資源描述：
《甘草及其mirna對小鼠腸道菌群和免疫的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、廣東藥科大學碩士研究生學位論文分類號：___________密級：__________UDC：___________甘草及其miRNA對小鼠腸道菌群和免疫的影響姓名：徐鵬程學號：2111540130院系：藥學院學位類型：專業(yè)學位專業(yè)：藥學碩士研究方向：藥物研發(fā)與轉(zhuǎn)化導師：邵紅偉教授論文提交日期：2018年3月20日論文答辯日期：2018年5月18日學位授予單位：廣東藥科大學二〇一八年三月廣東藥科大學碩士研究生學位論文TheEffectsofGlycyrrhizauralensisanditsmiRNAonIntestinalFl
2、oraandIntestinalImmunityCandidate：PengchengXuStudentID：2111540130Affiliation：SchoolofPharmacyAcademicDegreeApliedfor：professionaldegreeofPharmaceuticalSpeciality：PharmaceuticalscienceSupervisor：Prof.HongweiShaoAssistantSupervisor：Prof.WendeLiDayofDefence：May2018Degre
3、e-Conferring-Institution：GuangdongPharmaceuticalUniversityMarch2018廣東藥科大學碩士研究生學位論文廣東藥科大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：本人所呈交的學位論文，系我個人在導師的指導下進行研究工作所取得的成果。除文中已特別加以標注和致謝的地方外，不包含其它個人或機構已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本研究做出貢獻的其它個人和集體，均已在文中明確說明和致謝。本人充分意識到本聲明的法律結(jié)果完全由本人承擔。學位論文作者簽名：日期：年月日學位論文使用授權的聲明本人完全了解廣
4、東藥科大學有關保留和使用學位論文的規(guī)定，學校有權保留和向有關部門或機構送交本論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。學校可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫，可以采用影印、縮印或其它復印手段保存和匯編本學位論文。保密論文在解密后適用本聲明。論文作者簽名：論文導師簽名：日期：年月日廣東藥科大學碩士研究生學位論文甘草及其miRNA對小鼠腸道菌群和免疫的影響摘要背景及目的：前期實驗研究發(fā)現(xiàn)，miRNA156在甘草水提物miRNA中豐度較高，并經(jīng)由細胞形態(tài)學、細胞增殖情況和免疫相關基因表達探索了甘草miRNA對人免疫細胞的
5、影響。本研究從小鼠腸道菌群、淋巴細胞免疫基因表達、腸道組織轉(zhuǎn)錄組表達情況及腸道組織形態(tài)觀察探究甘草及其miRNA對小鼠的影響，為拓展中藥研究新方向奠定了基礎。方法：1、制取甘草水提物及對照組金銀花水提物，根據(jù)前期高通量測序結(jié)果中miRNA156序列，設計合成相應的miRNA156mimic及相應的反轉(zhuǎn)錄及檢測引物，分別通過灌胃不同劑量甘草水提物、miRNA156mimic及尾靜脈注射miRNA156mimic進行后續(xù)實驗。眼球取血并離心獲得小鼠血清，利用qRT-PCR檢測血清中的miRNA。2、取小鼠新鮮糞便提取基因組DNA，進
6、行16SrDNAV4V5高變區(qū)測序，分析各組間門綱目科屬水平腸道菌群的差異，并通過α多樣性及β多樣性分析確定各組間關系及miRNA156在甘草中發(fā)揮的作用。3、取小鼠回腸片段，一部分液氮研磨提取RNA用于轉(zhuǎn)錄組測序并進行生物信息學分析，另外一部分樣品用4%多聚甲醛溶液進行固定，HE染色，光學顯微鏡觀測并保存照片，分析各組樣品間的差異。4、取小鼠脾臟組織，用濾網(wǎng)研磨，破紅處理獲得淋巴細胞，提取總RNA，通過qRT-PCR檢測各組間淋巴細胞中轉(zhuǎn)錄因子和細胞因子的表達差異。I廣東藥科大學碩士研究生學位論文結(jié)果：1、通過動物實驗獲取小鼠
7、血液、糞便、脾臟組織及回腸組織。通過qRT-PCR檢測血清中miRNA，并未在血清中檢測出與miRNA156陽性對照組相同的產(chǎn)物。2、16SrDNAV4V5高變區(qū)測序結(jié)果表明，小鼠體內(nèi)的腸道微生物大部分由厚壁菌門，擬桿菌門和變形菌門等構成，與鹽水對照組相比，伴隨著甘草水提物濃度的增大，擬桿菌門和變形菌門豐度都相對發(fā)生下降，而厚壁菌門豐度明顯增加；甘草miRNA對厚壁菌門影響不大，但是減少了擬桿菌門，增加了變形菌門，而發(fā)生變化的一些細菌已被證明與炎癥或營養(yǎng)吸收有關。3、回腸樣品轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果中，聯(lián)系GO功能富集和KEGG通路分析找
8、到了與免疫密切相關的表達差異基因，并進行了驗證。通過觀察各組回腸組織HE染色后的病理組織切片發(fā)現(xiàn)，除甘草低劑量組、miRNA尾靜脈注射組和鹽水對照組保持了完整的絨毛結(jié)構，高劑量的甘草水提物甚至導致了炎癥，miRNA156mimic通過灌胃對回腸產(chǎn)生了炎癥作用。4
