丙泊酚及醒腦靜預(yù)處理對大鼠離體腦片不同性質(zhì)損傷的保護(hù)作用

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1、《中國圖書資料分類法》單位代碼:10660分類號:R743.31學(xué)號:S100363貴陽醫(yī)學(xué)院2013屆碩士學(xué)位論文丙泊酚及醒腦靜預(yù)處理對大鼠離體腦片不同性質(zhì)損傷的保護(hù)作用研究生:劉曼莉?qū)煟和醯戏医淌谀昙墸?010級專業(yè):麻醉2013年5月25日目錄摘要……………………………………………………1前言……………………………………………………2材料與方法………………………………………………3結(jié)果……………………………………………………9討論……………………………………………………18結(jié)論……………………

2、………………………………22參考文獻(xiàn)…………………………………………………23致謝……………………………………………………25英文摘要…………………………………………………26略縮詞表…………………………………………………27論文原創(chuàng)性聲明…………………………………………28附:綜述………………………………………………29貴陽醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文丙泊酚及醒腦靜預(yù)處理對大鼠離體腦片不同性質(zhì)損傷的保護(hù)作用專業(yè):麻醉學(xué)(重癥醫(yī)學(xué))姓名:劉曼莉?qū)煟和醯戏医淌凇菊磕康奶接懕捶樱╬ropoful

3、)及醒腦靜注射液(xingnaojing)對大鼠離體腦片不同性質(zhì)損傷的保護(hù)作用及其機制。方法取出生7天的SD乳鼠的腦皮質(zhì),用振動切片機切成400~500um的離體腦片,TTC染色判斷腦片活性后將剩余腦片隨機分為七組:正常對照組(A組),谷氨酸(Glu)損傷組(B組),過氧化氫(H2O2)損傷組(C組),丙泊酚預(yù)處理Glu損傷組(D組),醒腦靜預(yù)處理Glu損傷組(E組),丙泊酚預(yù)處理H2O2損傷組(F組),醒腦靜預(yù)處理H2O2損傷組(G組),每組12例。D、E、F、G組在第三天進(jìn)行藥物預(yù)處理24h,丙泊

4、酚濃度為20mg/L,醒腦靜濃度為10ul/ml;腦片成功培養(yǎng)至第四天,建立Glu及H2O2損傷模型,濃度分別采用1mmol/L和0.1mmol/L,所有組(除A組外)在第四天損傷30min,損傷后所有組轉(zhuǎn)入正常培養(yǎng)基中正常孵育至第7天,通過進(jìn)行各組腦片形態(tài)學(xué)及雙染熒光顯微鏡的觀察,檢測LDH漏出率、細(xì)胞凋亡率判斷各組腦片細(xì)胞的凋亡率與損傷程度。結(jié)果丙泊酚能顯著減輕Glu和H2O2對大鼠離體腦片的損傷作用,改善神經(jīng)細(xì)胞受損的形態(tài)學(xué)變化及超微結(jié)構(gòu)的改變,降低神經(jīng)細(xì)胞凋亡率(P﹤0.05),減少乳酸脫氫酶

5、(LDH)的釋放率(P﹤0.05);醒腦靜對以上兩種損傷也有保護(hù)作用(P﹤0.05),但其保護(hù)作用較丙泊酚弱,且兩種藥物的保護(hù)作用的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P﹤0.05)。結(jié)論丙泊酚及醒腦靜注射液對大鼠離體腦片所進(jìn)行的Glu損傷和H2O2損傷均有保護(hù)作用,且對于同一種損傷,丙泊酚的腦保護(hù)作用較醒腦靜強?!娟P(guān)鍵詞】腦片預(yù)處理丙泊酚醒腦靜細(xì)胞凋亡1貴陽醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文前言腦缺血再灌注損傷(I/R)是目前醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域中的熱點之一,主要與腦細(xì)胞鈣超載、氧自由基的損害作用、興奮性氨基酸的毒害作用有關(guān)。目

6、前丙泊酚及醒腦靜的腦保護(hù)作用受到國內(nèi)外的關(guān)注,相關(guān)實驗主要在神經(jīng)細(xì)胞和在體動物中展開,然而在離體腦片水平的研究鮮見報道。因此,本實驗采用皮層腦片培養(yǎng),建立Glu和H2O2損傷模型,從腦片水平研究以上兩種藥物的保護(hù)作用和機制,同時比較兩種藥物保護(hù)效應(yīng)的不同。2貴陽醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文材料與方法一、材料1實驗動物新生7天的SD乳鼠,雌雄兼用。動物購自貴陽醫(yī)學(xué)院實驗動物中心,符合國家二級實驗動物標(biāo)準(zhǔn),動物合格證號:SCXK(黔)2012-001。2藥品和試劑:DMEM/F12培養(yǎng)基HycloneL

7、aboratorries,Inc標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清HycloneLaboratorries,Inc瓊脂粉劑日本Solarbio公司青霉素華北制藥有限公司鏈霉素深圳華藥南方制藥股份公司TTC染劑美國Sigma公司PBS緩沖液武漢博士德10%多聚甲醛武漢博士德LDH測試盒南京建成生物科技發(fā)展有限公司谷氨酸粉劑北京索萊寶科技有限公司過氧化氫(H2O2)溶液南方制藥有限公司谷氨酰胺粉劑北京索萊寶科技有限公司丙泊酚中/長鏈脂肪乳注射液北京費森尤斯卡比有限公司醒腦靜注射液無錫濟(jì)民可信山禾藥業(yè)股份有限公司Millicel

8、l插入式培養(yǎng)皿美國密理博Millipore公司甲苯胺藍(lán)貴陽醫(yī)學(xué)院微生物實驗室提供碘化丙啶(PI)染色劑日本Solarbio公司吖啶橙(AO)染色劑日本Solarbio公司3主要儀器設(shè)備:振動切片機(ZQP-86型)上海之信有限公司超純凈水產(chǎn)生系統(tǒng)美國密理博純水系統(tǒng)CO2恒溫培養(yǎng)箱(MCO-17AIC)日本三洋公司手提式壓力蒸汽滅菌器(YXQ-SG46)上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠倒置相差顯微鏡(XD-101)南京江南光電股份有限公司3貴陽醫(yī)學(xué)院2013

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