補(bǔ)精益視片調(diào)控mnu誘導(dǎo)大鼠感光細(xì)胞凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究

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1、成都中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要目的：本課題以N一甲基一N一亞硝基脲(N-methyl-N—nitrosourea．心U)誘導(dǎo)的大鼠視網(wǎng)膜感光細(xì)胞凋亡模型為研究對(duì)象，初步探討補(bǔ)精益視片在感光細(xì)胞凋亡過(guò)程中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控機(jī)制及其治療視網(wǎng)膜退行性病變的作用靶點(diǎn)和分子機(jī)理，以具有感光細(xì)胞凋亡為共同病理特征的視網(wǎng)膜色素變性為代表性眼病，旨在從不同角度探索補(bǔ)精益視片治療此類(lèi)眼病的療效與機(jī)制，為臨床用藥提供客觀依據(jù)，同時(shí)也為今后研究明目中藥防治視網(wǎng)膜變性類(lèi)疾病提供新的思路和方法。方法：建立MNU誘導(dǎo)的SD大鼠視網(wǎng)膜感光細(xì)胞凋亡模型，采用mfERG、組織病理學(xué)技術(shù)(光、電鏡)、原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記(Tu

2、nel)法觀察補(bǔ)精益視片干預(yù)后模型大鼠在視網(wǎng)膜功能、組織形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)及感光細(xì)胞凋亡的變化；運(yùn)用免疫組化和蛋白免疫印跡法(WesternBlot)探索研究補(bǔ)精益視片干預(yù)MNU誘導(dǎo)的模型大鼠視網(wǎng)膜感光細(xì)胞凋亡前信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)活性因子P53、Cyt—C、Apaf一1、Caspase-9的蛋白表達(dá)變化。結(jié)果：①造模后24h，模型組mfERG檢測(cè)結(jié)果顯示N。波和P。波振幅降低，峰潛時(shí)延長(zhǎng)，光鏡和電鏡觀察顯示視網(wǎng)膜外核層變薄，結(jié)構(gòu)紊亂，核固縮，光感受器外節(jié)盤(pán)膜結(jié)構(gòu)異常，Tunel法示感光細(xì)胞凋亡率顯著增加，提示造模成功，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(O．05)；劑量探索研究提示MNU40mg為最佳造模誘導(dǎo)劑量，差

3、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

4、亡；用藥組與陰性對(duì)照組比較，各蛋白表達(dá)均不同程度下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Jp

5、yl—n—nitrosoureawhichinducedretinaIphotoreceptorapoptosisoftheratretinaphotosensitivitycelImodel，discusstheBuJingYiShitabletontheregulatorymechanismofsignalprocessofphotoreceptorcellapoptosisandactingtargetsandmolecularmechanismofthetreatmentretinaldegenerativediseases，takeretinitispigmentosawhich

6、withphotoreceptorcellapoptosisasthecommonpathologicalfeaturesfortherepresentativeeye，aimedfromdifferentanglestoexploretheeffectandmechanismofBuJingYiShitabletinthetreatmentofthesametypeofeyedisease，Provideaguidanceforclinical，alsoprovidenewideasandmethodsofChineseherbsinthefuturepreventionandtreat

7、mentofretinaldegenerationdiseases．Methods：EstablishMNUSDinducedratretinalphotosensitivecellsapoptosismodel，usingmfERGhistopathoIogicaltechnology(optical，electronmicroscopy)，TUNELmethod，observingBuJingYiShitabletm