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《重要-輪狀病毒四價滅活疫苗的制備及在小鼠的免疫原性研究》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)輪狀病毒四價滅活疫苗的制備及在小鼠的免疫原性研究姜英,王名強(qiáng),傅生芳,安紅,周旭(蘭州生物制品研究所,蘭州730046)摘要:制備輪狀病毒四價滅活疫苗,觀察其在小鼠體內(nèi)的抗體應(yīng)答情況。實(shí)驗(yàn)采用輪狀病毒原液經(jīng)凝膠過濾層析純化,滅活后配制四價疫苗,肌肉注射免疫小鼠,ELISA法測定小鼠血清IgA、IgG。將單價c1、G2、G3、G4型滅活病毒原液及四價輪狀病毒滅活疫苗免疫小鼠后,均可刺激產(chǎn)生針對RV的高水平的特異性Igc抗體,但I(xiàn)gA應(yīng)答較弱。表明四價輪狀病毒滅活疫苗在小鼠中具備很好的免疫原性。關(guān)鍵詞:輪狀病毒四價滅活疫苗,小鼠免疫,IgG,IgA中
2、圍分類號:R372‘2文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1005-5673(2008)04·O007—04PreparationofthetetravalentinactivatedrotavirusvaccineandevaluationofitsimmunogenidtyinmiceJIANG1,jing。WANGMing-qiang,F(xiàn)USheaf-fang-eta1.(LandwuInstituteo/尉比睜越Products-Lanzlwu730046,China)Abstract:Thetetravalentinactivatedmtavirusvac
3、cineWaftpreparedandtheantibodyresporisewasobservedinmice.Therotavimsstocksolutionwasinactivatedandpurifiedwitllgel.filtrationchromatography.The6Uedtetravalemrotavirusvac-cinewasinjectedintoBALB/cmiceinordertodetecttheantibodyresponsesagainsttotheG1。G2IG3,G4monovalentvaccineandtet
4、ravalentvaccineusingELISA.Theresultsshowedthattheinactivatedtetravalentrotavirusvaccillecanin-ducethehighlevelandspecificIgGantiboy-buttheIgAlevdislow.Theinactivatedtetravalentrotavlrusvaccineisofthegoodimmunogenicity.Keywords:Inaetivedtetravalentrotavirusvaccine;Micemodel;IgG;Ig
5、A輪狀病毒是引起全世界兒童重癥腹瀉的首要原因,每年導(dǎo)致全球35—60萬五歲以下兒童死亡¨】。有效接種輪狀病毒疫苗是減輕疾病負(fù)擔(dān)最經(jīng)濟(jì)的方法。全世界已對多種疫苗候選株開展了不同動物模型試驗(yàn)或臨床試驗(yàn)¨引。許多疫苗候選株以減毒活輪狀病毒毒株為基礎(chǔ)通過口服模擬自然感染的過程進(jìn)行免疫。同時,滅活疫苗和第二代亞單位疫苗也在研發(fā)中。它們被設(shè)計為肌肉注射或通過母代服用,已在不同動物模型中進(jìn)行了評估¨..J。輪狀病毒口服活疫苗與這兩種疫苗相比,存在以下幾個方面的缺陷:①可被經(jīng)由胎盤和母乳傳遞的母體抗體削弱甚至使其不起作用;②可在疫苗株和野毒株之間發(fā)生重配;③對于兒童可使
6、其形成先天性或獲得性的免疫缺陷‘51。實(shí)驗(yàn)中以人類感染的主要輪狀病毒血清型Gl(W284)、G2(D36)、G3($25)、G4(L8)為基礎(chǔ),制備輪狀病毒四價滅活疫苗,免疫小鼠,檢測其血清抗收稿日期:2008—09·16;修回日期:2008一10—10作者簡介:姜英(1973-),女。碩士。助理研究員,主要從事病毒性疫苗研究。體,對滅活輪狀病毒的免疫原性進(jìn)行研究。材料和方法7l輪狀病毒四價滅活疫苗的制備w284(G1)、D36(G2)、$25(G3)及LH(c4)型輪狀病毒細(xì)胞培養(yǎng)液經(jīng)凝膠過濾層析純化后,收獲活性峰,ELISA法測定活性,并測定蛋白含量
7、,B一丙內(nèi)酯滅活后,四型等量混合配制成四價滅活疫苗備用。2免疫動物健康BAL8/c小鼠,雌性,12—149,由蘭州生物制品研究所實(shí)驗(yàn)動物室提供。3免疫程序?qū)⑿∈箅S機(jī)分為十四組,每組10只,分別以Gl的第一峰5¨g/ml、10嵋Jml,G2的第一峰5pg/lIll、10t蝎/ml,G3的第一峰5∥nd、lOp∥IIll,C,4的第一峰5¨g/rrd、10t,#n:ll,G1的第二峰10斗g/ml,G2的第二峰lO∥lIll,G3的第二峰10tLg/ml,G4的第二峰10嵋/ml及四價輪狀病毒滅活疫苗10斗g/ml、20pg/mi為抗原經(jīng)肌肉注射,免疫劑量為
8、0.2ml,免后3周以相同劑量免疫第二針及第三針。二針免后3周、三針免后的2周、