分離篩選具有抑菌活性的海洋放線菌

分離篩選具有抑菌活性的海洋放線菌

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1、分離篩選具有抑菌活性的海洋放線菌摘要目的:1從海洋環(huán)境中分離篩選具有抑菌活性的海洋放線菌,進(jìn)行生理生化和16SrDNA分析,從而鑒定篩選菌株的種屬;2初步探究影響篩選菌株發(fā)酵液抑菌活性的因素,優(yōu)化菌株的發(fā)酵條件。材料和方法:l以從青島沿海采集的海泥為樣本,進(jìn)行倍比梯度稀釋通過高氏一號培養(yǎng)平板(重鉻酸鉀濃度50ug/mL)分離放線菌菌落。以金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等為指示病原菌,采用圓紙片法對各發(fā)酵液上清的抑菌、活J眭進(jìn)行初步篩查。2對所篩選具有抑菌活性的菌株形態(tài)學(xué)觀察,生理生化鑒定,16SrDNA分析,并制作系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹。3控制發(fā)酵溫度不變,研究發(fā)酵時間對發(fā)酵液上清抑菌活性的影響;控制發(fā)酵時

2、間不變,研究發(fā)酵溫度對發(fā)酵液上清抑菌活性的影響。結(jié)果:1在高氏一號固體培養(yǎng)基上分離得到海洋放線菌34株,放線菌Fl發(fā)酵液上清對金黃色葡萄球菌具有較強抑制作用,而對大腸桿菌抑制作用較弱。2菌株Fl革蘭氏染色為紫色,在多種培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好,生理生化鑒定與鏈霉菌屬相似,16SrDNA序列比對表明該菌株與StreptomycestanashiensisNR043369相似度99%。3發(fā)酵時間小于96h時,菌株Fl發(fā)酵液上清對金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抑菌圈逐漸變大,發(fā)酵大于96h后,發(fā)酵液上清產(chǎn)生抑菌圈大小變化不明顯。發(fā)酵溫度對抑菌圈大小變化影u向不明顯。結(jié)論:l菌株F1是海洋來源的放線菌,其發(fā)酵液上清對

3、金黃色葡萄球菌具有較強抑制作,L

4、j,而對大腸桿菌抑制作用較弱。2通過生理生化鑒定和16SrDNA分析,將F1鑒定為鏈霉菌屬。3菌株F1產(chǎn)生抑菌活性物質(zhì)的最適發(fā)酵條件為30。C條件下發(fā)酵96h。碩士研究生伍國梁(病原生物學(xué))指導(dǎo)教師王斌教授關(guān)鍵詞:海洋放線菌;抑菌活性;16SrDNA;系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹IsolationandscreeningofmarineActinomycesproducingantibacterialobjective:substancesAbstract1ToisolateandscreenantibacterialActinomycesfromtheocean,anal

5、yzeitsbiochemicalpropertiesand16SrDNAandidentifythestrain’Sspecies.2Tomakeapriliminaryinvestigationonthefactorsinfluencingantibacterialactivityoffermentationsupernatant,optimizethefermentationconditions.Materialsandmethods:1SeamudscollectedfromtheQingdaocoastassamples,aftergradientdilution,theturbid

6、solutionswerecoatedtotheGause’Scultureplate(potassiumdichromateconcentration50pg/mL、toisolatemarineActinomycete.StaphylococcusaureusandEscherichiacoliastheindicatingpathogenicbateria,wemadeapreliminaryinvestigationontheantibacterialactivityoffermentationsupernanantsbythecircularslipmethod.2TotheActi

7、nomyceteswithantibacterialactivity,morphologicalobservation,physiologicalandbiochemicalpropertiesidentification,16SrDNAanalysisandphylogenictreewereconducted.3Keepingfermentationtempretureconstant,studytheinfluencefermentationtimeontheantibacterialactivity.;Keepingfermentationtimeconstant,studythein

8、fluencefermentmiontempretureontheantibacterialactivity.Resuits:134strainsofactinomyceteswereisolatedbytheuseofGause’Smedium,ThefermentationsupernatantfromF1wasfoundtohaveremarkableantibacterialactivit

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