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《炎性因子對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞活化及sPLA2-ⅡA表達(dá)的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、單位代碼10475學(xué)號(hào)104753140957分類(lèi)號(hào)R74碩士學(xué)位論文炎性因子對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞活化及sPLA2-ⅡA表達(dá)的影響學(xué)科、專(zhuān)業(yè)：神經(jīng)病學(xué)研究方向：神經(jīng)炎癥申請(qǐng)學(xué)位類(lèi)別：醫(yī)學(xué)碩士申請(qǐng)人：李雪粉指導(dǎo)教師：陳文武教授二〇一七年五月I萬(wàn)方數(shù)據(jù)II萬(wàn)方數(shù)據(jù)EffectsofinflammatorycytokinesontheactivationofastrocytesandtheexpressionofsPLA2-ⅡAADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequir
2、ementsfortheDegreeofMasterofMedicineByLiXuefenSupervisor:Prof.ChenWenwuMay,2017III萬(wàn)方數(shù)據(jù)IV萬(wàn)方數(shù)據(jù)關(guān)于學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明和學(xué)術(shù)誠(chéng)信承諾本人向河南大學(xué)提出碩士學(xué)位申請(qǐng)。本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立完成的，對(duì)所研究的課題有新的見(jiàn)解。據(jù)我所知，除文中特別加以說(shuō)明、標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包括其他人為獲得任何教育、科研機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同事對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。在此本人鄭重承諾：
3、所呈交的學(xué)位論文不存在舞弊作偽行為，文責(zé)自負(fù)。學(xué)位申請(qǐng)人（學(xué)位論文作者）簽名：2017年月日關(guān)于學(xué)位論文著作權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人經(jīng)河南大學(xué)審核批準(zhǔn)授予碩士學(xué)位。作為學(xué)位論文的作者，本人完全了解并同意河南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的要求，即河南大學(xué)有權(quán)向國(guó)家圖書(shū)館、科研信息機(jī)構(gòu)、數(shù)據(jù)收集機(jī)構(gòu)和本校圖書(shū)館等提供學(xué)位論文（紙質(zhì)文本和電子文本）以供公眾檢索、查閱。本人授權(quán)河南大學(xué)出于宣揚(yáng)、展覽學(xué)校學(xué)術(shù)發(fā)展和進(jìn)行學(xué)術(shù)交流等目的，可以采取影印、縮印、掃描和拷貝等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文（紙質(zhì)文本和電子文本）。（涉及保密內(nèi)容的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū)）學(xué)位獲得者（學(xué)位論文作者）簽名：2017年月日學(xué)位論
4、文指導(dǎo)教師簽名：2017年月日I萬(wàn)方數(shù)據(jù)II萬(wàn)方數(shù)據(jù)摘要背景與目的：在各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如顱腦損傷、腦卒中、癲癇、退行性疾病中，均伴有不同程度的神經(jīng)炎癥反應(yīng)。炎性因子促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展，炎癥反應(yīng)中又會(huì)產(chǎn)生炎性因子。星形膠質(zhì)細(xì)胞是腦內(nèi)數(shù)量最多的一大類(lèi)細(xì)胞群體，在神經(jīng)炎癥反應(yīng)中星形膠質(zhì)細(xì)胞活化并起著重要作用。分泌型磷脂酶A2屬于磷脂水解酶家族中的一類(lèi)，它與炎癥密切相關(guān)。本研究旨在探索大鼠大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的分離、純化和體外培養(yǎng)的方法，并研究在炎性因子作用下，星形膠質(zhì)細(xì)胞的活性變化以及其產(chǎn)生的sPLA2-ⅡA表達(dá)量的變化，進(jìn)一步探討其可能存在的機(jī)制。方法：在體外原代培養(yǎng)大鼠大腦皮質(zhì)星形膠
5、質(zhì)細(xì)胞的基礎(chǔ)上，取第4代培養(yǎng)的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組分別為：10ng/mlIL-1β組，100ng/mlIL-1β組，10ng/mlTNF-α組，100ng/mlTNF-α組，10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α組，100ng/mlIL-1β加100ng/mlTNF-α組。24小時(shí)后用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力。再選取10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α組繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR和ELISA，檢測(cè)IKKα、IKKβ、NF-?B、p65和sPLA2-ⅡA等的表達(dá)量變化。結(jié)果：通過(guò)分離、純化獲得了形態(tài)典型的大鼠大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞。細(xì)胞形
6、態(tài)不規(guī)則，突起較多較長(zhǎng)，呈放射狀。GFAP免疫染色顯示純度達(dá)95%以上。實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的活性均高于對(duì)照組。其中，100ng/mlIL-1β組、100ng/mlTNF-α組、10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α組和100ng/mlIL-1β加100ng/mlTNF-α組的細(xì)胞活性明顯高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05,P<0.001,P<0.001,P<0.001）。10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α組與對(duì)照組相比，sPLA2-ⅡA在mRNA和蛋白水平表達(dá)量顯著升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。NF-?B在mRNA和蛋白水平表達(dá)量在10ng/mlIL-1β加10
7、ng/mlTNF-α組明顯高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與對(duì)照組相比，10ng/mlIL-1β加10ng/mlTNF-α組的IKKα、IKKβ和p65的表達(dá)量均增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05，P<0.05，P<0.05）。結(jié)論：當(dāng)受到炎性因子刺激時(shí)，星形膠質(zhì)細(xì)胞活化同時(shí)sPLA2-ⅡA表達(dá)增高，很可能是通過(guò)IKKα/IKKβ-NF-?B-sPLA2-ⅡA途徑產(chǎn)生的。關(guān)鍵詞：星形膠質(zhì)細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)
