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延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼：10184分類號(hào)：分類號(hào)：醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文CgA和Survivin在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義ExpressionandclinicalsignificanceofCgAandSurviviningastriccarcinomatissue張恩含外科學(xué)延邊大學(xué)萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文CgA和SURVIVIN在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義2014萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文分類號(hào)密級(jí)UDC學(xué)號(hào)2011010684延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文CgA和Survivin在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義研究生姓名張恩含培養(yǎng)單位延邊大學(xué)臨床學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職稱李林虎教授學(xué)科專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)研究方向外科學(xué)-胃腸腫瘤論文提交日期2013年5月23日萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文本論文已達(dá)到醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位論文要求答辯委員會(huì)主席金仁順（?。┐疝q委員會(huì)委員金恩鴻（?。┐疝q委員會(huì)委員李革（印）延邊大學(xué)2014年05月23日萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文系本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立完成的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)記和致謝的部分外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含本人為獲得任何教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或?qū)W歷而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同事對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。本人如違反上述聲明，愿意承擔(dān)由此引發(fā)的一切責(zé)任和后果。研究生簽名：張恩含日期：2014年06月04日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所完成的學(xué)位論文，學(xué)校有權(quán)保存其電子和紙制文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以向有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交并授權(quán)其保存、借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。對(duì)于保密論文，按保密的有關(guān)規(guī)定和程序處理。本學(xué)位論文屬于：1.保密?，在年解密后適用于本聲明；2.不保密√。研究生簽名：張恩含導(dǎo)師簽名：李林虎日期：2014年06月04日萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要目的：探討CgA和Survivin在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法：收集本院普一科手術(shù)切除的胃癌病理標(biāo)本120例，采用免疫組織化學(xué)染色法，觀察CgA和Survivin在胃癌組織中的表達(dá)，分析CgA和Survivin表達(dá)與胃癌的TNM分期和病理分級(jí)關(guān)系。結(jié)果：1.CgA在胃癌和癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)率各為46.67%和5.83%，Survivin在胃癌和癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)率各為52.50%和9.17%，兩組比較均有顯著性差異(P<0.01)。2.CgA和Survivin表達(dá)均與胃癌的TNM分期和病理分級(jí)相關(guān)(均P＜0.01）。3.CgA陽(yáng)性表達(dá)的56例中Survivin陽(yáng)性表達(dá)率為85.7%；Spearman分析二者表達(dá)率呈明顯正相關(guān)(r=0.42，P＜0.01）。結(jié)論：CgA和Survivin陽(yáng)性表達(dá)與胃癌的TNM分期和病理分級(jí)有關(guān)；CgA和Survivin在胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮協(xié)同作用；Survivin有望成為胃癌靶向治療的新靶點(diǎn)。關(guān)鍵詞:胃癌,免疫組化,CgA,SurvivinI萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractObjective:ToexploretheexpressionandclinicalsignificanceofCgAandSurviviningastriccanrcinoma.Methods:TheexpressionofCgAandSurvivinwereexaminedin120casesofgastriccarcinomaandtheircorrespondingnormaltissuesbySPimmunohistochemicalstaining.TherelationshipsbetweentheCgAorSurvivinexpressionlevelsanditsclinicopathologicalcharacteristicswerealsoinvestigated.Results:1.TheCgA-positiveandSurvivin-positiveexpressioningastriccarcinomawere46.67%(56/120)and52.50%(63/120),whichhadstatisticalsignificantdifferencesfrom5.83%(7/120)and9.17%(11/120)innormalgastrictissues.2.ExpressionofCgAorSurvivinwerecloselycorrelatedtoTNMstagesandpathologicalgrading(P＜0.01).3.Survivinpositiveexpressionratewas85.7%In56caseswithCgApositiveexpressionandthetwoindexexpressionratewassignificantlycorrelatedusingSpearmananalysis(r=0.42,P<0.01).Conclusion:CgAandSurvivinproteinhadahighcorrelationwithTNMstagesandpathologicalgrading.CgAandSurvivinplayasynergisticroleintheoccurrenceanddevelopmentofgastriccancer.ResultsindicatedthatSurvivinmayprovideapromisingtargetgenetherapywayofgastriccancer.Keywords:Cancerofthestomach,Immunohistochemical,CgA,SurvivinII萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄摘要...................................................................................................................IAbstract................................................................................................................II前言...................................................................................................................4第一章：材料和方法...........................................................................................61.1研究資料..................................................................................................61.2儀器和設(shè)備..............................................................................................61.3試劑........................................................................................................61.4方法..........................................................................................................61.5結(jié)果判定..................................................................................................81.