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《丙泊酚不同作用時(shí)間對(duì)新生大鼠離體海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線(xiàn)閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013年研究生學(xué)位論文《中國(guó)圖書(shū)資料分類(lèi)法》單位代碼:10660分類(lèi)號(hào):614學(xué)號(hào):S100369貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆臨床醫(yī)學(xué)碩士專(zhuān)業(yè)學(xué)位材料(臨床論文部分)丙泊酚不同作用時(shí)間對(duì)新生大鼠離體海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響研究生:滕鍵導(dǎo)師:高鴻(教授)楊劍(副教授)年級(jí):2010級(jí)專(zhuān)業(yè):麻醉學(xué)2013年5月26日貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013年研究生學(xué)位論文目錄摘要??????????????第01頁(yè)略縮詞表?????????????第03頁(yè)前言??????????????第04頁(yè)材料與方法????????????第06頁(yè)結(jié)果??????????????第12頁(yè)討論??????????????
2、第21頁(yè)討論??????????????第24頁(yè)參考文獻(xiàn)?????????????第25頁(yè)致謝??????????????第28頁(yè)英文摘要?????????????第29頁(yè)論文原創(chuàng)性聲明??????????第31頁(yè)綜述??????????????第32頁(yè)附:臨床能力考核有關(guān)材料:臨床輪轉(zhuǎn)考核表(按時(shí)間順序)學(xué)術(shù)活動(dòng)情況表(按時(shí)間順序)臨床能力考試及學(xué)位答辯情況表貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013年研究生學(xué)位論文丙泊酚不同作用時(shí)間對(duì)新生大鼠離體海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響專(zhuān)業(yè):麻醉學(xué)研究生:滕鍵導(dǎo)師:高鴻教授、楊劍副教授摘要目的:以體外培養(yǎng)的新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞為研究對(duì)象,選用不同作用時(shí)間,丙泊酚對(duì)其進(jìn)行藥
3、物干預(yù),研究其對(duì)新生大鼠離體海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。方法:原代培養(yǎng)新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞:健康出生7d的符合國(guó)家二級(jí)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)的SD新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞,體外培養(yǎng)48h后用含1%N2(神經(jīng)生長(zhǎng)因子)添加劑DMEM/F12培養(yǎng)基全量換液,以后每3d半量換液,培養(yǎng)至第7d,取部分正常培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行NSE免疫組織化學(xué)染色,鑒定為海馬神經(jīng)細(xì)胞后進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)。分組與藥物處理:采用隨機(jī)數(shù)字方法,將其隨機(jī)分為8組。P1、2、3、4組為丙泊酚藥物處理組,丙泊酚處理終濃度為12ug/ml,培養(yǎng)至第7d的神經(jīng)細(xì)胞分別進(jìn)行3h、6h、12h、24h干預(yù),后換成細(xì)胞完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24h;C1、2、3、4組為
4、對(duì)照組,不作任何處理,各組培養(yǎng)結(jié)束時(shí)間分別對(duì)應(yīng)P1、2、3、4組。培養(yǎng)結(jié)束后進(jìn)行各組指標(biāo)的測(cè)定:(1)MTT酶標(biāo)法檢測(cè)細(xì)胞存活率;(2)Annexi-V/PI雙染流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;(3)HE染色光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果:(1)海馬神經(jīng)細(xì)胞存活率:C1、2、3、4組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);P1組與C1組相比,P2組與C2組相比,細(xì)胞存活率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),P3組與C3組相比,細(xì)胞存活率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),P41貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013年研究生學(xué)位論文組與C4組相比,細(xì)胞存活率具有顯著差異性(P<0.01);丙泊酚處理組神經(jīng)
5、細(xì)胞存活率隨著藥物處理時(shí)間的增加而下降,P2組與P1組相比,細(xì)胞存活率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);P3組與P1組,P3組與P2組相比,細(xì)胞存活率差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),P4組與P1組,P4組與P2組、P4組與P3相比,細(xì)胞存活率均有顯著差異性(P<0.01)。(2)海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率:C1、2、3、4組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);P1組與C1組相比,P2組與C2組相比,細(xì)胞凋亡率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),P3組與C3組相比,細(xì)胞凋亡率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),P4組與C4組相比,細(xì)胞凋亡率具有顯著差異性(P<0.01);丙泊酚處理組
6、細(xì)胞凋亡率隨著藥物處理時(shí)間的增加而升高,P2組與P1組相比,細(xì)胞存活率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);P3組與P1組,P3組與P2組相比,細(xì)胞凋亡率差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),P4組與P1組、P4組與P2組、P4組與P3組相比均有顯著差異性(P<0.01)。(3)海馬神經(jīng)細(xì)胞HE染色形態(tài)學(xué)變化:P1組與P2組和C1、2、3、4組海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)基本正常,胞體飽滿(mǎn)、細(xì)胞核清晰可見(jiàn),胞質(zhì)透亮、折光度強(qiáng)有明顯立體感,突起增粗增長(zhǎng);P3組與P4組海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)均有不同程度的損傷,P4組更為顯著,細(xì)胞體積變小,變圓,細(xì)胞皺縮、染色質(zhì)凝集、邊緣化、解離、胞漿致密、突起減少甚至消失,
7、核固縮偏于一側(cè)等細(xì)胞凋亡特征。其中P4組凋亡細(xì)胞個(gè)數(shù)最多。結(jié)論:丙泊酚抑制海馬神經(jīng)細(xì)胞存活并促進(jìn)其凋亡的作用與時(shí)間有關(guān),作用時(shí)間越長(zhǎng),其促進(jìn)凋亡的作用越明顯。關(guān)鍵詞:丙泊酚;海馬;神經(jīng)細(xì)胞;細(xì)胞凋亡;新生大鼠2貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013年研究生學(xué)位論文縮略詞表英文縮寫(xiě)英文全稱(chēng)中文全稱(chēng)DMEM/F12Medium/F12(1:1)F-12培養(yǎng)基DMSODimethylsulfoxide二甲基亞砜ddH20Doubledistilledwater雙蒸水GABAGamm