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《000001b9_王曉鵬-應用藥理》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、酸漿果多糖對小鼠體液免疫的影響(王曉鵬[注王曉鵬,北京理工大學生命學院藥理學碩士主要研究方向為免疫藥理學],李巖[注李巖,北京理工大學生命學院教授主要研究方向為腫瘤免疫藥理學])摘要:目的:探討在不同免疫狀態(tài)下,酸漿果多糖(SJDT)對小鼠體液免疫的調(diào)節(jié)作用。方法:采用綿羊紅細胞(SRBC)誘導小鼠產(chǎn)生SRBC抗體模型及環(huán)磷酰胺(Cy)誘導小鼠免疫增強和抑制模型。小鼠連續(xù)灌胃SJDT7d。采用MTT法檢測脂多糖(LPS)誘導的小鼠胸腺B淋巴細胞增殖,分光光度法測小鼠血清半數(shù)溶血值(HC50)和小鼠脾細胞IgM抗體生成水平。結(jié)果:SJDT(400mg·
2、kg-1)灌胃給藥7d能提高正常小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清HC50和脾臟B細胞增殖,SJDT(200,400mg·kg-1)對Cy(150mg·kg-1)誘導的免疫低下小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清HC50、脾臟B細胞增殖、脾細胞IgM水平具有明顯的恢復作用,SJDT(400mg·kg-1)對Cy(250mg·kg-1)誘導的免疫亢進小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟B細胞增殖和脾細胞IgM水平均有下調(diào)作用。結(jié)論:SQDG對小鼠體液免疫反應具有一定的雙向調(diào)節(jié)作用。關鍵詞:酸漿多糖、體液免疫、雙向調(diào)節(jié)近年來,傳統(tǒng)中藥和天然藥物的研發(fā)取得較大進展,其活性成分如多糖
3、都有良好的免疫調(diào)節(jié)作用,臨床上應用中藥治療免疫失調(diào)型疾病取得相當療效。酸漿果多糖是較為典型的植物多糖,目前已有報道[1]表明酸漿果多糖有一定的免疫調(diào)節(jié)作用。研究藥物的免疫藥理學作用時,多以病態(tài)模型進行研究。本實驗采用SRBC誘導小鼠產(chǎn)生SRBC抗體模型及環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)誘導小鼠免疫增強和抑制模型。在抗原刺激前給小鼠腹腔注射Cy,可明顯增強抗原抗體反應,可能是由于抑制和消除了Ts細胞的前體,減少Ts細胞對免疫反應的負調(diào)節(jié);在抗原刺激后注射,則主要抑制Th細胞,從而使抗原抗體反應降低。本實驗研究SJDT對不同免疫狀態(tài)下小
4、鼠抗體生成的作用,探討其體液免疫調(diào)節(jié)作用的部分機制。材料與方法1.實驗材料1.1.實驗動物昆明小鼠,雄性,8周齡,18-22g,北京大學醫(yī)學部實驗動物科學部提供,許可證號:SCXK(京)2006-0008,先在動物房適應性培養(yǎng)3天后分組實驗。1.2.藥品與主要試劑SJDT:酸漿果多糖,有北京理工大學生命學院藥理實驗室提取,實驗前用三蒸水配成該實驗所需劑量;無菌脫纖維綿羊血,由廣州蕊特生物科技有限公司提供,用于實驗前制備SRBC;豚鼠血清,元亨生物提供,用于制作補體;都氏液:碳酸氫鈉1.0g,氰化鉀0.05g,高鐵氰化鉀0.2g,蒸餾水加至1000mL
5、;阿氏液:氯化鈉0.420g,枸櫞酸0.055g,構(gòu)櫞酸鈉0.766g,葡萄糖2.05g,加水溶解并稀釋至100mL,滅菌;環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,Cy),江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司;四氮基偶氮唑藍(MTT),Sigma公司產(chǎn)品;胎牛血清,杭州四季青生物工程材料有限公司提供;DMEM:Sigma公司DMEM培養(yǎng)粉,加NaHCO33.7g,三蒸水1L配成溶液,過濾除菌,用時溶液中加lⅹl05IU/L青霉素G,100mg/L鏈霉素,100g/L的胎牛血清;磷酸鹽緩沖鹽液(PBS),將NaCl8.0g,KCl0.2g,KH2PO40.2g
6、,Na2HPO4·12H202.5G,加三蒸水至1000ml,滅菌;.二甲基亞砜(dimethylsulfoxide,DMSO),廣東汕頭市西隴化工廠。1.3.主要儀器SW-CJ-1D型單人凈化工作臺:蘇州凈化設備公司提供;CO2培養(yǎng)箱:德國Heraeus公司;酶聯(lián)免疫測定儀:國營華東電子管廠。1.實驗方法1.1.SRBC模型的建立及Cy誘導的小鼠免疫低下及免疫亢進模型的建立[2]采用腹腔注射SRBC方法誘導小鼠產(chǎn)生SRBC抗體,致敏當天給于腹腔注射Cy(150mg?kg-1)建立免疫抑制模型,致敏前3d腹腔注射Cy(250mg?kg-1)建立免疫亢
7、進模型。1.2.實驗分組和給藥方案實驗分正常小鼠的SRBC模型、Cy誘導的小鼠免疫低下模型以及Cy誘導的小鼠免疫亢進模型。每大組小鼠隨機分SRBC模型對照組、Cy誘導模型組、SJDT低、高2個劑量組(200,400mg?kg-1),免疫亢進組自注射Cy后d4起、免疫抑制組于致敏前2d開始灌胃,qd,連續(xù)7d,正常組、SRBC組和Cy組分別給予相同體積量的生理鹽水灌胃。1.3.胸腺、脾臟指數(shù)的測定末次給藥前稱重,給藥30min后脫頸處死,立即取出并稱量脾臟、胸腺重量,計算其指數(shù)。分別以每10g小鼠的脾重(mg)和胸腺重(mg)作為胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。計
8、算公式如下:脾(胸腺)指數(shù)=脾(胸腺)重量(mg)/體重(10g)1.4.血清半數(shù)溶血值(HC50)的測定[