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理..............................................................................................9第二章：結(jié)果...................................................................................................102.1臨床資料.......................................................................................102.2CgA與Survivin在胃癌與癌旁組織中的表達(dá)............................102.3CgA與Survivin表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系...................112.4CgA與Survivin的相關(guān)性...........................................................152.5附圖...............................................................................................17第三章：討論....................................................................................................20第四章：結(jié)論....................................................................................................24參考文獻(xiàn)..............................................................................................................25綜述:...................................................................................................................28參考文獻(xiàn)..............................................................................................................38致謝......................................................................................................................433萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文前言在全球范圍內(nèi)惡性腫瘤發(fā)病率呈快速增長(zhǎng)的趨勢(shì)，據(jù)預(yù)測(cè)2020年全球惡性腫瘤的新發(fā)病人數(shù)將達(dá)到2000多萬(wàn)人，死亡病例將達(dá)到1200多萬(wàn)人，2030年新增加2600萬(wàn)人的癌癥病例，死亡人數(shù)將達(dá)到1700多萬(wàn)人，癌癥已成為全球最[1][2]大的公共健康問(wèn)題,其中很大一部分將會(huì)發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家,同樣在中國(guó)惡性腫瘤發(fā)病率和死亡率均呈快速增加的趨勢(shì)。據(jù)近年的統(tǒng)計(jì)資料表明，惡性腫瘤的死亡率約為143/10萬(wàn)，男性中惡性腫瘤死亡率比女性高，分別為169/10萬(wàn)和106/10萬(wàn),生活水平較差的農(nóng)村地區(qū)惡性腫瘤占死亡原因的第三位，死亡率為[3，4]107/10萬(wàn)，男性為134/10萬(wàn)，女性為79/10萬(wàn)。在惡性腫中胃癌是常見(jiàn)的消化道惡性疾病之一,全球每年有近100萬(wàn)新增加胃癌病例，其中約40萬(wàn)新增病例(近40％)發(fā)生在我國(guó)，按照死亡率順序排列，中[5]國(guó)危害最嚴(yán)重的惡性腫瘤中胃癌居第一位。胃癌的流行病學(xué)調(diào)查報(bào)道，中國(guó)胃癌的患病率和胃癌的死亡率是世界平均水平的2倍多，每2-3分鐘就有1人因胃[6，7]癌而死亡。近年來(lái)胃癌診斷和治療水平有了很大的提高，尤其是胃癌的早期診斷率和治愈率有了明顯提高，早期胃癌的主要治療手段仍是以手術(shù)切除治療為[8]主，但對(duì)于一些中晚期胃癌，即使能夠手術(shù)治療，往往療效欠佳，術(shù)后5年的[9]生存率僅為20％~30%，術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致死亡的主要原因,深入研究胃癌的發(fā)病機(jī)制，對(duì)提高胃癌的治愈率和生存率、降低死亡率具有十分重要的意義。大量研究表明，細(xì)胞的異常增殖以及有關(guān)細(xì)胞凋亡抑制的腫瘤基因的異常表達(dá)與胃癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程有密切的關(guān)系，而且一些腫瘤基因在胃癌組織中的異常表[10]達(dá)與胃癌的轉(zhuǎn)移以及術(shù)后的復(fù)發(fā)有重要的因果關(guān)系。嗜鉻粒蛋白A（CgA）及凋亡抑制蛋白（Survivin）是目前腫瘤學(xué)研究中的兩個(gè)熱點(diǎn)，大量研究證實(shí)CgA、Survivin在多種惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中發(fā)[11-15]揮著重要作用。CgA是一種由439個(gè)氨基酸組成的酸性親水性蛋白質(zhì)，是神經(jīng)肽類家族中的一員,可用于神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷和有助于治療。神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞不僅廣泛地存在于機(jī)體的內(nèi)分泌器官組織中，也存在于腫瘤和非內(nèi)分泌器官中，是一種能夠分泌肽類物質(zhì)或特殊胺的細(xì)胞。研究表明CgA在大腸癌、肝癌、前列腺癌、乳腺4萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文[16]癌等惡性腫瘤中也均呈現(xiàn)高表達(dá)，但目前有關(guān)CgA在胃癌發(fā)病機(jī)制中的研究報(bào)道較少。Survivin是目前為止發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的細(xì)胞凋亡抑制因子，研究發(fā)現(xiàn)該因子與腫瘤的發(fā)生以及腫瘤細(xì)胞中淋巴轉(zhuǎn)移、預(yù)后有著密切的聯(lián)系。Survivin經(jīng)過(guò)抑制細(xì)胞凋亡和促進(jìn)細(xì)胞增殖使腫瘤細(xì)胞惡性增殖并易于發(fā)生轉(zhuǎn)移，但其具體分[17]子機(jī)制目前還不明確。惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程是比較精細(xì)且又復(fù)雜的，整個(gè)過(guò)程中表現(xiàn)為多步驟、多因素、多基因的協(xié)同作用，其中有著很多的抑癌基因、癌基因的突變以及各種因子的參與和作用及其產(chǎn)生的各種酶之間的各種化學(xué)變化。CgA和Survivin在腫瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展以及腫瘤組織細(xì)胞的增殖、遷移浸潤(rùn)、及正常細(xì)胞的凋亡等這些過(guò)程中都發(fā)揮重要的作用，可作為高特異性，高敏感度[18]的一種腫瘤標(biāo)記物用于腫瘤的診斷和評(píng)估預(yù)后。迄今為止許多的實(shí)驗(yàn)研究只單獨(dú)的對(duì)CgA和Survivin或與其它因子一起在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，但此二者的聯(lián)合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)以及二者在胃癌發(fā)病機(jī)制中的相關(guān)性研究報(bào)道尚少。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化染色方法，觀察Survivin與CgA在胃癌組織中的表達(dá)，探討兩者在胃癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用，為胃癌的診斷、治療及預(yù)后評(píng)估提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。5萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文第一章材料和方法1.1研究資料選取2008年5月至2013年5月在本院外科手術(shù)切除的胃癌標(biāo)本共120例，均經(jīng)病理證實(shí)，術(shù)前未經(jīng)過(guò)任何抗癌治療。全部標(biāo)本用10%的福爾馬林固定、常規(guī)石蠟包埋和切片。1.2儀器和設(shè)備PHY-III病理組織漂烘儀（常州市中威電子儀器有限公司）；萊卡全自動(dòng)切片機(jī)（德國(guó)Leica公司，RM2255）；電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海躍進(jìn)醫(yī)用光學(xué)器械廠，DNP-9162）；芬蘭Biohit百得單道微量可調(diào)加樣器；電熱恒溫隔水式培養(yǎng)箱（恒豐醫(yī)療器械公司）；數(shù)碼顯微成像裝置（日本Olympus公司，DP21）；光學(xué)顯微鏡（日本Olympus公司，CX41）。微量振蕩器（錫山市金城儀器廠，WIS-IIIA）；超純水機(jī)(杭州萬(wàn)潔水處理設(shè)備有限公司W(wǎng)J-RO-20)；高壓鍋；電冰箱；1.3試劑兔抗人嗜鉻素A(ChrA)多克隆抗體(工作液6ml)（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）兔抗人Survivin單克隆抗體(工作液6ml)（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；封閉用正常山羊血清工作液6ml（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；生物素化通用二抗工作液6ml（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液6ml（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；3%H2O2去離子水6ml（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；DAB1ml濃縮液（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；6萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文20mlDAB底物液（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；需要配置的溶液:枸櫞酸鈉抗原修復(fù)液(PH值:6.0)，PBS緩沖液，稀釋后使用(PH值:7.4)；延邊大學(xué)附屬醫(yī)院病理科實(shí)驗(yàn)室提供的實(shí)驗(yàn)試劑有：二甲苯試劑、無(wú)水乙醇試劑、蘇木素試劑、85%與95%濃度的酒精。