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《新型芯片分析系統(tǒng)的研制與應(yīng)用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、復(fù)旦大學(xué)博士后研究工作報(bào)告新型芯片分析系統(tǒng)的研制與應(yīng)用彭友元工作完成日期2004幽∑L旦=墊旦丘生』旦報(bào)告提交日期一—型皿￡生亙旦—一復(fù)旦大學(xué)2006年6胃內(nèi)容摘要本論文包括兩部分：第一部分為多通道電化學(xué)芯片免疫傳感器應(yīng)用于肝纖化標(biāo)志物的檢測(cè)；第二部分為分子印跡模擬酶修飾的多通道微流控芯片應(yīng)用于食品中殘留有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測(cè)。第一部分的研究?jī)?nèi)容：利用微電子機(jī)械加工(MEMS)技術(shù)，設(shè)計(jì)制作了八通道金圓盤(pán)陣列電極芯片，并采用循環(huán)伏安法(CV)共聚鄰苯二胺部分絕緣膜(O．PD)的方法將三種肝纖維化標(biāo)志物(透明質(zhì)酸，HA；
2、層粘連蛋白抗原，LN；IV型膠原，Ⅳ一C)所對(duì)應(yīng)的抗體(HABP、a．LN、d．IVC)分別包埋在同一塊芯片的不同電極上。當(dāng)電極上包埋的抗體與含有抗原的溶液孵化后，由于抗原抗體之間的結(jié)合使得電極表面的電化學(xué)活性位點(diǎn)進(jìn)一步減少，從而使得電極表面的絕緣程度增大，引起電化學(xué)探針甲醇二茂鐵的穿透能力變差。通過(guò)該探針的CV圖蜂電流的降低，以達(dá)到對(duì)三種抗原進(jìn)行定量分析的目的。該方法對(duì)三種肝纖維化標(biāo)志物的線性范圍分別為：LN，10一107ng／ml；HA，1—89ng／ml；IV-C，10—72ng／ml；LN與IV—C的檢測(cè)
3、限均為2ng／ml，IV-C為O．5ng／ml。已對(duì)500例樣品進(jìn)行了測(cè)定，與標(biāo)準(zhǔn)值(或RIA值)比較，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)不超過(guò)20％，陰陽(yáng)性結(jié)果符合率達(dá)95％以上。本方法操作簡(jiǎn)便，無(wú)需對(duì)抗原進(jìn)行標(biāo)記，單次測(cè)定可在幾十秒內(nèi)完成，所耗試劑量少(幾十IlL)，可以對(duì)樣品進(jìn)行高通量檢測(cè)，方法適應(yīng)于臨床快速分析。第二部分的研究?jī)?nèi)容：基于分子印跡原理，采用CoCl2和4(5)一乙烯基咪唑(4(5)-Vinylimidazole)、甲基丙烯酸(acrylicacid)為單體，二乙烯基苯為交聯(lián)劑，以有機(jī)磷農(nóng)藥paraoxo
4、n的類似物為模板分子，在多通道微流控芯片內(nèi)部原位合成含有C02+一咪唑一羧酸基活性中心的印跡模擬酶，由于paraoxon在模擬酶的催化作用下可以水解生成對(duì)硝基苯酚，可以采用電化學(xué)法進(jìn)行檢測(cè)。從而對(duì)食品中的殘留有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行高效、快速、靈敏的檢測(cè)，還可對(duì)有機(jī)磷酸酯農(nóng)藥進(jìn)行降解，具有較高的理論研究意義與應(yīng)用價(jià)值。關(guān)鍵詞：陣列電極芯片：免疫傳感器：肝纖化標(biāo)志物；分子印跡；模擬磷酸三酯水解酶：微流控芯片nAbstractTherearetwopartsinthepresentdissertation．PartI，dete
5、ctionofbiomarkersforliverfibrosisusinghigh·throughputelectrochemicalmicro·immunosensorarray．PartII，mierofluidicbiometicchip-basedcapillaryelectrophoresissystemforthedetectionoftracepesticidesinfoods．Themajorcontentsaredescribedasfollows：PartI：Ahigh·throughput
6、electrochemicalmicro-immunosensorforthedetectionofbiomarkersforliverfibrosiswasdeveloped．Theantibodies，hyaluronieacidbindingprotein(HABP)，laminantibody(a—LN)andIV—Cantibody(a—IVC)，areimmobilizedondifferentelectrodesofthemicroelectrodearraybycopolymerizinginto
7、thepartlyinsulatedpoly(o-phenylenediamine)bymeansofcyclicvoltammetry(CV)．Electrochemicaldetectionofthecorrespondingantigenwasbasedontheextentofelectrodeinsulationtowardaredoxprobe(ferrocenemethan01)solubilizedintheelectrolyteasaresultoftheformationoftheantige
8、n—antibodycomplexattheelectrodesurface．Themicro-immunosensorexhibitsenoughsensitivitytodetectthethreebiomarkersataconcentrationleveldownto2ng／mL．Themicro-immunosensorhasbeenappliedto500sy
