵母胞外甘油的含量均隨著脅迫時間的延長,呈現(xiàn)出先上升后下降的變化趨勢。5.經(jīng)SephadexG-25葡聚糖凝膠層析分離鹽脅迫下酵母分泌蛋白可得出:當酵母細胞培養(yǎng)至8h時,無論是對照組還是脅迫組均在30管附近出現(xiàn)峰值管;脅迫組均在40管附近又出現(xiàn)峰值,而對照組則未出現(xiàn)。當酵母細胞培養(yǎng)至16h時,各組均在28管、42管附近出現(xiàn)峰值管;對照組和添加0.3mol/LNaCl的脅迫組均

5、在ll管出現(xiàn)峰值,而在添加0.6mol/LNaCI和1.0mol/LNaCI的脅迫組未出現(xiàn);添加0.3mol/LNaCl的脅迫組在57管出現(xiàn)峰值管而對照組和其它兩個濃度的脅迫組均未出現(xiàn)。關(guān)鍵詞:釀酒酵母,鹽脅迫,氯化鈉,滲透調(diào)節(jié),分泌蛋白■●-f嘻~^吧r-●l●AblstractAbstract&'eastisagoodorganismandavaluablebiomaterialinindustrialproduction.Inbiochemicalprocesswithwholecellused,Saccharomycescerev

6、isiaemayencounterseveralenvironmentalstresses,suchassalinestress,sugarstress.Toevaluatetheimpactsofsalinestress,sodiumchloridehadbeenchosenforosmolyteinordertorevealtheimpactsofsalinestressoncellularproliferation,morphologyandmetabolism.InthisstudySaccharomycescerevisiae2

7、144hadbeenchosenforresearch.1.Experimentsindicatedthat,uponNaCltreatment,theformationofyeastcolonywasinhibitedandtheviablecountWassignificantlydeclined.Uponexposureto0.3mol/LNaCI,thetimewhichthecellsreachedstationaryphasewasthesameasthecontrorgroup.Whileinthe0.6mol/LNaCIa

8、nd1.0mol/LNaCItreatment,logphaseWasextended.Withtheincreaseofthesodiumchlorideconcentrationthece

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