1.4方法1.4.1免疫組化學(xué)法染色方法（中杉SP6000）采用免疫組織化學(xué)染色法觀察CgA與Survivin在胃癌及癌旁組織中的表達(dá),分析CgA和Survivin表達(dá)與胃癌的TNM分期和病理分級(jí)關(guān)系。(1)防脫處理載玻片:載玻片用調(diào)配好的防脫劑處理，在適度比例的稀釋液中放置30秒。取出后，用PHY-III病理組織漂烘儀烘干載玻片后，然后用蒸餾水或丙酮清洗，以此來(lái)去除掉殘存的防脫劑。然后在PHY-III病理組織漂烘儀再次上烘干即可。這一步應(yīng)注意載玻片上是否有氣泡殘留。(2)固定標(biāo)本:用10%中性福爾馬林固定液來(lái)固定標(biāo)本，然后用石蠟包埋，連續(xù)切片，每片厚度約為4μm，在已經(jīng)制備好的防脫載玻片上把完整的標(biāo)本選擇出來(lái)貼附于上面，用68℃的恒溫箱供烤半小時(shí)。(3)脫蠟病理切片:把制作好的病理切片放于立式架中置于68℃恒溫箱里過(guò)夜。第2日，在二甲苯試劑中浸泡10min→二甲苯中浸泡10min→無(wú)水乙醇試劑中浸泡10min2次→95%濃度的酒精浸泡10min→85%濃度的酒精浸泡10min→自來(lái)水沖洗3min→PBS清洗3次，每次3min。(4)高壓熱修復(fù):將高壓鍋內(nèi)盛有檸檬酸鹽緩沖液（PH值為6.0）放置于電爐上，加熱至95℃。將裝有組織切片的立式染色架放于檸檬酸緩沖液中，并完全浸沒(méi)，蓋上鍋蓋，待出氣口噴氣后，可達(dá)到工作的溫度和壓力，持續(xù)3分鐘后，移開(kāi)火源，待放完高壓鍋內(nèi)蒸汽后打開(kāi)鍋蓋，自然冷卻至室溫。然后取出切片標(biāo)本用準(zhǔn)備好的PBS試劑液沖洗3次，每次3min。(5)內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性的阻斷:等待標(biāo)本冷卻后（與室溫相當(dāng)），在每一張切片標(biāo)本上分別滴加1滴3%H2O2去離子水后，放置于室溫中等待孵育15min，7萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文此步是為了滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性，用PBS試劑液沖洗3次，每次3min。(6)一抗體的滴加：小心除去每張載片組織周圍的水分后，滴加試劑A（山羊血清工作液）后放置室溫10分鐘后，滴加一抗體兔抗人嗜鉻素A(ChrA)多克隆抗體工作液及兔抗人Survivin單克隆抗體工作液，令其均勻分布后置再放置于準(zhǔn)備好的濕盒中，放入4°C冰箱過(guò)夜。以PBS代替一抗陰性對(duì)照。(7)第二抗體的滴加:第2天，把裝有病理切片的濕盒，放置于室溫下恢復(fù)至常溫，PBS緩沖液沖洗3次，每次3min。把每張載玻片周圍的液體擦干后擦干后，分別滴加生物素化通用二抗工作液1滴，放室溫10~15min后，用PBS緩沖液沖洗3次，每次3min。(8)在每片載玻上組織上滴加1滴辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液后，于室溫（或37℃）孵育10~15min，然后再用PBS沖洗3次，每次時(shí)間為3min。(9)DAB工作液配置：在1毫升試劑DAB底物緩沖液中，加入1滴（約50微升）DAB濃縮液,混合均勻。（該溶液只能現(xiàn)用現(xiàn)配，配好后避光放置保存，6小時(shí)內(nèi)使用，剩余的液體應(yīng)棄去）(10)顯色劑顯色：在室溫閉光的環(huán)境中，小心的除去每張載片組織周圍的水分后，把新鮮配制好的DAB顯色試劑液分別滴加1滴于每張載玻片的病理組織上，待其分布均勻后，在顯微鏡下觀察，以控制其顯色的時(shí)間，待顯色后用蒸餾水沖洗使其停止繼續(xù)反應(yīng)。(Survivin顯色時(shí)間約為3分鐘，CgA顯色時(shí)間約為2分鐘)。(11)復(fù)染：將玻片置于蘇木素試劑中復(fù)染約1分鐘左右后，再用蒸餾水沖洗。（12）脫水：常規(guī)酒精脫水，二甲苯透明。（13）封片：選擇適當(dāng)?shù)姆馄渭又行詷?shù)膠封片。（14）顯微鏡下觀片。（15）與已知陽(yáng)性切片做對(duì)照。注：因一抗、二抗為工作液，無(wú)需稀釋。1.5結(jié)果判定CgA在細(xì)胞漿呈棕黃色為陽(yáng)性表達(dá)，Survivin在細(xì)胞漿與細(xì)胞核呈棕黃色為陽(yáng)性表達(dá)，每例切片選擇染色均勻的5個(gè)視野，在高倍鏡下記數(shù)1000個(gè)細(xì)胞，記錄陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞的百分率。8萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用統(tǒng)計(jì)學(xué)SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)(Fisher-Exact)，P<0.05或P<0.01差異有意義。9萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文第二章：結(jié)果2.1臨床資料120例中男性病例為98例，女性病例為22例；年齡在36歲~78歲之間，平均為57歲。均為腺癌，其中高分化腺癌21例，中分化腺癌68例，低分化腺癌31例；侵及漿膜者72例，未侵及漿膜者48例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者44例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者76例，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者11例，無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者109例；Ⅰ期18例，Ⅱ期43例，Ⅲ期45例，Ⅳ期14例。2.2CgA與Survivin在胃癌與癌旁組織中的表達(dá)CgA蛋白在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為46.67%，在癌旁組織中的表達(dá)率為5.83%；Survivin在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為52.50%，在癌旁組織中的表達(dá)率為9.17%，均有顯著性差異(P<0.01)。表1.CgA與Survivin在胃癌與癌旁組織中的表達(dá)CGA表達(dá)（%）Survivin表達(dá)（%）組別n+-P+-P癌組織12056（46.67）64（53.33）<0.0163（52.50）57（47.50）<0.01癌旁組織1207（5.83）113（94.62）11（9.17）109（90.83）2?檢驗(yàn)*P＜0.0110萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文CgA與Survivin在胃癌與癌旁組織中的表達(dá)120癌旁組織100癌旁組織表達(dá)80率%60癌組織40癌組織表達(dá)率20%0圖一：CgA與Survivin在胃癌與癌旁組織的表達(dá)2.3CgA與Survivin表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系CgA蛋白的表達(dá)與性別、年齡、部位無(wú)關(guān)（P＞0.05），與腫瘤浸潤(rùn)深度、有否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、分期分化有關(guān)（P＜0.01)；Survivin蛋白的表達(dá)與性別、年齡、部位無(wú)關(guān)（P＞0.05），與腫瘤浸潤(rùn)深度、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、分期分化有關(guān)（P＜0.01)。表2.CgA與Survivin表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系臨床病理參數(shù)NCgA表達(dá)（%）Survivin表達(dá)（%）+-P+-P性別男9846(46.94)52＞0.0550(51.02)48＞0.05女2210(54.55)1213(59.09)9年齡（歲）≥606731(46.27)36＞0.0534(50.75)33＞0.05＜605325(47.17)2829(54.72)24腫瘤部位胃底208(40.00)12＞0.059(45.00)11＞0.05胃體3115(48.39)1617(54.84)14胃竇6933(47.83)3637(53.62)32浸潤(rùn)深度未侵及漿膜4810(20.83)38＜0.058(16.67)40＜0.0511萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文侵及漿膜7246(63.89)2655(76.39)17淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)7621(27.63)55＜0.0524(31.58)52＜0.05有4435(79.55)939(88.64)5遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)10946(42.20)63＜0.0152(47.71)57＜0.01有1110(90.91)111(100.00)0TNM分期Ⅰ+Ⅱ6126(46.62)35＜0.0528(45.90)33＜0.05Ⅲ+Ⅳ5930(50.85)2935(59.32)24分化程度高+中8939(43.82)50＜0.0543(48.31)46＜0.05低分化3117(54.84)1420(64.52)112?檢驗(yàn)*P＜0.01，*P＜0.05圖二：CgA與Survivin在不同性別中的表達(dá)12萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文圖三：CgA在不同腫瘤部位的表達(dá)圖四：Survivin在不同腫瘤部位的表達(dá)13萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文圖五：CgA與Survivin表達(dá)與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系圖六：CgA與Survivin表達(dá)與胃癌淋巴結(jié)有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系14萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文圖七：CgA與Survivin表達(dá)與胃癌分化程度之間的關(guān)系2.4CgA與Survivin的相關(guān)性56例CgA表達(dá)陽(yáng)性標(biāo)本中Survivin表達(dá)陽(yáng)性率85.7%（48/56），陰性14.3%（8/56）；64例CgA表達(dá)陰性標(biāo)本中Survivin表達(dá)陽(yáng)率23.4%（15/64），陰性76.6%（49/64），用Spearma相關(guān)分析r=0.42，P＜0.01，CgA與Survivin的表達(dá)水平之間呈正相關(guān)。