nf-κb、tnf-α和小膠質(zhì)細(xì)胞在無創(chuàng)肢體缺血后處理腦保護(hù)中的作用

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1、中圖分類號R614UDC610碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼密級10533公開NF．KB、TNF．僅和小膠質(zhì)細(xì)胞在無創(chuàng)肢體缺血后處理腦保護(hù)中的作用RolesofNF-vd3、TNF一0candmicrogliainneuroprotectioninducedbynoninvasivelimbremoteischemiapostconditioninginMCAOrats作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：莫雪瑩臨床醫(yī)學(xué)麻醉學(xué)學(xué)院(系、所)：湘雅醫(yī)院指導(dǎo)教師：副指導(dǎo)教師程智剛副教授楊勝輝主治醫(yī)師論文答辯日期2塑!

2、：』、，廠答辯委員會主席中南大學(xué)二O一三年五月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中彳、=包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名：茗席芬v日期：赳年』月』學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有

3、關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中同學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。日期：鯊墮年且竺日NF．KB、TNF．u和小膠質(zhì)細(xì)胞在無創(chuàng)肢體缺血后處理腦保護(hù)中的作用摘要目的本實驗在建立大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型基礎(chǔ)上，研究NF．v．B、TNF．0【和小膠質(zhì)細(xì)胞在無創(chuàng)性遠(yuǎn)端肢體缺血后處理腦保護(hù)機(jī)制中的作用。方法健康雄性SD大鼠，體重2

4、50-3009，隨機(jī)分為3組(eachn=15)：假手術(shù)組(Sham組)、缺血再灌注組(I／R組)和無創(chuàng)遠(yuǎn)端缺血后處理組(NRIPoC組)。I／R組參照Longa制作MCAO模型方法制備局灶性腦缺血再灌注損傷模型，阻斷大鼠右側(cè)大腦中動脈90rain后施行再灌注。Sham組除不插入栓線外，其他手術(shù)操作步驟同I／R組。NRIPoC組建立局灶性腦缺血再灌注損傷模型方法同I／R組，在大腦中動脈再灌注后立即行右側(cè)下肢加壓缺血5min／再灌注5min共3次循環(huán)后持續(xù)恢復(fù)右下肢血流。I／R組和NR／PoC組于

5、大腦中動脈再灌注后24h，Sham組于手術(shù)完成后24h分別對各組大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能障礙評分，評分后處死大鼠，進(jìn)行TTC染色測定腦梗死容積；HE染色及Nissl染色分別觀察缺血半影區(qū)腦組織細(xì)胞形態(tài)及神經(jīng)細(xì)胞存活情況。采用Ibal標(biāo)記小膠質(zhì)細(xì)胞，免疫組化法觀察小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量的變化。免疫組化和Westernblot法測定NF—KB、TNF—a的表達(dá)。結(jié)果1．大鼠腦缺血再灌注24h后，NRIPoC組腦梗死容積比I／R組腦梗死容積顯著減小儼<0．05o2．HE染色和Nissl染色：HE染色顯示I／R組

6、和NRIPoC組腑缺血中心區(qū)均出現(xiàn)細(xì)胞壞死，腦缺血半影區(qū)神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目減少，體積減小，核固縮，染色質(zhì)濃縮、邊聚。而NRIPoC組細(xì)胞損傷程度較I／R組減輕。NRIPoC組尼氏體數(shù)量較I／R組顯著增)3n(P<0．05)。3．缺血半影區(qū)NF—r,B和TNF—C【表達(dá)：與Sham組相比，I／R組和NRIPoC組缺血半影區(qū)NF．v．B和TNF．僅表達(dá)免疫組化法及Westernblot法均顯著升高(P

7、與Sham組相比，I／R組和NRIPoC組小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目顯著增加儼<0．05)。NRIPoC組小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)日比I／R組增加(P<0．05)。5．腦缺血再灌注24h后，NRIPoC組神經(jīng)功能障礙評分中位數(shù)較I／R組下降，但I(xiàn)／R組和NRIPoC組神經(jīng)功能障礙評分差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0．05)。結(jié)論1．無創(chuàng)性遠(yuǎn)端肢體缺血后處理的腦保護(hù)機(jī)制可能與降低NF—l(B和TNF．0【表達(dá)，減輕腦內(nèi)炎癥反應(yīng)有關(guān)。2．小膠質(zhì)細(xì)胞可能參與無創(chuàng)性肢體遠(yuǎn)端缺血后處理過程，其作用有待進(jìn)一步研究。關(guān)鍵詞：腦保護(hù)；缺血再灌

8、注損傷；缺血后處理；小膠質(zhì)細(xì)胞；核因子一rd3；腫瘤壞死因子．雙分類號：R614IIIRolesofNF．v．B、TNF．僅andmicrogliainneuroprotectioninducedbynoninvasiveABSTRACT1imbremoteischemicpostconditioninginMCAOratsObjective：ThisstudyaimstoinvestigatewhetherNF-r,B，n蝦一Qandmicrogliainvolveinthecerebralp