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《hpv16e7多肽體外誘生抗原特異性細(xì)胞毒性t細(xì)胞表型及功能的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、3422U鲞塑ChinJDermatol，Mav2010．Vo1．43．N0．5·論著·HPV16E7多肽體外誘生抗原特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞表型及功能的研究錢起豐李芳谷李青【摘要】目的探討高致癌性HPV16E7病毒抗原肽體外誘生HLfA—A2陽性正常人外周血抗原特異性CD8細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)的表型及功能狀態(tài)。方法以HPV16E7合成多肽、重組人IL一7、IL一2體外刺激26例HlJA—A2陽性正常人外周血T細(xì)胞，用HLA—A*0201限制性表位肽／YMLDLQPETF五聚體技術(shù)，結(jié)合流式細(xì)胞儀對抗原特異性CTL進行頻率、表型[CD45RACD27一效應(yīng)性CTL、CD45RA—CD27效
2、應(yīng)性記憶CTL(T~)、CD45RA—CD27中樞性記憶CTL(Tc)、CD45CD27初始性CTL]及功能(穿孑L素、顆粒酶B、FasL)分析，并以無關(guān)肽HBV一。作為陰性對照。結(jié)果病毒多肽體外刺激T細(xì)胞7d后，抗原特異性CD8CTL數(shù)為(0．73±0．33)％，比未刺激組的(0．02±0．03)％明顯增多(P<0．01)。進一步分析，在抗原特異性CTL中，效應(yīng)性CTL、TrI1c及初始性CTL百分比分別為(26．07±13．46)％、(7．97±7．11)％、(33．25-4-19．68)％及(32．73±13．89)％，均比未刺激組的(0．02±0．03)％、(0．02±0．03)％
3、、(0．02±0．03)％及(0．02±0．05)％明顯增多，P值均<0．01。HPV16E7表位特異性CTL分泌穿孑L素、顆粒酶B、Fas-I的水平分別為(47．01±18．69)％、(80．53±13．32)％及(26．48±7．81)％，均比未刺激組的(0．38±0．55)％、(0．34±0．22)％及(0．16±0．16)％明顯增多，P值均<0．01。結(jié)論HPV16E7。多肽誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞克隆擴增，產(chǎn)生抗原特異性CD8CTL，分泌毒性細(xì)胞因子，通過不同機制特異性殺傷病毒感染的靶細(xì)胞，在抗病毒免疫應(yīng)答中發(fā)揮作用。【關(guān)鍵詞】人乳頭瘤病毒16；乳頭瘤病毒E7蛋白質(zhì)類；T淋巴細(xì)胞，細(xì)胞
4、毒性；表型Studyonphenotypeandfunctionofantigen·specificCD8cytotoxicTcellsinducedbyHPV16E7peptideinvitroQIANQirig,LIFang一，L1Qing．ShenzhenInstituteofDermatology,CenterforSControlandResearch．Shenzhen518o2o．Guangdong,China【Abstract】ObjectiveToinvestigatethephenotypeandfunctionofantigen—specificCD8cytotoxic
5、Tcells(CTL)fromHLA—A2healthyhumandonorsinducedbyhigh—carcinogenicHPV16E7peptidenvitro．MethodsPeripheralbloodTcellsfrom26HLA—A2heahhyhumandonorswereincubatedwithHPV16E7I1peptide(HLA—A*0201／YMLDLQPETT)，recombinanthumaninterleukin7(IL一7)andIL一2for7daystoyieldantigen—specificCD8CTL．Then．four—colorflow
6、cytometricanalysiswasperformedtodetecttheper—centageofantigen—specificCD8CTLexpressingdifferentsurfacemarkersincludingCD45andCD27．Theexpressionofthreeintracellularcytokinesincludingperfotin．granzyme—BandFasLintheantigen—specificCD8CTLwasalsomeasuredbyintracellularflowcytometry．Awrongpeptide，HBV一18
7、(FLPSDFFPSV)，wasusedasanisotypecontro1．ResultsAsignificantincreasewasobservedinthepercentageofantigen—spe—cificCD8CTLinperipheralTcellsstimulatedwithHPV16E7一peptidecomparedwiththenon—stimulatedTcells(0．73％±0．33％v