表3.CgA與Survivin表達(dá)的相關(guān)性CgANSurvivin＋(%)Survivin－(%)CgA（＋）5685.714.3CgA（－）6423.476.6Total12052.547.5Spearman相關(guān)分析r=0.42，*P＜0.0115萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文CgA與Survivin的相關(guān)性100.0080.00Survivin+%60.0040.0020.000.00Survivin-%CgA+CgA-圖八：CgA與Survivin的相關(guān)性16萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文2.5附圖：Survivin在低分化癌旁組織中的表達(dá)（－）（x400）Survivin在粘液腺癌組織中的表達(dá)(＋（)x100）Survivin在粘液腺癌組織中的表達(dá)(＋)（x400）Survivin在低分化腺癌組織中的表達(dá)(＋)（x100）Survivin在低分化粘液腺癌組織中的表達(dá)(＋（)x400）CGA在低分化癌旁組織中的表達(dá)(－)（x400）17萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文CGA在低分化腺癌及癌旁組織中的表達(dá)（x100）CGA在低分化腺癌組織中的表達(dá)(＋)（x100）CGA在低分化腺癌組織中的表達(dá)(＋)（x400）CGA在低分化癌旁組織中的表達(dá)(－)（x100）CGA在低分化癌旁組織中的表達(dá)(－)（x400）CGA在低分化腺癌組織中的表達(dá)(＋)（x100）18萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文CgA在低分化腺癌組織中的表達(dá)(＋)（x400）19萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文第三章討論在惡性腫瘤疾病中，胃癌是最為常見(jiàn)的消化道惡性疾病之一。全球每年大約有將近100萬(wàn)人的新增胃癌病例，其中大約有40萬(wàn)個(gè)新發(fā)病例發(fā)生(40％)在我[5]國(guó)。流行病學(xué)資料顯示，我國(guó)胃癌的患病率和胃癌的死亡率是世界平均水平的[6-7]2倍還要多，約每?jī)傻饺昼娋陀?個(gè)人死于胃癌。目前胃癌的主要診斷方法是影象學(xué)檢查，胃鏡檢查以及活檢病理檢查，胃癌的發(fā)生是一個(gè)漸進(jìn)的過(guò)程，在胃癌發(fā)生的初期或癌前期，胃鏡下觀察不到明顯病變時(shí)往往無(wú)法得到及時(shí)的診斷，以致錯(cuò)過(guò)最佳的手術(shù)時(shí)機(jī)。在治療方面，手術(shù)切除治療仍是目前根治早期胃癌的主要手段，但并非所有患者就診時(shí)都是早期胃癌，相當(dāng)多的患者確診時(shí)已屬中晚期，對(duì)于這部分病人，即使能夠進(jìn)行手術(shù)治療，也往往效果欠佳，常在術(shù)后1-2年內(nèi)復(fù)發(fā)和發(fā)生轉(zhuǎn)移，是胃癌死亡的主要原因?；熾m然對(duì)胃癌有一定的治療效果，但個(gè)體差異很大。從理論上講，生物靶向治療具有針對(duì)性強(qiáng)、目標(biāo)明確的特點(diǎn)，應(yīng)該具有較好的療效，但在實(shí)際應(yīng)用中，找到合適的攻擊靶點(diǎn)十分困難，目前，有關(guān)胃癌的生物靶向治療尚處于摸索階段。因此，研究胃癌的發(fā)病機(jī)制，[19]對(duì)胃癌的早期診斷和治療具有重要的臨床意義。CgA被認(rèn)為是存在于多種惡性腫瘤組織中的神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物，最初發(fā)現(xiàn)其在神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中大量存在，后來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，其在一些內(nèi)分泌腫瘤以外的惡性腫瘤如肝癌、膽管癌、前列腺癌及大腸癌中也均存在，CgA陽(yáng)性表達(dá)的惡性腫瘤惡性程度高，易發(fā)生轉(zhuǎn)移。CgA參與惡性腫瘤的發(fā)病機(jī)制有多種途徑，CgA蛋白本身含有鈣離子結(jié)合位點(diǎn)、多聚谷氨酸和堿性氨基酸，也可釋放一些具有生物[20]活性的肽類物質(zhì)，可以和一些功能蛋白結(jié)合。一組對(duì)直腸癌的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):CgA可在翻譯或翻譯后階段影響P53蛋白的表達(dá)、改變其某些結(jié)構(gòu)和功能，改變后的P53蛋白因不能與TATA-結(jié)合蛋白競(jìng)爭(zhēng)COX-2啟動(dòng)子上的結(jié)合位點(diǎn)而促進(jìn)COX-2表達(dá)。另外，CgA還可上調(diào)EGFR表達(dá)，多項(xiàng)研究表明COX-2和EGFR表[21]達(dá)的上調(diào)與多種惡性腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，CgA在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為46.67%，在癌旁組織中的表達(dá)為5.83%，即CgA在胃癌組織中高表達(dá)，在癌旁正常組織中低表達(dá)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果有顯著性差異，這就提示CgA與胃癌的發(fā)生過(guò)程有某種關(guān)聯(lián)，研究結(jié)20萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文果顯示，CgA的表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度、分期分化有關(guān)，與部位、性別、年齡無(wú)關(guān)，進(jìn)一步說(shuō)明CgA不僅參與了胃癌的發(fā)生而且與胃癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移有著較為密切的關(guān)系，這一結(jié)果與CgA在大腸癌及前列腺癌中的研究[22]結(jié)果相似。鑒于CgA可由具有神經(jīng)內(nèi)分泌功能的細(xì)胞分泌，而CgA表達(dá)陽(yáng)性的胃癌組織具有一定的分泌CgA的功能，因此，我們可通過(guò)測(cè)定血液中的CgA水平來(lái)為早期胃癌的診斷提供幫助，當(dāng)然，由于CgA在多種惡性腫瘤中存在高表達(dá)，僅靠CgA一個(gè)指標(biāo)還不能完全作為早期胃癌篩選依據(jù)，需要與其它指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)[23]用，目前有學(xué)者開(kāi)始這方面的工作，并取得了一定進(jìn)展。Survivin是由Ambzosini等于1997年用效應(yīng)蛋白酶受體－1的cDNA在人類基因庫(kù)中篩選克隆出的基因，它定位于染色體17q25上，由142個(gè)氨基酸組成，[24]存在于同源二聚體形式，于細(xì)胞周期G2/M期表達(dá)。在胚胎發(fā)育時(shí)期Survivin表達(dá)廣泛，除胸腺等組織外,在正常分化的成人組織中表達(dá)較少，在正常情況下[25]即使增生較為活躍的組織中也不易檢測(cè)到。生物學(xué)功能主要有:①調(diào)節(jié)染色體的分離和胞質(zhì)分裂，抑制細(xì)胞凋亡。通過(guò)抑制凋亡caspase3和7去影響Fas介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)，最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。②對(duì)腫瘤新生血管生成的促進(jìn)作用:VEGF有促內(nèi)皮細(xì)胞的功能，Survivin的高表達(dá)能保護(hù)和維持該功能，促進(jìn)了腫瘤的[26]血管生成與浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移，Daniel等的研究報(bào)道也指出顯著表達(dá)的Survivin參與了三維血管網(wǎng)的形成。它能選擇性表達(dá)于惡性腫瘤組織，從而使細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化和抑制細(xì)胞凋亡，這也是惡性腫瘤發(fā)生的重要因素之一。研究表明：從正常的胃組織發(fā)展到最終癌變的整個(gè)疾病演變過(guò)程中，Survivin[27][28]都起到了較為重要的作用。孫迪文等人利用免疫組織化學(xué)SABC法檢驗(yàn)出了在正常的胃黏膜組織Survivin的陽(yáng)性表達(dá)率為0%，在輕、中、重度不典型增生組織Survivin的陽(yáng)性表達(dá)率分別為5.25%，6.32%，8.57%。在不完全型大腸化生與早期胃癌組織中Survivin的陽(yáng)性表達(dá)率分別為65.73%、68.51%，在胃癌發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中Survivin這種表達(dá)率呈逐漸增高趨勢(shì)的特性，可以做為胃癌疾病早期診斷和早期預(yù)警的一個(gè)有重要意義的分子輔助指標(biāo)。有關(guān)Survivin在胃癌不同臨床病理分期中表達(dá)的研究較少，且結(jié)論不一致，[29]Chun等報(bào)道，隨著腫瘤分化程度的降低，Survivin的表達(dá)水平逐漸升高，也和是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率要明顯低于有淋巴轉(zhuǎn)移21萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文[30]組的陽(yáng)性表達(dá)率，但與患者的性別、年齡和大體類型均無(wú)關(guān)系。