廣州管圓線蟲(chóng)感染小鼠腦組織cathepsins表達(dá)變化及achtcp基因的克隆

《廣州管圓線蟲(chóng)感染小鼠腦組織cathepsins表達(dá)變化及achtcp基因的克隆》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名(手寫(xiě))：斗j津簽字日期：矽f≥年，7月2，擴(kuò)日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)

2、印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國(guó)學(xué)術(shù)期刊(光盤(pán)版)電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》和《中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》中全文發(fā)表，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū))學(xué)位黻儲(chǔ)簽名(鎢)：畔1疋鋤簽名(褐)：陋簽字日期：p13年歲月w日簽字日期：勵(lì)f弓年于月≯g『日摘要廣州管圓線蟲(chóng)病(Ang

3、iostrongyliasiscantonensis)是由廣州管圓線蟲(chóng)Angiostrongyluscantonensis似c)引起的以中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥為主的食源性寄生蟲(chóng)病。軟體動(dòng)物螺類(lèi)，如非洲大蝸牛Achatinafulica(Ferussac，1821)、福壽螺Pomaceacanaliculata(Lamarck，1819)是彳c中間宿主、大鼠是彳c的終宿主、人和小鼠等是其非適宜宿主。人多因生食含有三期幼蟲(chóng)的淡水螺肉而感染。廣州管圓線蟲(chóng)病主要在東南亞和太平洋島嶼流行。自1945年臺(tái)灣首例報(bào)道之后，國(guó)內(nèi)也

4、陸續(xù)出現(xiàn)新發(fā)病例報(bào)道，而且在浙江和北京均出現(xiàn)大規(guī)模爆發(fā)流行，我國(guó)衛(wèi)生部于2003年將廣州管圓線蟲(chóng)病列為新發(fā)傳染病。目前，臨床上廣州管圓線蟲(chóng)病主要診斷依據(jù)包括三個(gè)方面：接觸史、臨床癥狀和ELISA檢測(cè)結(jié)果。從感染患者腦脊液中檢測(cè)到蟲(chóng)體是診斷此病的金標(biāo)準(zhǔn)，盡管此方法結(jié)果可靠，但是檢出率很低，而且是侵襲性檢查，因此難以普及，臨床上也少見(jiàn)使用。實(shí)驗(yàn)室最常采用的診斷方法是ELISA法(檢測(cè)患者血清特異性抗體)，但用于ELISA法的抗原是蟲(chóng)體粗抗原，不但敏感性和特異性有待提高，也無(wú)法用于療效考核。因此，尋找具有診斷價(jià)值的

5、生物標(biāo)記物對(duì)于改進(jìn)和完善廣州管圓線蟲(chóng)病的診斷方法具有重要意義。從已有的研究中不難發(fā)現(xiàn)，在寄生蟲(chóng)感染宿主過(guò)程中，宿主和寄生蟲(chóng)的組織蛋白酶均發(fā)揮重要作用。小鼠組織蛋白酶亞型眾多，搜索Pubmed數(shù)據(jù)庫(kù)可得到18種組織蛋白酶亞型，即是：CathepsinA，B，C，D，E，F(xiàn)，GH，J，K，L，M，O，Q，R，S，w,z。通過(guò)對(duì)有關(guān)宿主組織蛋白酶文獻(xiàn)的分析，推測(cè)小鼠組織蛋白酶可能參與寄生蟲(chóng)感染所致腦炎的過(guò)程。從GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得廣州管圓線蟲(chóng)血紅蛋白型半胱氨酸蛋白酶(Angiostrongyluscanton

6、ensishemoglobinase·typecysteineproteinaseGenBank號(hào)碼：HQll0101．1)基因序列。研究發(fā)現(xiàn)蟲(chóng)源性組織蛋白酶與寄生蟲(chóng)的宿主入侵、自身保護(hù)和免疫逃避相關(guān)。本研究分兩個(gè)部分：①感染BALB／c小鼠腦部組織蛋白酶各亞型的表達(dá)譜及變化規(guī)律研究；②廣州管圓線蟲(chóng)血紅蛋白型半胱氨酸蛋白酶基因的克隆。II摘要第一部分感染小鼠腦部組織蛋白酶各亞型的表達(dá)譜及其變化規(guī)律研究研究目的研究BALB／c小鼠Ac感染模型，動(dòng)態(tài)觀察感染BALB／c小鼠組織蛋白酶亞型的表達(dá)譜及表達(dá)譜的變化。為

7、進(jìn)一步尋找到可作為診斷廣州管圓線蟲(chóng)病的生物標(biāo)記物(biomarker)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。研究?jī)?nèi)容和方法1．在GenBank中查找小鼠不同亞型組織蛋白酶家族基因序列信息。2．通過(guò)網(wǎng)站https：／／www．genscript．corn／ssl-bin／app／primer，分別設(shè)計(jì)小鼠組織蛋白酶18個(gè)亞型(包括：cathepsinA，B，C，D，E，F(xiàn)，13lH，J，K，L，M，O，Q，RS，W，Z)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real．timePCR)引物。3．建立感染廣州管圓線蟲(chóng)病的BALB／c小鼠動(dòng)物模型，收集感染

8、不同時(shí)點(diǎn)(7d、14d、21d)的腦組織，用Real．timePCR檢測(cè)分析小鼠感染后各種亞型基因的表達(dá)情況。研究結(jié)果1．在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中共發(fā)現(xiàn)小鼠組織蛋白酶18個(gè)亞型，包括：cathepsinA，B，C，D，E，F(xiàn)，GH，J，K，L，M，O，Q，R，S，w,z。2．建立感染廣州管圓線蟲(chóng)病BALB／c小鼠模型，通過(guò)對(duì)感染過(guò)程腦組織組織蛋白酶各亞型的表達(dá)水平的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)不同亞型組織蛋白酶表達(dá)呈