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《豬腹瀉相關(guān)病毒多重和sybr greenⅰ熒光定量pcr檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、ClassifiedIndex：Confidential(yes／no)：noCode：10224NO．120620500DissertationfortheProfessionalMasterDegreeEstablishmentandPreliminaryApplicationofMultipleandSYBRGreenIrealtimePCRDetectionforPorcineDiarrheaVirusCandidate：WUYangSupervisor：Prof．LiYijingDegreeCategory：Master
2、ofVeterinaryScienceCollege：CollegeofVeterinaryMedicineResearchField：PreventiveVeterinaryScienceStudyMode：Full--timeHarbinChinaJune’2014目錄煳慚中文摘要????????????????????????????I???．．1英文摘要???????????????????????????????．1II1．前言?????????????????????????????????11．1病原概述??????
3、????????????????????????．11．1．1豬流行性腹瀉病毒???????????????????????．．11．1．2豬傳染性胃腸炎病毒??????????????????????一31．1．3豬輪狀病毒??????????????????????????．．41．2PEDV、TGEV、PoRV的診斷方法???????????????????51．2．1臨床診斷???????????????????????????．51．2．2實(shí)驗(yàn)室診斷???????????????????????????61．3實(shí)時(shí)熒光定
4、量PCR技術(shù)???????????????????一???101．3．1原理??????????????????????????????????????．111．3．2分類??????????????????????????????????????．111．3．3應(yīng)用?????????????????????????????111．4研究的目的和意義?????????????????????????．．122．材料與方法??????????????????????????????．132．1實(shí)驗(yàn)材料????????????????
5、????????????。132．1．1病毒及臨床樣品??????????????????。?????．．132．1．2主要試劑???????????????????????????132．1．3引物設(shè)計(jì)與合成????????????????????????．．132．1．4病料樣品的處理????????????????????????．142．1．5主要儀器設(shè)備?????????????????????????．142．2實(shí)驗(yàn)方法?????????????????????????????152．2．1單一病原體基因PCR擴(kuò)增及測(cè)
6、序?????????????????．152．2．2多重lmPCR擴(kuò)增???????????????????????．．162．2．3PCR產(chǎn)物的回收???????????????????????????162．2．4目的基因片段與pMDl8．T載體的連接???????????????．172．2．5大腸桿菌JM．109感受態(tài)的制備??????????????????．172．2．6連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化????????????????????????．172．2．7pMDl8．T基因重組質(zhì)粒的鑒定??????????????????一1
7、72．2．8測(cè)序及結(jié)果分析???????????????????????????．192．2．9多重PCR擴(kuò)增條件的優(yōu)化????????????????????192．2．10特異性試驗(yàn)??????????????????????????192．2．11敏感性試驗(yàn)??????????????????????????19東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩二1．學(xué)位論文2．2．12重復(fù)性試驗(yàn)???????????????????????????????．192．2．13臨床感染病料的檢測(cè)??????????????????????192．2．14熒光定量
8、PCR標(biāo)準(zhǔn)品的制備及標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立???????????202．2．15熒光定量PCR的特異性????????????????????．．202．2．16熒光定量PCR的重復(fù)性?????????????????????．212．2．17熒光定量PC
