小鼠qpct基因印記分析及其表達(dá)調(diào)控機(jī)制的研究

小鼠qpct基因印記分析及其表達(dá)調(diào)控機(jī)制的研究

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1、國內(nèi)圖書分類號(hào):Q951+.4學(xué)校代碼:10213國際圖書分類號(hào):577密級(jí):公開理學(xué)碩士學(xué)位論文小鼠Qpct基因的印記分析及其表達(dá)調(diào)控機(jī)制的研究碩士研究生:郭婧導(dǎo)師:吳瓊教授申請(qǐng)學(xué)位:理學(xué)碩士學(xué)科:生物學(xué)所在單位:生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院答辯日期:2012年6月授予學(xué)位單位:哈爾濱工業(yè)大學(xué)ClassifiedIndex:Q951+.4U.D.C:577DissertationfortheMasterDegreeinScienceIMPRINTINGANALYSISOFQPCTANDEXPRESSIONPROFILEANDSTUDYOFTHEREG

2、ULATIONMECHANISMINMOUSECandidate:GuoJingSupervisor:Prof.WuQiongAcademicDegreeAppliedfor:MasterofScienceSpeciality:BiologyAffiliation:SchoolofLifeScienceandTechnologyDateofDefence:June,2012Degree-Conferring-Institution:HarbinInstituteofTechnology哈爾濱工業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文摘要Qpct是一個(gè)潛在的腫瘤

3、抑制基因,編碼谷胺酰肽環(huán)化轉(zhuǎn)移酶前體。谷胺?;h(huán)化酶(QC)是一個(gè)依靠Zn++的?;D(zhuǎn)移酶,帶有α-螺旋/β折疊片結(jié)構(gòu),能催化分子內(nèi)的谷胺?;腘末端環(huán)化形成焦谷氨酸。這種焦谷氨酸的快速聚與沒有被修飾的AD淀粉樣蛋白斑相比較有較長的生物半衰期以及較高的毒害神經(jīng)的作用。本課題先通過NCBI信息學(xué)檢索,報(bào)告并敘述此基因的基本信息。Qpct基因位于小鼠17號(hào)染色體上,基因組定位chr:79451246-79489583,共有7個(gè)外顯子。為了闡明Qpct基因在小鼠胚胎發(fā)育階段的差異,本課題首先利用基于SNP的PCR產(chǎn)物直接測(cè)序法分析了Qpct基因在胚

4、內(nèi)和胚外組織的印記狀況。同時(shí)利用原位雜交和實(shí)時(shí)定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)該基因在胚期的時(shí)空表達(dá)模式。印記分析結(jié)果表明Qpct在E15.5小鼠的胎盤中特異性母本表達(dá)父本印記。全胚原位雜交表達(dá)分析表明Qpct基因在E9.5、E10.5和E11.5的腦中表達(dá)較強(qiáng),在E10.5小鼠的聽泡處檢測(cè)到較強(qiáng)信號(hào),而在E11.5小鼠中除聽泡中表達(dá),在心臟中也有較強(qiáng)表達(dá)。E15.5小鼠中其表達(dá)的部位增多,腦、舌、肝、肺、腸及背根神經(jīng)節(jié)都有一定水平的表達(dá);其中在腦中表達(dá)最強(qiáng),垂體中檢測(cè)到高表達(dá),肝和背根神經(jīng)節(jié)次之。在胎盤中,該基因在E9.5-E14.5前表達(dá)逐漸上升

5、而后又逐漸下降,在E15.5天中表達(dá)最高。12.5天胎盤原位雜交數(shù)據(jù)表明其在成膠質(zhì)細(xì)胞層和迷路區(qū)高表達(dá),而在15.5胎盤的蛻膜層高表達(dá)。然而對(duì)Qpct印記機(jī)制進(jìn)行初步研究,其印記機(jī)制不受CpG島調(diào)控,利用染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)技術(shù)證實(shí)其印記不受H3K9me3的調(diào)控。關(guān)鍵詞:Qpct;印記分析;原位雜交;表觀遺傳調(diào)控;實(shí)時(shí)定量PCR-I-哈爾濱工業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractQpctisapotentialtumorsuppressorgene,itcancodetheprecursorofglutamicacylcyclizat

6、ionenzyme(QC).QCisaZn++dependentacyltransferase,ithasaalphahelix/βfoldedpieceofstructure.QpctwhichcodeglutamicacylcyclasecancatalytictheN-teminalofglutamicacytobepyroglutamicacid(pE).OncepEisgatheredquickly,theroleofthepoisontothenervoussystemhasbeenactived.Recentresearchde

7、monstratedthatamyloidisthereasonofADdisease(Alzheimerdisease).ThroughthereportofNCBI,Qpctislocatedinthe17chromosomeofthemouse.Ithassevenexons,andthegenomiclocationischr:79451246-79489583.InordertoclarifythedifferenceexpressionofQpctduringthemouseembryonicdevelopmentstage,th

8、eimprintingstateisconfirmedintheembryoandextraembryonictissueswithSNP-basedPCRprod

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