Suburaya等在對(duì)25例胃癌患者的病理標(biāo)本運(yùn)用RT-PCR方法觀察了Survivin的表達(dá)情況后發(fā)現(xiàn)：胃癌的浸潤(rùn)深度以及腹膜轉(zhuǎn)移程度都與Survivin陽(yáng)性表達(dá)率之間有著較為密切的相關(guān)性，但是與是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織以及胃癌組織的分級(jí)沒(méi)有明顯的關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：Survivin在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為52.50%（63/120），在癌旁組織中的表達(dá)為9.17%（11/120），均有顯著性差異，表明Survivin在胃癌組織中高表達(dá)，在癌旁正常組織中低表達(dá)，與已有的研究報(bào)道基本相符，Survivin表達(dá)與性別、年齡、部位無(wú)關(guān)，與腫瘤浸潤(rùn)深度、有否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、分期分化有關(guān)，這一結(jié)果提示在胃癌的整個(gè)發(fā)生過(guò)程中Survivin不僅參與著，而且與胃癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移也密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)還重點(diǎn)研究了CgA與Survivin在胃癌組織中表達(dá)的相關(guān)性，結(jié)果顯示：56例CgA表達(dá)陽(yáng)性標(biāo)本中Survivin表達(dá)陽(yáng)性率85.7%，陰性14.3%；64例CgA表達(dá)陰性標(biāo)本中Survivin表達(dá)陽(yáng)率23.4%，陰性76.6%，Spearman相關(guān)分析顯示二者表達(dá)呈明顯正相關(guān)。這一結(jié)果提示我們，CgA可能通過(guò)對(duì)Survivin表達(dá)的影響這一途徑而參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過(guò)程。雖然CgA與Survivin在胃癌組織中都呈現(xiàn)高表達(dá)，而且與胃癌的分期、分化、轉(zhuǎn)移相關(guān)，但是CgA作為一種具有內(nèi)分泌功能的細(xì)胞的標(biāo)記物，其不僅存在于胃癌等一些惡性腫瘤組織中，而且還存在于腎上腺等一些內(nèi)分泌器官的細(xì)胞中，不適合作為胃[31]癌靶向治療的攻擊靶點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步提示，CgA可能通過(guò)對(duì)Survivin表達(dá)的影響這一途徑而參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過(guò)程，因而干預(yù)Survivin可以在一定程度上間接起到干預(yù)CgA的作用。Survivin經(jīng)過(guò)促進(jìn)細(xì)胞增殖與抑制細(xì)胞凋亡這兩個(gè)過(guò)程，使惡性腫瘤細(xì)胞增殖，而在正常胃粘膜組織中的表達(dá)率幾乎沒(méi)有，使Survivin有望成為胃癌基因靶向治療新靶點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)胃癌不同病理參數(shù)條件下CgA和Survivin表達(dá)的研究可以初步得到如下結(jié)果：1、CgA與Survivin在胃癌組織中高表達(dá)，在癌旁正常組織中低表達(dá)。2.CgA與Survivin的表達(dá)與胃癌患者的性別、年齡、部位無(wú)關(guān)，與胃癌的TNM分期和病理分級(jí)有關(guān)，CgA、Survivin均參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過(guò)程。3.CgA在胃癌組織中的表達(dá)與Survivin表達(dá)呈正相關(guān)，提示CgA可能通過(guò)對(duì)Survivin表達(dá)的影響這一新發(fā)現(xiàn)的途徑而參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過(guò)程。4、Survivin在癌組22萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文織中高表達(dá)，在癌旁及其它正常組織中低表達(dá)甚至不表達(dá)的特性，有望使其成為胃癌靶向治療的新靶點(diǎn)。23萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)論1.CgA和Survivin陽(yáng)性表達(dá)與胃癌的TNM分期和病理分級(jí)有關(guān)。2..CgA和Survivin在胃癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮協(xié)同作用。3.Survivin有望成為胃癌靶向治療的新的靶點(diǎn)。24萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文參考文獻(xiàn)[1]KulendranM,LeffDR,KerrK,etal.Globalcancerburdenandsustainablehealthdevelopment[J].TheLancet,2013,381(9865):427-429.[2]LeeYY,JunJK,SuhM,etal.BarrierstoCancerScreeningamongMedicalAidProgramRecipientsintheRepublicofKorea:AQualitativeStudy[J].AsianPacificJournalofCancerPrevention,2014,15(2):589-594.[3]陳萬(wàn)青,張思維,鄭榮壽,等.中國(guó)2009年惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J].中國(guó)腫瘤,2013(1):2-12.[4]ZhaoP,DaiM,ChenW,etal.CancertrendsinChina[J].Japanesejournalofclinicaloncology,2010,40(4):281-285.[5]ParkinDM.Epidemiologyofcancer:globalpatternsandtrends[J].Toxicologyletters,1998,102:227-234.[6]陳萬(wàn)青,張思維,鄭榮壽,等.中國(guó)2009年惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J].中國(guó)腫瘤,2013(1):2-12.[7]楊中行,卜世崇.全胃切除空腸P袢代胃術(shù)治療胃底賁門癌的效果評(píng)價(jià)[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2013(3):80-81.[8]LeeDY,HongSW,ChangYG,etal.Clinicalsignificanceofpreoperativeinflammatoryparametersingastriccancerpatients[J].Journalofgastriccancer,2013,13(2):111-116.[9]HamiltonSR，AltonenLA.Pathologyandgenetics.Tumorsofthedigestivesystem.WHO，2000，53.[10]VoliniaS,CalinGA,LiuCG,etal.AmicroRNAexpressionsignatureofhumansolidtumorsdefinescancergenetargets[J].ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica,2006,103(7):2257-2261.[11]WangK,ChenX,YanF,etal.5′-Triphosphate-siRNAAgainstSurvivinGeneInducesInterferonProductionandInhibitsProliferationofLungCancerCellsInVitro[J].JournalofImmunotherapy,2013,36(5):294-304.[12]XueH,ChenY,CaiX,etal.Thecombinedeffectofsurvivin-targetedshRNAand25萬(wàn)方數(shù)據(jù) 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延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文[綜述]CgA和Survivin在腫瘤中的研究進(jìn)展張恩含綜述李林虎審校惡性腫瘤的流行學(xué)調(diào)查表明，在1990年前肺癌、胃癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌和肝癌排在發(fā)病前五位，2000年前是肺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌、胃癌和肝癌排在發(fā)病前五位，而2012年前是肺癌、胃癌、肝癌、結(jié)直腸癌和乳腺癌排在發(fā)病[1]前五位。WHO全球監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示：2013年全球癌癥新發(fā)病例1500萬(wàn)，死亡790萬(wàn)，每8個(gè)死亡病例中就有1例是癌癥患者。從目前總體的癌癥發(fā)病情況看，肺癌一直排在第一位，第二位的就是胃癌。全球惡性腫瘤流行現(xiàn)狀應(yīng)該得到大家的關(guān)注，據(jù)相關(guān)部門預(yù)測(cè)，到2020年，全球惡性腫瘤的新發(fā)病人數(shù)將會(huì)達(dá)到2000萬(wàn)人左右。死亡的病例將會(huì)增加到1200萬(wàn)人左右。癌癥將成為威脅人類健康的第一殺手，也是全球?qū)⒁鎸?duì)的最大生命安全問(wèn)題。WHO警示，如若不采取有效的措施，依此種趨勢(shì)發(fā)展下去，在2030年全球?qū)?huì)增加2600萬(wàn)人的癌癥病例，因癌癥而死亡的人數(shù)將會(huì)快速躍至1700多萬(wàn)人，而其中很大部分將會(huì)發(fā)生在以[2]中、低等收入水平的發(fā)展中國(guó)家。在我國(guó)，據(jù)近年的惡性腫瘤資料統(tǒng)計(jì)顯示，約為137/10萬(wàn)的死亡率，其中男性癌癥患者的死亡率約為169/10萬(wàn)，女性癌癥患者的死亡率約為106/10萬(wàn)，男性高于女性。在我國(guó)惡性腫瘤中，按其危害程度排列，胃癌居于首位。依次分析出我國(guó)惡性腫瘤的發(fā)病率及死亡率的趨勢(shì)都在[3，4]快速增長(zhǎng)著。在惡性腫瘤疾病中，胃癌是最常見(jiàn)的消化道疾病之一。全球每年都會(huì)有將近[5]100萬(wàn)人的新增加胃癌病例，其中大約有40萬(wàn)個(gè)新增病例(近40％)在我們國(guó)家。有關(guān)醫(yī)學(xué)研究人員在胃癌方面曾調(diào)查報(bào)導(dǎo):中國(guó)胃癌的發(fā)病率和死亡率是世界平[6，7]均水平的2倍，每?jī)傻饺昼娋陀?人因胃癌而死亡。依此來(lái)看，相比其他的國(guó)家，中國(guó)的胃癌患者總體的的發(fā)展趨勢(shì)已經(jīng)是非常的不容樂(lè)觀。