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1、分類號：S壘2魚密級：公玨單位代碼：!QQ墨委學號：2Q!Q壘15桃蛀螟嗅覺相關基因的篩選與表達譜分析IdentificationandExpressionProfilingoftheOlfactoryRelatedGenesinConogethespunctiferalis(Lepidoptera：Crambidae)學位申請人：葛星指導教師：王振營研究員王勤英教授學科專業(yè)：農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治學位類別：農(nóng)學碩士授予單位：；．--fjL農(nóng)業(yè)大學答辯日期：二。一三年五月二十五日獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致
2、謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得燙j量壅些太堂或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名：葛星簽字日期：為侈年』月；／日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解通j匕壅些太堂有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權通j壁壅些太堂可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者
3、簽名：藹顯導師簽名：搖老簽字日期：瑚f?年!月弓f日簽字同期：刎弓年j月弓7日學位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：通訊地址：電話：郵編：摘要昆蟲個體問以及昆蟲與環(huán)境問的交流主要依靠嗅覺和味覺來實現(xiàn)，其中嗅覺系統(tǒng)在長期的進化過程中，已經(jīng)發(fā)展成為高度專一、極其靈敏的化學檢測器，它能夠?qū)⑼饨鐐魅氲幕瘜W信號轉(zhuǎn)化為電信號，從而調(diào)節(jié)昆蟲的行為活動，如尋找食物、覓偶、寄主、棲息場所、產(chǎn)卵場所以及躲避不良環(huán)境等，因此對昆蟲的存活和繁殖起到重要作用。昆蟲對外界氣味分子的識別過程主要涉及到幾種蛋白，這些蛋白包括氣味結合蛋白、化學感受蛋白、氣味受體蛋白和氣味降解酶等。在害蟲防治過程中，這些蛋白可作為新的靶標，切斷任
4、意一個環(huán)節(jié)，都可能破壞昆蟲對外界氣味分子的識別，從而影響其正常活動。桃蛀螟是農(nóng)林生產(chǎn)過程中危害十分嚴重的一種害蟲，而且寄主十分廣泛，每年都會造成巨大的經(jīng)濟損失。目前對桃蛀螟的防治主要采取化學防治，長期、大量的使用化學農(nóng)藥極易引發(fā)害蟲的抗藥性，因此需要尋找新的防治技術，特別是生物防治技術，以持續(xù)、有效的控制桃蛀螟的危害。本文通過構建桃蛀螟觸角cDNA文庫，篩選出與嗅覺相關的基因，為進一步研究該基因的功能奠定了基礎，并為桃蛀螟的生物防治提供了理論支持。主要研究結果如下：1．利用SMART技術構建了桃蛀螟成蟲觸角的cDNA文庫，獲得l867條ESTs序列，利用生物信息學方法篩選出28個嗅覺相關蛋白
5、基因，其中包括11個氣味結合蛋白基因，4個信息素結合蛋白基因，1個普通氣味結合蛋白基因，1個觸角結合蛋白基因，8個化學感受蛋白基因，3個氣味受體基因。2．首次克隆了桃蛀螟氣味受體蛋白基因CpunOrco的開放閱讀框(ORF)全長和內(nèi)參基因fl-acan部分序列，GenBank登錄號分別為為JXl01681和JXll9014。CpunOrco基因的開放閱讀框全長1425bp，編碼475個氨基酸，序列中有7個跨膜區(qū)。利用熒光定量PCR技術分析CpunOrco基因在桃蛀螟雌雄蛾不同組織內(nèi)的表達譜，結果表明，CpunOrco基因在雌雄蛾觸角、喙、下顎須、足、腹部和胸部都表達，不同組織間以及雌雄蛾的表
6、達量存在較大差異，主要在觸角和下顎須中表達，且雄蛾觸角中表達量高于雌蛾觸角。3．利用半定量方法分析可溶性蛋白OBP和CSP在雌雄蛾不同組織的表達情況，結果顯示OBP和CSP主要在觸角中表達，CpunGOBP、CpunOBPl．5、CpunOBPlO在下顎須中也有一定的表達，CpunOBP3-5、CpunOBP8—11在雄蛾觸角中的表達量遠高于雌蟲。CSP的分布范圍LLOBP廣，CpunCSPl—2、CpunCSP5—6、CpunCSP8在雌雄蛾各部位都表達，以觸角中的表達量最高。CpunCSP4、CpunCSP77在觸角和下顎須中表達，并且雄蛾的表達量高于雌蛾。關鍵詞：桃蛀螟；嗅覺相關蛋白；
7、cDNA文庫；表達譜。IdentificationandExpressionProfilingoftheOlfactoryRelatedGenesinConogethespunctiferalis(Lepidoptera：Crambidae)Mastercandidate：GeXingSupervisor：Prof．WangZhenyingProf．WangQinyingMajor：AgriculturalI
