高效溶磷菌的篩選、溶磷特性及菌群協(xié)同作用的研究

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1、萬方數(shù)據(jù)高效溶磷菌的篩選、溶磷特性及菌群協(xié)同作用的研究Researchonscreening，characterizationofhighefficientphosphorusdissolvingbacteriaandtheirsynergisticeffect姓2015年6月萬方數(shù)據(jù)獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的內(nèi)容以外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果，也不包含為獲得江蘇大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的

2、材料。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：煮繡加巧年6月7日萬方數(shù)據(jù)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書江蘇大學(xué)、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所、國家圖書館、中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社有權(quán)保留本人所送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致，允許論文被查閱和借閱，同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本論文編入《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》并向社會提供查詢，授權(quán)中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子

3、雜志社將本論文編入《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》并向社會提供查詢。論文的公布(包括刊登)授權(quán)江蘇人學(xué)研究生院辦理。本學(xué)位論文屬于不保密回。學(xué)位論文作者簽名：鷹倩沙ff年6月7日指導(dǎo)教師簽名：∥‘f年．、＼帕r愛“萬方數(shù)據(jù)江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要近幾年來，隨著生態(tài)環(huán)境的惡劣發(fā)展，復(fù)合微生物肥料已成為改善土壤改善農(nóng)作物質(zhì)量的發(fā)展方向。微生物肥料可以通過微生物自身的生命活動分泌活性物質(zhì)促進(jìn)植物生長發(fā)育；通過微生物的作用提高土壤氮磷鉀肥的利用率；通過使用微生物肥料進(jìn)一步減少農(nóng)藥和化學(xué)肥料的使用，從而改善土壤環(huán)境種植綠色食

4、品；對農(nóng)作物產(chǎn)生防病致害作用，間接促進(jìn)作物發(fā)育?；顒拥奈⑸锸俏⑸锓柿系年P(guān)鍵，且其廣泛分布于土壤中，品種和功效繁雜，有望研發(fā)成多功效的復(fù)合微牛物肥料。許多科學(xué)家已經(jīng)對微生物肥料的各方面進(jìn)行了探索研究，例如篩選分離出高效溶磷、解鉀和固氮菌株，將不同菌屬的微生物混合培養(yǎng)并通過菌株間相互關(guān)系研究其組合效應(yīng)等，所以選育培養(yǎng)具有高效并具有特定功能的菌株是極其關(guān)鍵的。本文從土壤中篩選出一株溶磷細(xì)菌，并對其機(jī)理進(jìn)行分析；將其與固氮、解鉀菌混合培養(yǎng)，對其組合培養(yǎng)的溶磷和解鉀作用進(jìn)行了初步研究，主要結(jié)果如下：首先，本課題利用蒙金娜無機(jī)

5、溶磷培養(yǎng)基從桂花樹根際粘附土壤中分離篩選出一株高效溶磷菌株P(guān)0417，并測得其溶磷量為503．53lag／mL。結(jié)合生理生化試驗，并經(jīng)基岡水平序列分析后，初步鑒定該菌屬于伯克霍爾德氏菌(Bur砌olderia)類，為洋蔥伯克霍爾德氏菌(Burkholderiacepacia)。研究了該菌溶磷量和pH值隨發(fā)酵過程的變化曲線，表明其溶磷能力與培養(yǎng)液pH呈顯著相關(guān)性。以洋蔥伯克霍爾德氏菌P0417為出發(fā)菌株，溶磷量為指標(biāo)，利用單因素和正交對其培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明：菌株P(guān)0417在培養(yǎng)基條件為葡萄糖10∥L、草酸銨O．5g

6、／L、NaCI1．0g／L時，具有較好的溶磷能力，測得其溶磷能力為791．84I．tg／mL，可為土壤中磷肥的高效利用提供理論依據(jù)。其次，探討了洋蔥伯克霍爾德氏菌P0417的溶磷機(jī)制，試驗表明該菌在發(fā)酵過程中分泌了多種有機(jī)酸，并驗證了發(fā)酵液pH與該菌的溶磷能力呈顯著相關(guān)性。經(jīng)高效液相分析表明：發(fā)酵過程中P0417的主要代謝產(chǎn)物為草酸、酒石酸、蘋果酸、丙酸、乙酸、檸檬酸和琥珀酸，濃度總量達(dá)420．59mg／L，并人J：模擬P0417菌株產(chǎn)生的有機(jī)酸對Ca3(P04)2溶解情況的試驗表明，有機(jī)酸的溶磷量達(dá)493．89gg／

7、mL。而發(fā)酵過程中也產(chǎn)生了磷酸酶，其活性可達(dá)2571umol／L·h，通過鹽析超濾得出粗酶液，加入Ca3(P04)2測定其溶解度為18．37“g／mL，說明發(fā)酵液中產(chǎn)生的多種有機(jī)酸是溶磷細(xì)菌P0417菌株溶磷的主要機(jī)制，磷酸酶對溶解Ca3(P04)2起到輔助作用。最后，研究了溶磷菌P0417與實驗室購買的兩株溶磷菌、兩株固氮菌和一株解鉀菌混萬方數(shù)據(jù)高效溶磷菌的篩選、溶磷特性及菌群協(xié)IJ作用的研究合培養(yǎng)情況。通過菌株之問的共同培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)一組菌株混合培養(yǎng)存在拮抗性，得到5組互不拮抗的包含3種彳i同功能菌的組合，分別測試其單

8、獨培養(yǎng)和組合培養(yǎng)的溶磷、解鉀能力。結(jié)果表明：溶磷能力：組合l、2和5復(fù)合培養(yǎng)具有1+1+1>3的溶磷效果，其中組合2和組合5的溶磷效果最佳。解鉀能力：5組組合復(fù)合培養(yǎng)均具有1+1+1>3的解鉀效果，其中組合3和組合5的解鉀效果最佳。綜合溶磷、解鉀作用，得出組合5為最佳組合。以組合5為出發(fā)組合菌株，生長量為指標(biāo)，對其培養(yǎng)條件進(jìn)行單因