絞股藍(lán)和黃芪中黃酮類活性物質(zhì)的提取、純化及體外活性研究

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1、分類號密級UDC單位代碼10435碩士專業(yè)學(xué)位論文絞股藍(lán)和黃芪中黃酮類活性物質(zhì)的提取、純化及體外活性研究StudyonExtraction,PurificationandInVitroActivityofFlavonoidsfromGynostemmapentaphyllumandAstragalusMembranaceus研究生姓名潘從蕾指導(dǎo)教師呂海濤教授學(xué)位種類農(nóng)業(yè)推廣碩士專業(yè)領(lǐng)域植物保護(hù)中國·青島2018年6月QingdaoAgriculturalUniversityTheThesisofProfessionalMasterStudyonExtraction,Purifica

2、tionandInVitroActivityofFlavonoidsfromGynostemmapentaphyllumandAstragalusMembranaceusGraduatewithProfessionalMasterDegree:PanCongleiMentor:Prof.LüHai-taoTypeofProfessionalDegree:MasterofAgriculturalExtensionAcademicfield:PlantProtectionQingdao.ChinaJune,2018獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的

3、研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得青島農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名:時間:年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解青島農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生

4、簽名:時間:年月日導(dǎo)師簽名:時間:年月日青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文摘要絞股藍(lán)和黃芪中黃酮類活性物質(zhì)的提取、純化及體外活性研究摘要槲皮素、商陸素和山奈素是絞股藍(lán)中的主要活性物質(zhì),毛蕊異黃酮和芒柄花素是黃芪中的主要活性物質(zhì),它們都是黃酮類化合物,具有較多的藥理作用。本文主要由六部分組成。第一部分:絞股藍(lán)中槲皮素、商陸素和山奈素的提取工藝優(yōu)化建立高效液相色譜檢測絞股藍(lán)中三種物質(zhì)含量的方法,采用加熱回流法,以甲醇為溶劑,利用鹽酸把蘆丁、商陸苷、和山奈苷分別水解為槲皮素、商陸素和山奈素。通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化提取條件,得到最佳提取條件為甲醇濃度100%,鹽酸濃度1.5mol/L,料液

5、比1:30(g/mL),提取1.5h,提取1次。槲皮素、商陸素和山奈素的提取量分別為14.78、0.074和0.051mg/g。第二部:槲皮素、商陸素和山奈素的純化及結(jié)構(gòu)確認(rèn)利用高速逆流色譜法分離純化絞股藍(lán)粗提物中的槲皮素、商陸素和山奈素。儀器條件為:轉(zhuǎn)速850r/min,流速2mL/min,檢測波長280nm,柱溫20℃。純化槲皮素的雙相溶劑體系為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(4:5:4:5,v/v),從164.7mg粗品中獲得90.6mg槲皮素(純度為99.23%,回收率為92.74%)。純化商陸素和山奈素的雙相溶劑體系為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(8:2:5:5,v/v),從5

6、0mg粗品中獲得0.4mg商陸素(純度為95.46%,回收率為75.32%)和1.1mg山奈素(純度為98.78%,回收率為83.59%)。純化后的提取物經(jīng)HPLC、UV、熔點(diǎn)測定和紅外光譜確認(rèn)結(jié)構(gòu)。第三部:槲皮素、商陸素和山奈素純品的體外活性研究研究槲皮素、商陸素和山奈素純品對DPPH自由基和羥自由基的清除作用。結(jié)果表明槲皮素對DPPH自由基和羥自由基的清除能力最強(qiáng),EC50為6.03和6.27μg/mg,商陸素和山奈素的清除效果稍差,EC50分別為11.38和28.25μg/mg與14.45和24.45μg/mg。用96孔板法研究三種物質(zhì)對金黃色葡萄球菌、短小芽孢桿菌、大腸桿菌

7、三種細(xì)菌及蘋果輪紋、棉花枯萎、柑橘炭疽和小麥全蝕四種真菌的抑菌作用,結(jié)果表明,在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi),這三種物質(zhì)抑菌效果不明顯。第四部:黃芪中毛蕊異黃酮和芒柄花素的提取工藝建立高效液相色譜檢測黃芪中毛蕊異黃酮和芒柄花素含量的方法,采用加熱回流法以乙醇為溶劑,利用鹽酸把毛蕊異黃酮苷和芒柄花苷分別水解為毛蕊異黃酮和芒柄花素。1青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文摘要通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn),得到最佳提取條件為:乙醇濃度100%,鹽酸濃度2.5mol/L,料液比1:40(g/mL),提取

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