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《小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞表型和功能的影響及機(jī)制》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號(hào)墅窆2：12UDC魚12密級(jí)一坌玨一編號(hào)!Q2窆窆圣!Ql壘QQ壘一@江蒜大擎碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATION密級(jí)公五編號(hào)lQ2坌2圣!Ql壘QQ壘碩士學(xué)位論文小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞表型和功能的影響及機(jī)制THEEFFECTSANDMECHANISMSoFMoUSEBoNEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLSONTHEPoLARIZATIoNPHENoTYPEANDFUNCTIoNoFMACRoPHAGE作者姓名：高碩指導(dǎo)教師：許文榮教授小組成員：錢暉教授朱偉研究員申請(qǐng)學(xué)
2、位：碩士學(xué)科專業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)論文提交日期：2013年4月28日論文答辯日期：2013年6月10日學(xué)位授予單位：江蘇大學(xué)學(xué)位授予日期：2013年6月17日答辯委員會(huì)主席：張竹繁教授基金資助：國家自然科學(xué)基金重大研究計(jì)劃(91129718)；國家自然科學(xué)基金(81000181)；江蘇省高校自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(10KJB310002)；江蘇大學(xué)高級(jí)人才啟動(dòng)基金(10JDG094)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的內(nèi)容以外，本論文不包含任何其
3、他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果，也不包含為獲得江蘇大學(xué)或其他教育機(jī)／構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：高石乙2,o嗎年6只{《日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書江蘇大學(xué)、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所、國家圖書館、中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社有權(quán)保留本人所送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致，允許論文被查閱和借閱，同時(shí)授權(quán)中國科
4、學(xué)技術(shù)信息研究所將本論文編入《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》并向社會(huì)提供查詢，授權(quán)中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社將本論文編入《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》并向社會(huì)提供查詢。論文的公布(包括刊登)授權(quán)江蘇大學(xué)研究生院辦理。本學(xué)位論文屬于不保密學(xué)位論文作者簽名：高石讓江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要目的：間質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstemcells，MSCs)在組織再生、炎癥反應(yīng)及損傷修復(fù)中發(fā)揮重要作用。有研究表明MSCs對(duì)巨噬細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用在這些過程中十分關(guān)鍵，然而這種作用的機(jī)制仍不十分明確。本研究旨在探討小鼠骨髓M
5、SCs在正常或脂多糖(LPS)刺激條件下對(duì)巨噬細(xì)胞的極化表型和功能的影響，并對(duì)相關(guān)機(jī)制進(jìn)行了初步研究，為進(jìn)一步探索MSCs的免疫調(diào)節(jié)和促損傷修復(fù)機(jī)制提供依據(jù)。方法：分離培養(yǎng)小鼠骨髓MSCs，體外與小鼠巨噬細(xì)胞株RAW264．7或磁珠分選的小鼠脾臟CDllb陽性單核／巨噬細(xì)胞間接共培養(yǎng)，LPS作為刺激因素，qRT．PCR及ELISA方法檢測(cè)巨噬細(xì)胞M1／M2相關(guān)因子表達(dá)水平(TNF．僅、IL．6、IL．10、Arg．1)；流式細(xì)胞術(shù)及免疫熒光技術(shù)檢測(cè)RAW264．7細(xì)胞M2標(biāo)記CD206的表達(dá)情況；細(xì)胞計(jì)數(shù)和MTT實(shí)驗(yàn)
6、研究MSC條件培養(yǎng)基(MSC．CM)對(duì)RAW264．7細(xì)胞增殖能力的影響；Tranwell遷移實(shí)驗(yàn)研究MSCs對(duì)RAW264．7細(xì)胞遷移功能的影響。此外，采用Westernblot方法研究MSC．CM對(duì)RAW264．7細(xì)胞M1／M2相關(guān)信號(hào)通路NF．r．B和STAT3的影響。結(jié)果：MSCs間接接觸或上清作用于RAW264．7細(xì)胞，降低了M1型細(xì)胞因子TNF．a(chǎn)基因水平而升高了M2型相關(guān)基因IL-10、Arg．1表達(dá)水平。ELISA結(jié)果顯示MSC．CM能使RAW264．7細(xì)胞IL．6分泌水平降低，而使IL．10分泌水平
7、增高。MSCs培養(yǎng)上清在LPS存在的條件下能降低脾臟單核／巨噬細(xì)胞TNF．a(chǎn)表達(dá)水平，增高Arg一1表達(dá)水平。流式細(xì)胞術(shù)及免疫熒光結(jié)果顯示MSC．CM增加了RAW264．7細(xì)胞M2型標(biāo)記CD206表達(dá)。同時(shí)，細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果表明MSC．CM作用組與對(duì)照組相比能增加RAW264．7細(xì)胞數(shù)量，MTT實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了這小鼠骨髓聞質(zhì)干細(xì)胞對(duì)臣噬細(xì)胞表型和功能的影響及機(jī)制一結(jié)果。在有或無LPS刺激的條件下，MSCs能顯著增加RAW264．7細(xì)胞的遷移數(shù)量。Westernblot結(jié)果顯示，MSC．CM抑制LPS誘導(dǎo)的NF。r．B活化，降
8、低NF．r,Bp65入核及磷酸化p65表達(dá)量，抑制下游炎性基因IL。lp和TNF．Q的表達(dá)水平。另一方面MSC．CM增加了JAKl和STAT3磷酸化蛋白表達(dá)水平。此外，STAT3信號(hào)抑制劑$3I．201，抑制了MSC．CM對(duì)巨噬細(xì)胞IL—lO和Arg-1基因表達(dá)的增強(qiáng)作用。結(jié)論：小鼠骨髓MSCs能通過問接接觸或培養(yǎng)上清作用促進(jìn)巨噬細(xì)胞由M1型向
