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《2005mrna差異顯示pcr的研究進(jìn)展》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、維普資訊http://www.cqvip.com第2O卷第2期北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報V01.2O.No.22005年4月JoURNALoFBEIJINGAGRICULTURALCOLLEGEApr.,2005mRNA差異顯示PCR的研究進(jìn)展安健,汪明,王黎霞,楊靜。,夏茂華。(1.北京農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)技術(shù)系,北京102206;2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,北京100094;3.北京動物園,北京100044)摘要:mRNA差異顯示PCR技術(shù)是在基因轉(zhuǎn)錄水平上研究差異表達(dá)和性狀差異的有效方法之一,該方法在生物的發(fā)育、性狀和對各種生物、理化因子作用時應(yīng)答過程基因表達(dá)的研究中應(yīng)用
2、十分廣泛,筆者簡述了mRNA差異顯示PCR技術(shù)的基本原理、技術(shù)改進(jìn)以及此技術(shù)在球蟲抗藥性研究中的應(yīng)用。關(guān)鍵詞:mRNA差異顯示PCR;球蟲;抗藥性中圖分類號:$852.72文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1002—3186(2005)02—0064—05mRNADifferentialDisplayandItsApplicationonDrug-ResistanceofCoccidiaANJian,WANGMing“,WANGLi—xia,YANGJing。.XIAMao—hua。(1.BeiiingAgriculturalCollege,Beiiing102206;
3、2.ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100094;BeijingZOO,Beijing100044)Abstract:ThemRNAdifferentialdisplayisanewtechniquetoclonegenesofdifferentialexpressingofthediversityorganism.Thetechniqueiswidelyusedinthediversityorganismonthedevelopmentcelldivi—sion,differentiation,metabolismand
4、theresponsetothepathogen.Themechanism,themethod,thede—velopmentandimprovementoftheapplicationofthetechniquearealsoreviewedandprospectedinthepa—per.TheapplicationofthetechniqueinCoccidiandrug-resistanceisintroduced.Keywords:mRNAdifferentialdisplayPCR;Coccidia;drug—resistance生物的性狀和生物對
5、各種生物、理化及致病因不需要純化的mRNA,操作簡便、快速、靈敏等優(yōu)子的應(yīng)答,本質(zhì)上都是基因在時間上或空間上選擇點E4-7],故已被許多生命科學(xué)實驗室作為一種重要性表達(dá),即基因的差異表達(dá)的結(jié)果,因而,獲取差異工具,應(yīng)用于體內(nèi)和體外差異表達(dá)基因的篩選,研究表達(dá)的基因信息,將有助于了解生物的生理變化和基因功能【8]?,F(xiàn)將mRNA差異顯示PCR技術(shù)原病理改變的分子機(jī)制n]。研究基因差異表達(dá)主要技理、改進(jìn)和提高及在球蟲抗藥性研究中的應(yīng)用作簡術(shù)有:消減文庫篩選、差異雜交、代表性差異分析、基要綜述。因表達(dá)序列分析、電子消減技術(shù)[2和mRNA差異顯1mRNA差異顯示PCR技
6、術(shù)的主要示PCR技術(shù)等(mRNADifferentialDisplayPCR,簡稱DD-PCRE。)。原理迄今為止,上面的幾種方法已成功地用于基因在生命過程的某一時期,生物細(xì)胞轉(zhuǎn)錄和表達(dá)差異表達(dá)的研究。尤其是mRNA差異顯示PCR技的基因只有很少一部分,而且在不同的發(fā)育階段、不術(shù),雖然發(fā)明只有短短十幾年,已經(jīng)取得了令人矚目同的生理狀態(tài)和不同類型細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)錄和表達(dá)也的科研成果,原因是它具備需要總RNA的量極少,不盡相同,因此,研究mRNA的差異,相對于研究收稿日期2004—14—10;修訂日期:200501—15基金項目國家科技攻關(guān)計劃項目(項目編號:2002
7、BA514A一17—01),北京市自然科學(xué)基金資助項目(項目編號:6032008),北京市委組織部優(yōu)秀人才資助項目作者簡介安健,男,1968年出生,副教授,研究方向為畜禽疫病防治及分子生物學(xué);*通訊作者維普資訊http://www.cqvip.com2005年第2期安健等:mRNA差異顯示PCR的研究進(jìn)展65DNA差異,排除了內(nèi)含子的影響,使研究更接近于2.1.4操作簡單快捷差異顯示PCR技術(shù)操作簡生命活動的實質(zhì)。mRNA差異顯示PCR技術(shù)是根單快捷,從RNA的純化,差異顯示PCR、差異電泳、據(jù)真核生物細(xì)胞中絕大多數(shù)mRNA均帶有3polyA差異帶分離純化,差
8、異鑒定、陽性結(jié)果的序列分析,尾的結(jié)構(gòu)特