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《tpa-pai-1系統(tǒng)在牛卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體體外成熟進(jìn)程中的表達(dá)》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號S828學(xué)校代碼10129UDC11.220學(xué)號2009201050tPA-PAI-1系統(tǒng)在牛卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體體外成熟進(jìn)程中的表達(dá)ExpressionofTissue-TypePlasminogenActivator-PlasminogenActivatorInhibitor-1SysteminBovineCumulus-OocytesduringinvitroMaturation申請人：關(guān)洪敏學(xué)科門類：農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)：基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)研究方向：動物組織胚胎與發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師：曹貴方教授李海軍副教授論文提交日期：二〇一二年六月摘要為了初步了解組織型纖溶酶原激活劑
2、(tissue-plasminogenactivator，tPA)、1型纖溶酶原激活劑抑制劑(plasminogenactivatorinhibitor-1，PAI-1)和纖溶酶原(plasminogen，PLG)在牛卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體體外成熟進(jìn)程中的潛在作用；本文運(yùn)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR技術(shù)分別檢測體外成熟過程中不同時(shí)間段（0h、8h、16h、24h）、添加不同濃度卵泡刺激素(follicle-stimulatinghormone，F(xiàn)SH)以及卵泡刺激素受體結(jié)合抑制劑(follicle-stimulatinghormonereceptor-bindinginhi
3、bitor，F(xiàn)RBI-10)成熟培養(yǎng)16h后牛卵丘細(xì)胞和卵母細(xì)胞中tPA、PAI-1及PLG基因相對表達(dá)變化，觀察添加不同濃度FSH成熟培養(yǎng)16h后卵丘細(xì)胞膨脹程度差異，并統(tǒng)計(jì)卵母細(xì)胞第一極體排出情況。1.卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體在體外成熟過程中，卵丘細(xì)胞和卵母細(xì)胞tPAmRNA相對表達(dá)量，于體外成熟16h顯著高于0h和8h，24h達(dá)到最高(P<0.05)；而卵丘細(xì)胞PAI-1mRNA相對表達(dá)量于8h達(dá)到最高，顯著高于16h和24h(P<0.05)。卵丘細(xì)胞PLGmRNA相對表達(dá)量總體趨勢和tPA類似，于16h顯著高于0h和8h，在24h達(dá)到最高(P<0.05)。卵母細(xì)
4、胞PAI-1mRNA相對表達(dá)量于16h顯著高于0h和8h，達(dá)到最高，并顯著高于24h(P<0.05)。2.在添加不同濃度FSH(0、0.01、0.1和1IU/mL)體外成熟16h的各處理組，卵丘細(xì)胞中tPAmRNA相對表達(dá)量隨FSH添加濃度的升高而升高，當(dāng)FSH添加濃度1IU/mL，卵丘細(xì)胞之間的縫隙連接較為松散且發(fā)暗。卵丘細(xì)胞中的PAI-1mRNA相對表達(dá)量在0.01IU/mLFSH時(shí)高于其他各處理組；同時(shí)卵丘細(xì)胞PLGmRNA表達(dá)水平在0.01IU/mLFSH時(shí)達(dá)到最低，于0.1IU/mL和1IU/mL時(shí)顯著升高(P<0.05)。卵母細(xì)胞tPA表達(dá)變化顯示出與
5、第一極體排出率相似的趨勢，即0.01IU/mLFSH處理組的tPAmRNA水平和第一極體排出率顯著高于其他處理組(P<0.05)。卵母細(xì)胞中PAI-1mRNA相對表達(dá)量在0.01IU/mLFSH時(shí)最高，顯著高于其他各FSH添加組(P<0.05)。3.在添加FRBI-10體外成熟16h的各處理組，在只添加FSH組的卵丘細(xì)胞tPAmRNA相對表達(dá)量顯著高于其他各處理組(P<0.05)；卵母細(xì)胞中tPAmRNA相對表達(dá)量在只添加FSH組顯著高于空白組(P<0.05)，在只添加FSH組，卵丘細(xì)胞和卵母細(xì)胞中PAI-1mRNA相對表達(dá)量最高，顯著高于其他各處理組(P<0.0
6、5)；卵丘細(xì)胞和卵母細(xì)胞PLGmRNA相對表達(dá)量在只添加FSH組卻顯著低于空白組(P<0.05)。綜合以上研究結(jié)果，本研究認(rèn)為：牛卵丘細(xì)胞中tPA與PAI-1基因的表達(dá)受FSH正向調(diào)節(jié)，而PLG基因表達(dá)卻受到FSH的抑制；進(jìn)而推測，tPA-PAI-1系統(tǒng)對卵丘細(xì)胞在體外成熟過程中的擴(kuò)散并不起促進(jìn)作用；在卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體體外成熟過程中，tPA-PAI-1系統(tǒng)可能參與對牛卵泡排卵過程的調(diào)控。同時(shí)，tPA在卵母細(xì)胞中的表達(dá)是否與其第一極體排出有關(guān)，需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步研究tPA-PAI-1系統(tǒng)在牛卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體體外成熟過程中的具體作用奠定了基礎(chǔ)。關(guān)
7、鍵詞：tPA；牛；卵丘細(xì)胞；卵母細(xì)胞；FSH；FRBI-10ExpressionofTissue-TypePlasminogenActivator-PlasminogenActivatorInhibitor-1SysteminBovineCumulus-OocytesduringinvitroMaturationAbstractInthepresentstudy,fourexperimentswereconductedtoinvestigatethepotentialeffectsoftPA,PAI-1andPLGonbovinecumuluscellsandoo
8、cytes
