卵母細(xì)胞分泌因子在人mⅱ卵母細(xì)胞的卵丘顆粒細(xì)胞中的表達(dá)及其與卵母細(xì)胞發(fā)育潛能關(guān)系的研究

《卵母細(xì)胞分泌因子在人mⅱ卵母細(xì)胞的卵丘顆粒細(xì)胞中的表達(dá)及其與卵母細(xì)胞發(fā)育潛能關(guān)系的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)中文摘要QuantiFast⑧SYBR@GreenPCRkit熒光定量PCR反應(yīng)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行：具體條件設(shè)置如下：95℃預(yù)變性2min；95℃變性15s，60℃退火／延伸30s，共40個(gè)循環(huán)。運(yùn)算分析最終所得Ct值。6數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析將realtimeRT-PCR所得的Ct值按照公式2△C‘進(jìn)行運(yùn)算，數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(i士s)表示，利用SPSSl3．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，比較組間細(xì)胞因子水平的差異采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P

2、規(guī)長(zhǎng)方案組(CC=172份)及微刺激組(CC=160份)。因卵母細(xì)胞與卵丘顆粒細(xì)胞是一一對(duì)應(yīng)的，所以根據(jù)每個(gè)卵子受精、卵裂及囊胚發(fā)育情況，回顧性將CCs進(jìn)行分組。根據(jù)卵子受精情況將CCs分為正常受精組(長(zhǎng)方案組CCs=127份，微刺激方案組CCs--136份)及異常受精組(長(zhǎng)方案組CCs=45份，微刺激方案組CCs=24份)；正常受精組根據(jù)第3日胚胎卵裂情況分為優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組(長(zhǎng)方案組CCs=58份，微刺激方案組CCs=76份)及非優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組(長(zhǎng)方案組CCs=69份，微刺激方案組CCs=60

3、份)；非優(yōu)質(zhì)卵裂胚繼續(xù)培養(yǎng)，根據(jù)第5日形成囊胚情況，分為優(yōu)質(zhì)囊胚形成組(長(zhǎng)方案組CCs=24份，微刺激方案組CCs=12份)及非優(yōu)質(zhì)囊胚形成組(長(zhǎng)方案組CCs=45份，微刺激方案組CCs=48份)。未成熟、畸形卵子所對(duì)應(yīng)的卵丘顆粒不列入分組研究中。共有41例患者332份(常規(guī)長(zhǎng)方案患者21例172份，微刺激方案20例i60份)卵丘顆粒細(xì)胞用于RT-PCR檢測(cè)。2人卵丘顆粒細(xì)胞中GDF．9與卵母細(xì)胞發(fā)育潛能的關(guān)系GDF．9有利于卵母細(xì)胞受精、卵裂及囊胚的形成。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可以看出，2種促排卵方案中，GD

4、F．9mRNA相對(duì)表達(dá)量：正常受精組顯著高于異常受精組(尸=O．020，P=-0．001)；優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組顯著高于非優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組(P=O．001，P=-0．043)；優(yōu)質(zhì)囊胚形成組與非優(yōu)質(zhì)囊胚形成組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(尸=O．002，P=0．001)。3人卵丘顆粒細(xì)胞中BMP．15與卵母細(xì)胞發(fā)育潛能的關(guān)系通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可以看出，不論常規(guī)長(zhǎng)方案組還是微刺激方案組，BMP．15mRNA的相對(duì)表達(dá)量在卵母細(xì)胞發(fā)育的不同結(jié)局中均有顯著性差異。2種促排方案中，BMP．15mRNA相對(duì)表達(dá)量：正常受精組顯著高于異

5、常受精萬(wàn)方數(shù)據(jù)中文摘要組(P=-0．000，P=0．000)；優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組與非優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組，組間有顯著性差異(仁O．003，P=0．048)；優(yōu)質(zhì)囊胚形成組與非優(yōu)質(zhì)囊胚形成組間有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(尸=O．033，P=-0．029)?？梢钥闯?，BMP．15mRNA相對(duì)含量與卵母細(xì)胞發(fā)育潛能成正相關(guān)。4人卵丘顆粒細(xì)胞中TGF．131與卵母細(xì)胞發(fā)育潛能的關(guān)系TGFl31含量與卵子的質(zhì)量和發(fā)育潛能密切相關(guān)。TGF．131基因mRNA無(wú)論在常規(guī)長(zhǎng)方案組還是微刺激方案組中，其相對(duì)表達(dá)量在正常受精組中顯著高

6、于異常受精組(尸=O．003，P=0．022)；優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組顯著高于非優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組(P=-0．015，P=0．022)；優(yōu)質(zhì)囊胚形成組與非優(yōu)質(zhì)囊胚形成組間有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=-0．001，P=0．025)。5人卵丘顆粒細(xì)胞中Smad3與卵母細(xì)胞發(fā)育潛能的關(guān)系常規(guī)長(zhǎng)方案組及微刺激方案組中，Smad3mRNA的相對(duì)表達(dá)量正常受精組顯著高于異常受精組(尸=O．006，P=-0．012)：優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組與非優(yōu)質(zhì)卵裂胚形成組，組間比較有顯著性差異(尸-O．019，P=0．041)；優(yōu)質(zhì)囊胚形成組與

7、非優(yōu)質(zhì)囊胚形成組間有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(盧O．000，P=0．028)。可以看出，卵丘顆粒細(xì)胞中Smad3mRNA的含量較高的卵母細(xì)胞有較好的發(fā)育潛能。6不同促排方案與GDF．9、BMP．15、TGF．131和Smad3表達(dá)量的關(guān)系常規(guī)長(zhǎng)方案與微刺激方案中，年齡無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。GDF．9和Smad3相對(duì)表達(dá)量在常規(guī)長(zhǎng)方案組中顯著高于微刺激方案組(盧O．000，P=0．004，P=0．005)，BMP．15相對(duì)表達(dá)量在微刺激組中顯著高于常規(guī)長(zhǎng)方案組(尸=O．004)，而TGF．131相對(duì)表達(dá)量在常規(guī)長(zhǎng)方案組

8、中和微刺激方案組中無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(尸=O．653)。提示GDF．9、BMP．15和Smad3因子在CCs中的表達(dá)量與促排卵方案有關(guān)，常規(guī)長(zhǎng)方案組可以刺激CCs分泌更多的GDF．9和Smad3因子，微刺激方案組可以刺激CCs分泌更多的BMP．15因子，TGF．131相對(duì)含量與促排卵方案無(wú)關(guān)。結(jié)論：1GDF．9、BMP．15、TGF．131、Smad3在卵丘顆粒細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)量與卵母細(xì)胞質(zhì)量及發(fā)育潛能成正相關(guān)，提示其可以作為評(píng)價(jià)卵母細(xì)胞質(zhì)量、預(yù)測(cè)卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能的客觀(guān)指