花鱸簡化基因組和轉(zhuǎn)錄組測序及基因表達(dá)分析.pdf

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1、上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼:10264研究生學(xué)號:M150150321上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文花鱸簡化基因組和轉(zhuǎn)錄組測序題目:及基因表達(dá)分析Genomesurveyandtranscriptome英文題目:sequencingofLateolabraxmaculatusandgenesexpressionanalysis專業(yè):漁業(yè)研究方向:分子生物學(xué)姓名:王家奇指導(dǎo)教師:陳曉武教授二O一八年六月上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:我恪守學(xué)術(shù)道德,崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果

2、。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫,我對所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé),并完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:日期:年月日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□,在年解密后適用本版權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密?學(xué)

3、位論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:日期:年月日日期:年月日上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會成員名單姓名工作單位職稱備注中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海馬凌波研究員水產(chǎn)研究所顏標(biāo)復(fù)旦大學(xué)研究員崔映宇同濟(jì)大學(xué)副教授答辯地點水產(chǎn)與生命學(xué)院C217上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文花鱸簡化基因組和轉(zhuǎn)錄組測序及相關(guān)基因分析摘要花鱸(Lateolabraxmaculatus)廣泛分布于中國沿海,是我國重要的海水養(yǎng)殖品種。由于長期過度捕撈,花鱸野生資源銳減,種質(zhì)退化。為更深入了解花鱸的遺傳信息,我們利用高通量測序和denovo組裝,獲得了64.63Gb的基因組clean數(shù)據(jù),

4、預(yù)測基因組大小534.46Mb,GC含量40.95%,經(jīng)過拼接和蛋白編碼基因預(yù)測得到67,748個unigene,其中有60,218個unigene(88.89%)與Nr庫中的已知序列同源。此外,分別有50,860和10,260個unigene注釋到GO庫和COG庫。根據(jù)基因組測序結(jié)果獲得311,393個微衛(wèi)星(SSR)位點,其中單核苷酸重復(fù)(29,585,9.50%),二核苷酸重復(fù)(144,548,46.42%)和三核苷酸重復(fù)(36,254,11.64%)共占到SSRs的67.65%,其中重復(fù)單元AC/GT(36.76%)在二核苷酸重復(fù)序列中含量最豐富。我們用3

5、0條花鱸樣本進(jìn)行篩選獲得8個具有多態(tài)性的微衛(wèi)星位點,所有位點顯示4-8個等位基因。平均觀測雜合度和平均預(yù)期雜合度分別是0.64和0.58?;|簡化基因組信息為研究花鱸生長、繁殖和遺傳學(xué)研究提供了數(shù)據(jù)支持。為獲得花鱸轉(zhuǎn)錄組信息,發(fā)掘組織特異性功能基因,本實驗同時對花鱸的腦、鰓、胃、肝、脾、精巢和卵巢轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測序。結(jié)果獲得54,031個unigene,有12,256條unigene包含SSR序列,從中鑒定出16,644個SSR,其中二核苷酸重復(fù)單元AC/GT為優(yōu)勢重復(fù)基元,占總位點的16.03%。利用Blast2GO對unigene進(jìn)行注釋,共得到32611(60.

6、36%)條注釋基因,根據(jù)GO功能分類分為生物過程、細(xì)胞組分和分子功能3大類103亞類?!癿olecularfunction”亞類的unigene數(shù)量最多。所有unigene經(jīng)KEGG代謝通路分析可分為6大類(Metabolism,Geneticinformationprocessing,Environmentalinformationprocessing,Cellularprocesses,Organismalsystems,Humandiseases)39小類419個代謝通路,其中“Signaltransduction”(25個通路)是最大的通路分類,“Infe

7、ctiousdiseases”(24個通路)次之。分析七個轉(zhuǎn)錄組RPKM發(fā)現(xiàn),腦特異分泌HPG,HPA,HPGH軸所需激素;鰓在角蛋白,膠質(zhì)蛋白和上皮細(xì)胞黏附分子特異表達(dá);胃和脾分別高表達(dá)各類消化酶和免疫球蛋白類似物;肝的載脂蛋白,抗凍蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白特異高表達(dá);性腺則富含vasa,piwi,性激素受體和調(diào)控細(xì)胞分裂生長的周期蛋白類似物。通過對花鱸轉(zhuǎn)錄組測序,為花鱸功能基因克隆及基因組學(xué)研究提供了基礎(chǔ)。I上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文堿性磷酸酶(Alkalinephosphatase,Alp)具有脫磷酸的生理作用并在堿性環(huán)境下發(fā)揮最佳功能,這種酶存在于多種生物體,包括原核

8、生物和真核

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