糖尿病小鼠腎組織periostin的表達及其調(diào)控機制的研究

《糖尿病小鼠腎組織periostin的表達及其調(diào)控機制的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、目錄IIIIIIJJIIIIIINIllIIlIJIIIIIIIIlllllllIIIIIllIY2337739中文摘要???????????????????????????1英文摘要???????????????????????????3研究論文糖尿病小鼠腎組織Periostin的表達及其調(diào)控機制?????5前言??????????????????????????????????5一日IJ舌????????????????????????????????????．．材料與方法?????????????．???

2、????????．6結(jié)果????????????????????????????????????17附圖???????????????????????????．19附表?????????????????????．．???????．．25討論???????????????????????????????????．27結(jié)論????????一???????????????????????????．29參考文獻??．???????????????????????29綜述Periostin的研究進展???．．??????

3、?????????32致謝??????????????????????????????????????41個人簡歷??????????????????：????????．42中文摘要糖尿病小鼠腎組織Periostin的表達及其調(diào)控機制的研究摘要目的：糖尿病腎病(DiabeticNephropathy,DN)是糖尿病最常見最嚴重的微血管并發(fā)癥之一。糖尿病患者并發(fā)DN的死亡率是未并發(fā)者的30倍。由于早期癥狀不明顯，未予重視或發(fā)現(xiàn)，相當(dāng)多的DN患者在有明顯蛋白尿或合并明顯浮腫時才被覺察，而臨床對于DN缺乏有效方法控制

4、其發(fā)展。因此，提高對DN早期病變的認識并盡早采取有效措施，防止腎臟嚴重并發(fā)癥至關(guān)重要。Periostin原名成骨細胞特異性因子2(osteoblast-specificfactor2，OSF．2)，為成骨細胞及其前體細胞分泌產(chǎn)生的一種細胞外基質(zhì)蛋白，特異表達于骨膜和牙周膜組織中。近年研究發(fā)現(xiàn)，periostin在腫瘤侵襲、骨折愈合、心肌重構(gòu)、瘢痕修復(fù)等方面有重要作用。DN的病理特征是腎小球細胞外基質(zhì)積聚導(dǎo)致的腎小球硬化，由此推i貝lJperiostin作為一種重要的細胞外基質(zhì)蛋白可能參與DN的發(fā)生、發(fā)展。本研究

5、擬從組織及細胞兩方面，應(yīng)用生化指標(biāo)檢測、HE及Masson特殊染色法、免疫組織化學(xué)染色法，對LLperiostin在正常腎組織及糖尿病腎組織中的表達，揭示periostin參與DN發(fā)生、發(fā)展的作用機制，并通過蛋白質(zhì)免疫印跡(WesternBlot)法從蛋白質(zhì)水平探討periostin在糖尿病小鼠腎組織中的表達及轉(zhuǎn)化生長因子．p1(transforminggrowthfactor-13，TGF．B1)與periostin表達的關(guān)系，為臨床早期發(fā)現(xiàn)、早期治療DN提供理論依據(jù)。方法：左側(cè)腎切除+腹腔STZ注射法建立C

6、D．1小鼠糖尿病模型，檢測血肌酐(serumcreatinine，Scr)及24小時尿蛋白定量，取正常小鼠及DN小鼠腎組織，制作石蠟切片，分別用蘇木素．伊紅(hematoxylin．eosin，HE)及Masson特殊染色法，光鏡觀察腎組織的病理變化；另外采用免疫組織化學(xué)染色法檢測腎組織periostin的表達，結(jié)果通過圖像分析系統(tǒng)(Image．ProPlus，PP)進行半定量分析。體外培養(yǎng)小鼠腎小球系膜細胞(NC組)，并給予高糖(HG組)及TGF．p1(T組)刺激，對高糖刺激小鼠系膜細胞進行TGF．p1中和抗

7、體干預(yù)(AT組)，分別收集干預(yù)4小時和12小時各組的系膜細胞，并提取細胞蛋白，采用WesternBlot檢測各組periostin的表達，結(jié)果通過ImageJ圖像分析系統(tǒng)分析各組條帶的積分光密度(Integratedoptiondensity，10D)值，并以13-actin的10D值作為中文摘要標(biāo)準(zhǔn)對照，各組蛋白的IOD值與其相比，對比值進行統(tǒng)計學(xué)分析。得出數(shù)據(jù)采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x士S)表示，Levene法檢驗方差齊性，兩組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，分析應(yīng)用SPSS13．0統(tǒng)計

8、分析軟件處理，以P<0．05為具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果：糖尿病組小鼠的24小時尿蛋白、Scr較正常對照組明顯升高(P