上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在環(huán)孢素所致大鼠牙齦增生中的作用研究

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1、復(fù)旦大學(xué)萬方數(shù)據(jù)碩士學(xué)位論文上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在環(huán)孢素所致大鼠牙齦增生中的作用研究院系(所)：中山醫(yī)院專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)姓名：楊斐導(dǎo)師：龔逸明副教授指導(dǎo)小組成員：余優(yōu)成教授丁小軍副教授二零一四年四月萬方數(shù)據(jù)目錄中文摘要??????????????????????????????1英文摘要??????????????????????????????．3前言?????????????????????????????????????????．6日U吾?????????????????????????????????????????．第一部分環(huán)孢素所致牙齦增生

2、大鼠動物模型的建立???????????．．8材料與方法???????????????????????????．8結(jié)果?????????????????????????????????????．．13討論?????????????????????????????????????．．16第二部分上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在環(huán)孢素所致大鼠牙齦增生中的作用???????17材料與方法???????????????????????????17結(jié)果?????????????????????????????????????．．25討論???????????????????

3、??????????????????．．30第三部分microRNA在環(huán)孢素所致大鼠牙齦增生中的作用????????．33材料與方法???????????????????????????33結(jié)果?????????????????????????????????????．．38討論?????????????????????????????????????．．39全文小結(jié)?????????????????????????????．．40參考文獻(xiàn)??????????????????????????????41縮略詞表??????????????????

4、????????????46綜j述??????????????????????????????????????．．477附蜀匙??????????????????????????????????????4754致謝???????????????????????????????????????．56III萬方數(shù)據(jù)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在環(huán)孢素所致大鼠牙齦增生中的作用研究復(fù)旦大學(xué)碩士研究生論文中文摘要環(huán)孢素所致牙齦增生嚴(yán)重影響患者的牙齦健康和咀嚼功能，影響患者生活質(zhì)量。了解環(huán)孢素所致牙齦增生的發(fā)病機制對臨床防治具有重要意義。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化是指上皮細(xì)胞在特定的生理

5、和病理情況下向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的現(xiàn)象。組織學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，增生的牙齦組織除了在間質(zhì)層有明顯的纖維化以外，上皮組織出現(xiàn)顯著的增厚，伸長的上皮釘突伸展進(jìn)入下層的附著組織內(nèi)；同時，免疫組織學(xué)研究發(fā)現(xiàn)環(huán)孢素所致藥物性牙齦增生中，上皮組織E．Cadherin表達(dá)明顯下調(diào)，而成纖維細(xì)胞特異性蛋白表達(dá)明顯上調(diào)。我們推測上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在環(huán)孢素所致牙齦增生中起了一定的作用。本實驗通過大鼠動物模型的建立，研究上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)標(biāo)志物(TGF—p1，E-Cadhefin，ZEBl，ZEB2和Snaill)及一系列相關(guān)microRNA在環(huán)孢素所致牙齦增生中不同時期的表達(dá)變化，進(jìn)

6、一步探討上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在環(huán)孢素所致牙齦增生中的作用。材料和方法第一部分環(huán)孢素所致牙齦增生的大鼠動物模型的建立選取SD大鼠36只，分為實驗組和對照組，每組18只。實驗組每日皮下注射環(huán)孢素10mg／kg，對照組注射同劑量生理鹽水。分別于用藥后20天、40天和60天將兩組中各6只動物處死，將大鼠下頜牙齦組織固定、脫鈣和包埋，通過HE染色于顯微鏡下觀察牙齦上皮組織在用藥后的形態(tài)學(xué)變化。第二部分上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在環(huán)孢素所致大鼠牙齦增生中的作用選取實驗組和對照組大鼠下頜第一磨牙頰側(cè)牙齦組織，通過免疫組化、實時定量PCR和Westernblot檢測大鼠牙齦組織內(nèi)TG

7、F．p1、E．Cadherin、ZEBl、ZEB2和Snaill等上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)志物在用藥后不同時期的表達(dá)變化。萬方數(shù)據(jù)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在環(huán)孢素所致大鼠牙齦增生中的作用研究復(fù)旦大學(xué)碩士研究生論文第三部分microRNA在環(huán)孢素所致大鼠牙齦增生中的作用選取實驗組和對照組大鼠下頜第一磨牙頰側(cè)牙齦組織，通過實時定量PCR檢測用藥后20天、40天和60天時一系列與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和組織纖維化相關(guān)的microRNA的表達(dá)變化。結(jié)果：第一部分：顯微鏡下可見服用環(huán)孢素40天和60天后，大鼠牙齦組織上皮層厚度明顯增加，細(xì)胞層數(shù)增多，棘細(xì)胞層和角化上皮層增厚，上皮釘突形成

8、并向間質(zhì)延伸；同時，間質(zhì)厚度明顯增厚，內(nèi)可見大量膠原纖維和少量血管。第二部分：實驗組大鼠牙齦組織中TGF．p1、ZEBl和ZEB2的蛋白