很多年來(lái)，各個(gè)國(guó)家政府都在醫(yī)療方面不斷的加大投入，總體上令治療、診斷的水平有了很大的提高，尤其使胃癌早期的診斷率和治愈率有了明顯提高。但到目前為止，胃28萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文[8]癌的確切發(fā)病機(jī)制仍然不是十分的確定，手術(shù)切除治療仍是目前根治早期胃癌的主要方案與手段。因?yàn)楹芏嗟幕颊咴诎l(fā)現(xiàn)胃癌時(shí)都是比較的晚，所以使其大多數(shù)人一經(jīng)發(fā)現(xiàn)已屬于晚期胃癌，雖然最終經(jīng)手術(shù)治療，但往往最終療效欠佳，術(shù)[9]后5年的生存率也不高，僅為20％~30%。術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致死亡的主要原因,深入研究胃癌的發(fā)病機(jī)制，對(duì)提高胃癌的治愈率和生存率、降低死亡率具有十分重要的意義。大量研究表明，細(xì)胞的異常增殖以及有關(guān)細(xì)胞凋亡抑制的腫瘤基因的異常表達(dá)與胃癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程有密切的關(guān)系，而且一些腫瘤基因在[10]胃癌組織中的異常表達(dá)與胃癌的轉(zhuǎn)移以及術(shù)后的復(fù)發(fā)有重要的因果關(guān)系。嗜鉻粒蛋白A（CgA）及凋亡抑制蛋白（Survivin）是目前腫瘤學(xué)研究中的兩個(gè)熱點(diǎn)，大量研究證實(shí)CgA、Survivin在多種惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中發(fā)[11]揮著重要作用。CgA是一種由439個(gè)氨基酸組成的酸性親水性蛋白質(zhì)，是神經(jīng)肽類家族中的一員,可用于神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷和有助于治療。神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞不僅廣泛地存在于機(jī)體的內(nèi)分泌器官組織中，也存在于腫瘤和非內(nèi)分泌器官中，是一種能夠[12]分泌肽類物質(zhì)或特殊胺的細(xì)胞。Survivin是目前為止發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的細(xì)胞凋亡抑制因子，研究發(fā)現(xiàn)該因子與腫瘤的發(fā)生以及腫瘤細(xì)胞中淋巴轉(zhuǎn)移、預(yù)后有著密切的聯(lián)系。Survivin經(jīng)過(guò)抑制細(xì)胞凋亡和促進(jìn)細(xì)胞增殖使腫瘤細(xì)胞惡性增殖并易于發(fā)生轉(zhuǎn)移，但其具體分子機(jī)制目前還不明確。惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程是比較精細(xì)且又復(fù)雜的，整個(gè)過(guò)程中表現(xiàn)為多步驟、多因素、多基因的協(xié)同作用，其中有著很多的抑癌基因、癌基因的突變以及各種因子的參與和作用及其產(chǎn)生的各種酶之間的各種化學(xué)變化。CgA和Survivin在腫瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展以及腫瘤組織細(xì)胞的增殖、遷移浸潤(rùn)、及正常細(xì)胞的凋亡等這些過(guò)程中都發(fā)揮重要的作用，可[13]作為高特異性，高敏感度的一種腫瘤標(biāo)記物用于腫瘤的診斷和評(píng)估預(yù)后。本文就CgA和Survivin對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞的發(fā)生，發(fā)展，浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移等過(guò)程中的表達(dá)及意義簡(jiǎn)要的作一綜述。一、CgACgA對(duì)很多的惡性腫瘤疾病都有著較高的診斷價(jià)值，如：在胃癌、前列腺癌、胰島素瘤、胃泌素瘤、嗜鉻細(xì)胞瘤、肺癌、心血管疾病中的發(fā)生、發(fā)展中都29萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文[14]發(fā)揮著重要的作用，因?yàn)樗欠翘禺愋阅[瘤的標(biāo)志物。1.1CgA的結(jié)構(gòu)及特性CgA由439個(gè)氨基酸組成，分子質(zhì)量48000，是一種酸性、親水蛋白質(zhì)，是神經(jīng)肽類家族中重要的成員之一，在神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)內(nèi)廣泛分布。CgA在神經(jīng)[15，16]內(nèi)分泌腫瘤診斷中的價(jià)值，使其在心血管疾病中也越來(lái)越受到關(guān)注。最早的CgA基因是從人胎肝基因庫(kù)中分離出來(lái)的。在人及動(dòng)物中，CgA的等電點(diǎn)、分子大小、免疫抗原表位以及位于N末端和C末端的區(qū)域等方面都具有著高度的[17]保守性，序列高度同源。CgA最早發(fā)現(xiàn)存在于腎上腺嗜鉻粒細(xì)胞的分泌顆粒中，目前知道在所有的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中，能分泌兒茶酚胺的囊泡中都存在著[18]CgA。近些年研究人員發(fā)現(xiàn)了該蛋白不僅存在于心肌、交感神經(jīng)末梢中，另外[19]還發(fā)現(xiàn)在胰腺、周圍神經(jīng)系統(tǒng)、甲狀腺組織、腸道內(nèi)分泌等組織內(nèi)也存在。細(xì)2+胞內(nèi)CgA的生物學(xué)功能主要有2個(gè):?參與Ca及兒茶酚胺代謝和增加高爾基網(wǎng)的通透性。?對(duì)高爾基網(wǎng)膜上的靶肽激素和神經(jīng)遞質(zhì)的聚集進(jìn)行選擇性調(diào)節(jié)。CgA的蛋白水解酶還不僅有組織特異性還具有著不同的蛋白酶水解位點(diǎn)。血管抑制因子-1，-2、胰抑素是目前已證實(shí)的在不同組織中能夠被分解成不同組織特異性的主要3個(gè)片段。其中兒茶酚抑素和血管抑制因子-1，分別發(fā)揮著不同的意[20]義與作用。1.2CgA與腫瘤1.2.1CgA與神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤存在神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤時(shí)，CgA在血漿中的水平一般都會(huì)升高。目前研究得出[21]結(jié)論：基本上血漿CgA的水平在所有類型的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中都會(huì)出現(xiàn)升高，CgA作為非特異性腫瘤標(biāo)志物，對(duì)腫瘤的診斷具有重要的價(jià)值。血漿CgA的濃度超過(guò)500600U/L是推斷神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤究竟是發(fā)生轉(zhuǎn)移和局灶性的重要依[22]據(jù)。Oberg等研究人員發(fā)現(xiàn)經(jīng)手術(shù)治療后的患者，其神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤血漿CgA的濃度水平則會(huì)隨之相應(yīng)的得到降低。因此，CgA不僅可以作為神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤輔助診斷的標(biāo)志物，而且還能夠在腫瘤的發(fā)展進(jìn)程中，使其對(duì)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和預(yù)后作一輔助指標(biāo)。在良性的功能性腫瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤方面，檢測(cè)24小時(shí)尿5-輕基30萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文叫味乙酸(5-HIaa)的靈敏性沒(méi)有CgA的靈敏性更高，因此CgA可首選為臨床檢[23]驗(yàn)的指標(biāo)。1.2.2CgA與前列腺癌[24]Berruti等研究人員發(fā)現(xiàn)，在前列腺癌組織中的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中，CgA作為血清標(biāo)志物可以成為前列腺癌的輔助診斷指標(biāo)。的升高對(duì)前列腺癌疾病的變化過(guò)程有著預(yù)測(cè)的作用。但是血漿CgA升高不為前列腺癌所特有，因?yàn)樵谏窠?jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞分泌中，CgA是一種特殊產(chǎn)物，在所有的內(nèi)分泌瘤中基本都會(huì)表現(xiàn)出CgA血漿水平升高，因此以此作為輔助標(biāo)準(zhǔn)在臨床上做聯(lián)合檢測(cè)前列腺特異性抗原及CgA，對(duì)評(píng)價(jià)及診斷前列腺癌的預(yù)后會(huì)有一定的臨床意義。王明、蔡[25]運(yùn)林等研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)進(jìn)展期遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的前列腺癌和前列腺的特異性抗原陰性監(jiān)測(cè)及診斷，血漿CgA水平濃度的高低具有重要的意義，可用于前列腺癌的診斷。另CgA作為內(nèi)分泌細(xì)胞的血清標(biāo)志物，可給伴有轉(zhuǎn)移性前列腺癌的患者或前列腺癌的患者的診斷和預(yù)后做一重要的輔助指標(biāo)。這將會(huì)在臨床上有重要的意義與作用。1.2.3CgA與嗜鉻細(xì)胞瘤常發(fā)生于腎上腺的嗜鉻細(xì)胞瘤是一種少見(jiàn)的疾病，惡性率占到10%~20%，[26]多以良性多見(jiàn)。目前多根據(jù)尿兒茶酚胺及其代謝物的水平，來(lái)診斷嗜鉻細(xì)胞瘤，[27]但因其特異性低使其較易受到自身?xiàng)l件以及各種藥物的影響。因CgA在檢測(cè)時(shí)，該蛋白的分泌不容易受到藥物的影響，故可用于輔助嗜鉻細(xì)胞瘤診斷的指標(biāo)[28][29]。張利朝等研究人員研究發(fā)現(xiàn)CgA在腎上腺髓質(zhì)的分布特點(diǎn)可以用來(lái)鑒別嗜鉻細(xì)胞瘤及腎上腺髓質(zhì)組織的增生與嗜鉻細(xì)胞癌疾病。并提示在內(nèi)分泌學(xué)基礎(chǔ)上腎上腺皮和髓質(zhì)之間相互調(diào)節(jié)。血漿中的甲氧基腎上腺素的水平及腫瘤組織的大小與CgA的表達(dá)量呈正相關(guān)性，惡性嗜鉻細(xì)胞瘤，可能血清CgA明顯升高。