雪菊糖聚物的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及藥理活性研究

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1、廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文分類號：___________密級：__________UDC：___________雪菊糖聚物的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及藥理活性研究姓名：陳威學(xué)號：2111540135院系：藥學(xué)院學(xué)位類型：專業(yè)學(xué)位專業(yè)：藥學(xué)研究方向：藥物研發(fā)與轉(zhuǎn)化導(dǎo)師：嚴(yán)春艷教授論文提交日期：2018年03月20日論文答辯日期：2018年05月23日學(xué)位授予單位：廣東藥科大學(xué)二〇一八年五月廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文Isolation,Purification,StructuralCharacterizationandBioactivitiesofSaccharides

2、fromCoreopsistinctoriaNuttCandidate：WeiChenStudentID：2111540135Affiliation：SchoolofPharmacyAcademicDegreeApliedfor：ProfessionaldegreeofPharmacySpeciality：PharmacySupervisor：Prof.ChunyanYanAssistantSupervisor：DayofDefence：May2018Degree-Conferring-Institution：GuangdongPharmaceuticalUniver

3、sityMay2018廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文雪菊糖聚物的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及藥理活性研究摘要本文以雪菊(CoreopsistinctoriaNutt)糖聚物為研究對象，對其進(jìn)行提取、分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定和藥理活性研究。首先采用熱水和堿液對雪菊中的糖聚物進(jìn)行提取，對水提液進(jìn)行分級醇沉，得到三個部位的粗糖聚物P50、P70、P90，堿提取液醇沉得到粗糖聚物PB。采用苯酚-硫酸法測得四個部位糖聚物的糖含量分別為：66.60%、54.41%、80.78%、50.68%。將溶解性較好且糖含量高的50和70部位粗糖聚物進(jìn)行脫蛋白、透析，然后用D

4、EAE-Cellulose52柱進(jìn)行分離，再用SephacrylS-100或SephadexG-75進(jìn)一步純化，得到五個糖聚物CT50-2、CT70-1、CT70-1A、CT70-1B和CT70-3。采用高效凝膠滲透色譜法和比旋光度進(jìn)行純度驗(yàn)證，結(jié)果表明它們都為均一糖20聚物，且比旋光度???分別是-12°、-45°、-9°、-37°、-20°。CT50-2、DCT70-1和CT70-3相對分子量經(jīng)高效凝膠滲透色譜法計算分別是10012、2100Da和1247Da，CT70-1A和CT70-1B經(jīng)MALDI-TOF-MS測得的分子量分別是1221Da和1318Da。經(jīng)

5、單糖組成、紅外光譜、甲基化/GC-MS和核磁共振圖譜分析等方法得到五個糖聚物的一級結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明，CT50-2含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖5種單糖，包括→α-D-Glcp-(1→、→6)-α-D-Glcp-(1→、α-L-Araf-(1→、I廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文→2)-α-L-Araf-(1→、→3)-α-L-Rhap-(1→、→6)-β-D-Galp(1→和→3,6)-β-D-Manp-(1→七種連接殘基；CT70-1由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和果糖等6種單糖組成，包括→1)-α-D-Glcp、→4)-Glcp-α-D-(1

6、→、→1)-α-L-Araf、→5)-α-L-Araf-(1→、→6)-β-D-Galp-(1→、→3)-α-L-Rhap-(1→、→3,6)-β-D-Manp-(1→、→3)-β-D-Manp-(1→、→,6)-β-D-Manp-(1→和→2,6)-β-D-Fruf-(1→十種連接殘基；而CT70-1A、CT70-1B和CT70-3均由葡萄糖、甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖組成，其中，CT70-1A含有α-D-Glcp-(1→、→6)α-D-Glc-(1→、→2)-α-L-Araf-(1→、→6)-β-D-Galp-(1→和→3,6)-β-D-Manp-(1→五種連接殘基

7、，CT70-1B含有α-D-Glcp-(1→、→2,3，6)-α-D-Glcp-(1→、→2)-α-L-Araf-(1→、α-L-Araf-(1→、→6)-β-D-Galp-(1→和→3,6)-β-D-Manp-(1→六種連接殘基，CT70-3含有→1)-α-D-Glcp、→4)-α-D-Glcp-(1→、→1)-α-L-Araf、→6)-β-D-Galp-(1→和→3,6)-β-D-Manp-(1→五種連接殘基。掃描電鏡結(jié)果表明CT70-1不規(guī)則的形狀，表面分布著細(xì)小不均勻的顆粒，CT70-3為不規(guī)則碎片，圓二色譜結(jié)果表明CT70-1和CT70-3