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《油茶內參基因的篩選與油脂合成相關酶基因的表達特征分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、TheSelectionofReferenceGeneandExpressionAnalysisofOilContentEnzymeGeneinCamelliaoteffeFabySONGZhiboAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofAgricultureForestryCultivation1nCentralSouthUniversityofForestryandTechnology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDistrictC
2、hangshaHunan410004，ER．CHINASupervisorAssociateProfessorZHANGLinMay，2014中南林業(yè)科技大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導師的指導下獨立進行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標注引用的內容外，本論文不包含任何其他個人或集體己經發(fā)表或撰寫的成果作品，也不包含為獲得中南林業(yè)科技大學或其他教育機構的學位或證書所使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均己在文中以明確方式表明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。作者簽名：環(huán)之、彼≯14,年廠月>礙日學位論文版權使用授權
3、書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件或電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權中南林業(yè)科技大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。本學位論文屬于：1、保密口，在——年解密后適用本授權書。2、不保密甌(請您在以上相應方框打“4’’)作者簽名：琮名．波導師簽名：芻美巾哆卜矽f卑年錒乃日汐／4年尹月研日摘要油茶(Camelliaoleifera)是我國原產的優(yōu)質油料樹種之一，因為所產茶油富含不飽和脂肪酸而被譽為“東方橄欖油”。優(yōu)良油茶
4、品種所產的茶油中不飽和脂肪酸含量高達90％(以油酸和亞油酸為主，還含有少量的亞麻酸等高價不飽和脂肪酸)，遠遠高于菜油、花生油和豆油。在植物生長過程中，調控油脂合成的基因：SAD基因是調控油脂中油酸合成的關鍵基因；GPAT基因、LPAAT基因、PAP基因、DG■丁基因和PDAT基因是TAG合成的相關基因，其中DG么丁基因是TAG合成Kenendy途徑的限速酶，而PDAT基因是TAG合成另一途徑的關鍵基因：尉D基因主要催化多不飽和脂肪酸的合成，其中FAD2基因和FAD6基因則是調控油酸經催化生成亞油酸的關鍵基因，F(xiàn)AD3基因和FAD7基因則是調控亞油酸經催化生成亞麻酸的關鍵基
5、因，但它們在植物中都有多個拷貝。目前已經完成了油茶成熟種子eDNA文庫以及EST文庫的構建，得到了近成熟種子中油脂合成相關基因的表達豐度，并在此基礎上已經完成了對SAD基因、DGATl基因、FAD2基因和FAD6基因的序列克隆。本研究主要完成了：(1)油茶不同器官／組織的總RNA提取方法：Ambion@RNA提取試劑盒+CTAB法，經瓊脂凝膠電泳及分光光度計檢測，所得RNA濃度高，質量好。(2)在油茶轉錄組數(shù)據(jù)基礎上對油茶內參基因進行了初步篩選，得到可以應用于油茶種仁表達分析的內參候選基因ALB、EFla、EFlfl、ETIF3H、UBC；僅可以應用于油茶根、莖、葉表達分
6、析的候選內參基因ETIF3H，可以應用于油茶根、莖、花、葉及種仁表達分析的候選內參基因EFla。(3)油茶轉錄組數(shù)據(jù)和已克隆油脂合成相關基因的基礎上，通過使用RT-qPCR，對優(yōu)良無性系油茶品種“華碩’’中油脂合成相關酶基因的表達模式進行了研究：I．油脂合成相關酶基因在種仁內的相對表達量從高到低依次為：FAD2基因、PDAT基因、PAP基因、DGAT基因、FAD7基因、FAD6基因、SAD基因、FAD3基因、LPAAT基因、GPAT基因。其中．翱D基因、LB擬r基因、PAP基因、DGAT基因、PDAT基因及覷D基因在花后42周均出現(xiàn)表達高峰，這與油脂含量變化及油酸含量變化
7、規(guī)律吻合，而GPAT基因在油脂合成中的調控機制有待進一步研究；在同一時期，亞油酸和亞麻酸的含量出現(xiàn)下降，推測可能是因為油脂中油酸的合成速率要遠遠大于油酸轉化為亞油酸的速率，而亞麻酸的轉化速率也因此受到影響，因為FAD基因的拷貝數(shù)目很多，所以有關于FAD基因的調控機制有待進一步研究。II．采用灰色關聯(lián)度法分析法對油脂合成相關基因的表達與種仁油脂含量和油脂脂肪酸成分進行關聯(lián)性分析，結果顯示：A．油脂合成相關基因與油茶種仁中油脂含量的灰色關聯(lián)度由高到低依次為：DGAT(0．9494)、PDAT(O．8356)、尉D7(0．7716)