[30]馮超等發(fā)現(xiàn)，惡性嗜鉻細(xì)胞瘤可能性與CgA強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)成正相關(guān)，可用來(lái)預(yù)防腫瘤的復(fù)發(fā)和監(jiān)測(cè)治療的效果。1.2.4CgA與非小細(xì)胞肺癌鱗癌、大細(xì)胞癌、肺腺癌等非小細(xì)胞肺癌都有神經(jīng)內(nèi)分泌分化。CgA與非[31]小細(xì)胞肺癌中的神經(jīng)分泌也相關(guān)，也可作為輔助指標(biāo)用來(lái)監(jiān)測(cè)神經(jīng)內(nèi)分泌化。31萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文1.2.5CgA與內(nèi)分泌腫瘤胃腸胰腺內(nèi)分泌腫瘤均和CgA關(guān)系密切，其血漿CGA水平可作為預(yù)后不良[32][15]的指標(biāo)。楊曉鷗等研究人員發(fā)現(xiàn)對(duì)診斷胃泌素瘤有較高敏感性的血漿CgA，在胃腸胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中，血漿CgA的水平明顯升高，故可作為評(píng)價(jià)預(yù)后和監(jiān)測(cè)腫瘤發(fā)展的指標(biāo)。另外還對(duì)37名嗜鉻細(xì)胞瘤疾病患者和39名胃腸胰腺內(nèi)分泌腫瘤疾病患者的血漿CgA水平運(yùn)用CELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法)做了檢驗(yàn)，以正常人和非內(nèi)分泌腫瘤消化道疾病患者各自選出30名來(lái)對(duì)比參照，把研究血漿中CgA的水平作為目的，以此測(cè)出對(duì)診斷胃腸胰腺內(nèi)分泌腫瘤組織的臨界點(diǎn)，以及探討了該實(shí)驗(yàn)對(duì)診斷的價(jià)值及意義。最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:正常對(duì)照組(86，135和30U/L對(duì)20U/L，P<0.001)的血漿CgA水平明顯低于其它三組。30U/L為診斷CgA的臨界點(diǎn)，80.0%的敏感度，96.7%的特異性。因此，在神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤尤其是胃、腸、胰腺的內(nèi)分泌腫瘤中，血漿CgA水平都具有著較高的診斷價(jià)值。1.2.6CgA與其他腫瘤[33]Noble等研究人員研究發(fā)現(xiàn)對(duì)鑒別異位促腎上腺皮質(zhì)激素腫瘤，CgA的水平明顯升高有著重要的意義。CgA還能夠表達(dá)肺硬化性血管瘤中。CgA和癌胚[34]抗原125兩者聯(lián)合一起檢測(cè)，有助于鑒別婦科卵巢腫瘤的是否良性。鄧承慧等研究人員還發(fā)現(xiàn)慢性腎臟病的分期與CgA也有著密切的關(guān)聯(lián)。1.2.7CgA與心血管疾病CgA是神經(jīng)內(nèi)分泌活性的強(qiáng)有力指標(biāo)。在CgA與心血管疾病之間的關(guān)系方面，大量科學(xué)人員研究出了較多的成就。如有關(guān)報(bào)導(dǎo)：在漫性心力衰竭患者中其[35]心力衰竭增加幅度和嚴(yán)重程度與CgA的水平有著密切的相關(guān)性。張?chǎng)┑妊芯咳藛T還檢測(cè)了49例B型利鈉肽和血漿CgA水平的慢性心力衰竭患者，發(fā)現(xiàn)心力衰竭患者血漿b型利鈉肽及血漿中CgA水平升高的程度較為明顯，和心功能NYHA分級(jí)以及心力衰竭嚴(yán)重的程度關(guān)系較為密切，表明在慢性心力衰竭患者[36]中CgA是該疾病的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。Omland等人還對(duì)119例心肌梗死患者用了10.8a進(jìn)行了密切的跟蹤與隨訪分析顯示：心肌梗死后患者病死率的增加與血漿中CgA水平的高低具有相關(guān)性。校正前升高約10ng/mI，死亡風(fēng)險(xiǎn)比為1.22，校32萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文正后升高10ng/mI時(shí)，死亡風(fēng)險(xiǎn)比為1.17。從而提示出心肌梗死后的患者病死率[37]與血漿中的CgA升高密切相關(guān)。Pieroni等研究證實(shí)了腦鈉素的水平與血漿中[38]的CgA水平呈正相關(guān)。謝燁卿等人在研究中采用了免疫組織化學(xué)的方法證實(shí)了擴(kuò)張型心肌病患者血漿中的CgA水平升高比較顯著。在擴(kuò)張型心肌病患者的血液循環(huán)及心肌中的表達(dá)CgA都均有升高，提示CgA不僅與其病程相關(guān)，還參[16]與了擴(kuò)張型心肌病的發(fā)生。1.2.8CgA的其他作用在精神壓力評(píng)定中，CgA能夠成為腎上腺素的替代品，不僅參與了組織修復(fù)，還具有抑制細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)能量代謝，機(jī)體炎癥反應(yīng)的抑制，平衡細(xì)[39]胞內(nèi)外的鈣，兒茶酚胺釋放的抑制等諸多作用。在神經(jīng)內(nèi)分泌分化的組織中，CgA是特異、敏感和可靠的標(biāo)志物，對(duì)腫瘤的分型、診斷和預(yù)后均有著重要的[40]意義。二、SurvivinAmbrosini等研究人員在1997年，利用效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體-1的cDNA把Survivin（抑制凋亡蛋白）從人類基因組庫(kù)的雜交篩選中分離出來(lái)。Survive的別名又稱為生存素，是到目前為止，發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制因子中最強(qiáng)的一個(gè)，也是IAP家族的新成員，是唯一一個(gè)能夠通過(guò)內(nèi)源性抑制Caspase活性而抑制細(xì)胞凋亡的因子。有著腫瘤的特異性的Survivin只表達(dá)于胚胎組織和腫瘤，在成人的成熟分化組織中表達(dá)比較低或者不表達(dá)，而在人類的發(fā)育著的胚兒組織以及胚胎組織中表達(dá)度比較高，在惡性腫瘤組織中也高表達(dá)，如肺癌組織中，結(jié)腸癌組織中，肝癌和前列腺癌以及胰腺癌組織中等，并和癌組織的臨床病理分級(jí)、分期等特征有[41]著較為密切的關(guān)聯(lián)，故可參考作為這些惡性腫瘤的獨(dú)立預(yù)后輔助指標(biāo)。2.1Survivin結(jié)構(gòu)在人體中Survivin定位于染色體的17q25上，相對(duì)分子質(zhì)量為16kDa，由142個(gè)氨基酸組成。抑制凋亡蛋白類家族中每個(gè)成員的IAP重復(fù)區(qū)序列都是由2~3個(gè)串聯(lián)的組氨酸/含半胱氨酸的桿狀病毒構(gòu)成。主要是BIR發(fā)揮抗凋亡作用，其中與此相鄰的梭基末端還含有一個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)。而在抑制凋亡蛋白類家族中，作33萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文為新成員的Survivin的功能區(qū)卻只有單一的BIR，沒(méi)有鋅指結(jié)構(gòu)，只有交織螺旋結(jié)構(gòu)替代，從而使其結(jié)構(gòu)比較的獨(dú)特。Survivin主要表達(dá)于細(xì)胞G2/M期，在細(xì)胞紡錘體上起作用。Survivin蛋白與紡錘體在有絲分裂前期時(shí)，利用微管結(jié)構(gòu)相互之間發(fā)生作用，來(lái)對(duì)G2/M期稽查點(diǎn)的效應(yīng)做出對(duì)抗，并共同抑制了casPase3和7的活性，為了在G2/M時(shí)期讓更多的腫瘤細(xì)胞通過(guò)稽查點(diǎn)，而抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，并對(duì)來(lái)自于因基因突變誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡做出對(duì)抗，使其發(fā)揮抗凋亡的作[42-44]用，從而使腫瘤組織細(xì)胞產(chǎn)生病理性的分裂增殖。2.2Survivin的生物學(xué)功能2.2.1Survivin與凋亡Survivin不僅通過(guò)多種途徑來(lái)抑制細(xì)胞的凋亡，而且它還是極強(qiáng)的凋亡抑制因子；Survivin在細(xì)胞內(nèi)能與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白（CDK4）結(jié)合，使Rb磷酸化和CDK2激活，加快DNA的復(fù)制，進(jìn)而縮短細(xì)胞周期的進(jìn)程；在細(xì)胞凋亡信號(hào)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中效應(yīng)蛋白酶（Caspase）家族起到了主要的作用和機(jī)制，在蛋白酶（Caspase）家族中到目前為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了10余種，其中Caspase3是細(xì)胞凋亡中比較關(guān)鍵的一個(gè)因子，與線粒體內(nèi)的結(jié)構(gòu)p21waf1/cip結(jié)合后失去活性。當(dāng)在某些因素刺激作用下Survivin的表達(dá)增高時(shí)，結(jié)合CDK4形成復(fù)合體，把p21waf1/cip從中釋放出來(lái)，再一次的p21waf1/cip與CasPase3相結(jié)合，抑制凋亡及使其失去活性；Survivin蛋白與紡錘體在有絲分裂前期時(shí)，利用微管結(jié)構(gòu)相互之間發(fā)生特異性作用，致使casPase7和casPase3的活性得到抑制，從而抑制細(xì)胞的凋亡；Survivin對(duì)抗其協(xié)助凋亡功能主要是通過(guò)結(jié)合smac/diablo凋亡蛋白，啟動(dòng)凋亡程序，參與激活caspase-9，與Survivin結(jié)合后啟動(dòng)凋亡程序產(chǎn)生拮抗作用；bax細(xì)胞的凋亡、抗癌藥物的誘導(dǎo)以及Fas的細(xì)胞凋亡以及Apaf-1的激活和線粒[45]體細(xì)胞色素c的釋放中Survivin都起到了抑制的作用。2.2.2Survivin在血管中作用在腫瘤的整個(gè)發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，淋巴管和血管形成的整個(gè)過(guò)程中的核心就是淋巴管、血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。血管形成的先決條件就是血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與凋亡的平衡。血管形成素-1(Ang-1)是血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性配體，血管形成在[46]胚胎時(shí)期時(shí)，起到的重要作用是維持血管管腔形成與血管腔的穩(wěn)定。