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《桃蛀螟嗅覺相關(guān)基因的篩選與表達(dá)譜分析》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號:S壘2魚密級:公玨單位代碼:!QQ墨委學(xué)號:2Q!Q壘15桃蛀螟嗅覺相關(guān)基因的篩選與表達(dá)譜分析IdentificationandExpressionProfilingoftheOlfactoryRelatedGenesinConogethespunctiferalis(Lepidoptera:Crambidae)學(xué)位申請人:葛星指導(dǎo)教師:王振營研究員王勤英教授學(xué)科專業(yè):農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治學(xué)位類別:農(nóng)學(xué)碩士授予單位:;.--fjL農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期:二。一三年五月二十五日獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致
2、謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得燙j量壅些太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:葛星簽字日期:為侈年』月;/日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解通j匕壅些太堂有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)通j壁壅些太堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者
3、簽名:藹顯導(dǎo)師簽名:搖老簽字日期:瑚f?年!月弓f日簽字同期:刎弓年j月弓7日學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向:工作單位:通訊地址:電話:郵編:摘要昆蟲個體問以及昆蟲與環(huán)境問的交流主要依靠嗅覺和味覺來實(shí)現(xiàn),其中嗅覺系統(tǒng)在長期的進(jìn)化過程中,已經(jīng)發(fā)展成為高度專一、極其靈敏的化學(xué)檢測器,它能夠?qū)⑼饨鐐魅氲幕瘜W(xué)信號轉(zhuǎn)化為電信號,從而調(diào)節(jié)昆蟲的行為活動,如尋找食物、覓偶、寄主、棲息場所、產(chǎn)卵場所以及躲避不良環(huán)境等,因此對昆蟲的存活和繁殖起到重要作用。昆蟲對外界氣味分子的識別過程主要涉及到幾種蛋白,這些蛋白包括氣味結(jié)合蛋白、化學(xué)感受蛋白、氣味受體蛋白和氣味降解酶等。在害蟲防治過程中,這些蛋白可作為新的靶標(biāo),切斷任
4、意一個環(huán)節(jié),都可能破壞昆蟲對外界氣味分子的識別,從而影響其正?;顒?。桃蛀螟是農(nóng)林生產(chǎn)過程中危害十分嚴(yán)重的一種害蟲,而且寄主十分廣泛,每年都會造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前對桃蛀螟的防治主要采取化學(xué)防治,長期、大量的使用化學(xué)農(nóng)藥極易引發(fā)害蟲的抗藥性,因此需要尋找新的防治技術(shù),特別是生物防治技術(shù),以持續(xù)、有效的控制桃蛀螟的危害。本文通過構(gòu)建桃蛀螟觸角cDNA文庫,篩選出與嗅覺相關(guān)的基因,為進(jìn)一步研究該基因的功能奠定了基礎(chǔ),并為桃蛀螟的生物防治提供了理論支持。主要研究結(jié)果如下:1.利用SMART技術(shù)構(gòu)建了桃蛀螟成蟲觸角的cDNA文庫,獲得l867條ESTs序列,利用生物信息學(xué)方法篩選出28個嗅覺相關(guān)蛋白
5、基因,其中包括11個氣味結(jié)合蛋白基因,4個信息素結(jié)合蛋白基因,1個普通氣味結(jié)合蛋白基因,1個觸角結(jié)合蛋白基因,8個化學(xué)感受蛋白基因,3個氣味受體基因。2.首次克隆了桃蛀螟氣味受體蛋白基因CpunOrco的開放閱讀框(ORF)全長和內(nèi)參基因fl-acan部分序列,GenBank登錄號分別為為JXl01681和JXll9014。CpunOrco基因的開放閱讀框全長1425bp,編碼475個氨基酸,序列中有7個跨膜區(qū)。利用熒光定量PCR技術(shù)分析CpunOrco基因在桃蛀螟雌雄蛾不同組織內(nèi)的表達(dá)譜,結(jié)果表明,CpunOrco基因在雌雄蛾觸角、喙、下顎須、足、腹部和胸部都表達(dá),不同組織間以及雌雄蛾的表
6、達(dá)量存在較大差異,主要在觸角和下顎須中表達(dá),且雄蛾觸角中表達(dá)量高于雌蛾觸角。3.利用半定量方法分析可溶性蛋白OBP和CSP在雌雄蛾不同組織的表達(dá)情況,結(jié)果顯示OBP和CSP主要在觸角中表達(dá),CpunGOBP、CpunOBPl.5、CpunOBPlO在下顎須中也有一定的表達(dá),CpunOBP3-5、CpunOBP8—11在雄蛾觸角中的表達(dá)量遠(yuǎn)高于雌蟲。CSP的分布范圍LLOBP廣,CpunCSPl—2、CpunCSP5—6、CpunCSP8在雌雄蛾各部位都表達(dá),以觸角中的表達(dá)量最高。CpunCSP4、CpunCSP77在觸角和下顎須中表達(dá),并且雄蛾的表達(dá)量高于雌蛾。關(guān)鍵詞:桃蛀螟;嗅覺相關(guān)蛋白;
7、cDNA文庫;表達(dá)譜。IdentificationandExpressionProfilingoftheOlfactoryRelatedGenesinConogethespunctiferalis(Lepidoptera:Crambidae)Mastercandidate:GeXingSupervisor:Prof.WangZhenyingProf.WangQinyingMajor:AgriculturalI