據(jù)有報(bào)道：34萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文Survivin參與了血管的形成過(guò)程。Survivin的表達(dá)上調(diào)給血管形成素-1(Ang-1)[47]發(fā)揮作用提供了依靠。VEGF(血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子)的作用有|：?增加血管的通透性。?促進(jìn)腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移。?誘導(dǎo)微血管形成，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有著特異性。VEGF與腫瘤組織的的轉(zhuǎn)移預(yù)后及復(fù)發(fā)有著密切的關(guān)系。有相關(guān)報(bào)道：在VEGF介導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)過(guò)程中Survivin起到了關(guān)鍵作用。VEGF在淋巴管、腫瘤血管生成過(guò)程中的抗凋亡作用，Survivin的高表達(dá)對(duì)其有著重要的促進(jìn)作用。Survivin能夠維持和保護(hù)因化療藥物而遭到破壞的微小管網(wǎng)的結(jié)構(gòu)以及因該藥物對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的有促凋亡作用的逆向增進(jìn)了VEGF的血管、淋巴管內(nèi)[48，49]皮細(xì)胞保護(hù)功能，從而使腫瘤組織的抗藥性得到增加。2.2.3Survivin與胃腸道惡性腫瘤胃癌的形成是由正常的胃黏膜經(jīng)由淺表性胃炎發(fā)展慢性萎縮性胃炎，再到腸化和非典型的增生，最后發(fā)展到胃癌。此過(guò)程分為多個(gè)步驟與多個(gè)階段，相互參與，不僅精細(xì)且又較為復(fù)雜。另有關(guān)研究人員還發(fā)現(xiàn)在胃癌組織中發(fā)展過(guò)程中的[50]不同階段與不同時(shí)期，抑制凋亡蛋白Survivin都有著分別不同的陽(yáng)性表達(dá)率。研究人員孫迪文等人利用免疫組織化學(xué)SABC法檢驗(yàn)出了在正常的胃黏膜組織Survivin的陽(yáng)性表達(dá)率分別為0%。Survivin在輕、中、重度不典型增生組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為5.25%，，6.32%，8.57%。在不完全型大腸化生與早期胃癌組織中Survivin的陽(yáng)性表達(dá)率分別為65.73%、68.51%，其結(jié)果都不同程度的呈現(xiàn)明[51]顯出了增強(qiáng)的趨勢(shì)。關(guān)于Survivin在胃癌不同臨床病理分期的表達(dá)等方面的相[52]關(guān)研究報(bào)導(dǎo)，目前結(jié)論還暫不統(tǒng)一。Chun等人通過(guò)研究還發(fā)現(xiàn)，隨著腫瘤分化程度的降低，Survivin的表達(dá)水平逐漸升高，也和是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系也[53]很密切。但是TSuburaya等研究人員在對(duì)25例胃癌患者的病理標(biāo)本運(yùn)用RT-PCR方法觀察了Survivin的表達(dá)情況后發(fā)現(xiàn)：胃癌的浸潤(rùn)深度以及腹膜轉(zhuǎn)移程度都與Survivin陽(yáng)性表達(dá)率之間有著較為密切的相關(guān)性，但是與是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織以及胃癌組織的分級(jí)沒(méi)有明顯的關(guān)系。另有研究表明：可以在腫瘤患者血清中用利用間接的ELISA方法從中檢測(cè)出Survivin，從而進(jìn)一步利用其[54]做出對(duì)腫瘤的診斷。目前的大部分胃癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)都是在胃鏡下探視下取出病理做活檢，但整個(gè)過(guò)程患者必須忍受做胃鏡所帶來(lái)的痛苦。有研究人員發(fā)現(xiàn)可利用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈32反應(yīng)檢測(cè)胃癌患者血清中的Survivin基因的表達(dá)，有可35萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文[55]能避免因做胃鏡檢查時(shí)胃鏡對(duì)黏膜組織的損傷而給患者帶來(lái)的痛苦。但此類的相關(guān)方向還有待于進(jìn)一步的探索研究。對(duì)于胃癌預(yù)后的判斷Survivin有著重要[56]的作用。在胃癌組織中Survivin的高表達(dá)率是通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的惡性增殖，但在正常的胃粘膜組織里基本不表達(dá)，這促使Survivin成為了較為理想的腫瘤基因靶向治療的靶點(diǎn)。抑制凋亡蛋白（Survivin）基因靶向治主要是療針對(duì)腫瘤細(xì)胞，抑制其增殖并促使其凋亡，而不影響正常的[56]細(xì)胞活性，這是其所特有的優(yōu)勢(shì)。Survivin基因靶向治療治療包括:核酶、RNA干擾、反義Survivin等?；虬邢蛑委熕哂械膬?yōu)勢(shì)使Survivin對(duì)胃癌的新治[57]療方式的研究具有了重要的意義。另外，Survivin亦可作為一個(gè)腫瘤標(biāo)志物應(yīng)[58]用于腫瘤早期的檢測(cè)和篩查，可作為胃癌患者預(yù)后的輔助診斷。三展望CgA是對(duì)神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤診斷有較高診斷價(jià)值的非特異性腫瘤標(biāo)志物。雖然我們目前對(duì)CgA研究與探討都有了很多的成果，但依舊存在著很多的問(wèn)題等待著我們?nèi)ソ鉀Q，比如CgA在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)升高的機(jī)制，實(shí)驗(yàn)只能證明其在很多腫瘤中都表達(dá)有所上升，以及CgA在腫瘤組織細(xì)胞中的發(fā)生發(fā)展中起一定的作用，但其機(jī)制及作用的具體方面還有著很多的待未探明的空間。Survivin經(jīng)過(guò)抑制細(xì)胞凋亡和促進(jìn)細(xì)胞增殖來(lái)使腫瘤細(xì)胞惡性增殖，便利了腫瘤細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)移，但Survivin具體的分子機(jī)制過(guò)程目前還是不能夠得到明確的答案。腫瘤組織的整個(gè)發(fā)生發(fā)展的過(guò)程是比較精細(xì)且又復(fù)雜的，整個(gè)過(guò)程中表現(xiàn)為多步驟、多因素、多基因的協(xié)同作用，其中有著很多的抑癌基因、癌基因的突變以及各種因子的參與和作用及產(chǎn)生各種酶之間的各種化學(xué)變化。CgA和Survivin在腫瘤細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展以及腫瘤組織細(xì)胞的增殖、遷移浸潤(rùn)、及正常細(xì)胞的凋亡等這些過(guò)程中都發(fā)揮著較為重要的作用，故可作為高特異性，高敏感度的一種腫瘤標(biāo)記物來(lái)為腫瘤的診斷做服務(wù)。到目前為止許多的實(shí)驗(yàn)研究只是單獨(dú)的對(duì)CgA和Survivin或與其它因子一起在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，但此二者的聯(lián)合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)以及二者在胃癌發(fā)病機(jī)制中的相關(guān)性研究還尚未見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。通過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)法對(duì)二者的聯(lián)合檢測(cè)，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該對(duì)胃癌的初步診斷具有一定的輔助作用，以此來(lái)進(jìn)一步減少不必要的誤診，爭(zhēng)取做到早診斷、早干預(yù)，根據(jù)不同的發(fā)36萬(wàn)方數(shù)據(jù) 延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文病機(jī)制有針對(duì)的進(jìn)行治療，對(duì)提高治愈率和生存率、降低死亡率具有十分重要的意義。37萬(wàn)方數(shù)據(jù) 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延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文致謝本論文是在李林虎老師的精心指導(dǎo)和大力支持下完成的。感謝李林虎老師在我研究生期間對(duì)我的細(xì)心指導(dǎo)和培養(yǎng)，他淵博的知識(shí)開(kāi)闊的視野，深深的啟迪了我。三年的研究生時(shí)間里，李老師每天都以嚴(yán)謹(jǐn)態(tài)度和敬業(yè)的精神深深的影響著我，定將對(duì)我以后的工作與學(xué)習(xí)產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響，我再次向敬愛(ài)的李老師表示衷心的感謝！感謝這三年來(lái)延邊醫(yī)院普一科所有的醫(yī)護(hù)老師對(duì)我工作專業(yè)技能以及生活中為人處事能力的精心培養(yǎng)，你們?cè)趯W(xué)業(yè)上的細(xì)心關(guān)心與指導(dǎo)必將為我以后的工作和繼續(xù)學(xué)習(xí)打下了夯實(shí)的基礎(chǔ)，你們所有的寶貴的臨床工作經(jīng)驗(yàn)的灌注，都將是我一生的財(cái)富。在這里我要向諸位老師深深的鞠上一躬！感謝延邊大學(xué)附屬醫(yī)院病理科樸東明教授、金仁順教授以及各位病理科老師對(duì)我實(shí)驗(yàn)的支持，在步驟方法等方面使我節(jié)省了大量時(shí)間。感謝延邊大學(xué)臨床學(xué)院、醫(yī)院各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)、研究生處、科教處各位老師的教育與培養(yǎng)。感謝我的同學(xué)們?nèi)陙?lái)對(duì)我的包容與關(guān)懷！感謝家人三年來(lái)對(duì)我的理解、鼓勵(lì)和支持！衷心感謝本次論文評(píng)審和答辯審查的各位專家老師們，你們辛苦了！再一次對(duì)所有教導(dǎo)、幫助、關(guān)心過(guò)我的人表示衷心的感謝！最后，祝所有老師、同學(xué)們永遠(yuǎn)快樂(lè)、一生平安！謝謝！43萬(wàn)方數(shù)據(jù)
