盾殼霉產(chǎn)孢和生長相關(guān)基因的克隆及功能驗(yàn)證

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1、分類號華中農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文密級盾殼霉產(chǎn)孢和生長相關(guān)基因的克隆及功能驗(yàn)證IDENTIFITIoNoFCONIDIATIoNANDGRoWTHASSOCIATEDGEN鼉s1淑CoNloTHYRIUMMINITANS博士研究生:魏瑋指導(dǎo)教師:姜道宏教授學(xué)號:2009301010017指導(dǎo)小組:姜道宏教授李國慶教授黃俊斌教授付艷蘋副教授程家森副教授專業(yè):植物病理學(xué)研究方向:分子植物病理學(xué)獲得學(xué)位名稱:農(nóng)學(xué)博士獲得學(xué)位時(shí)間:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院二O一三年月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)書學(xué)位論文石如需保密,解密時(shí)間年月日

2、是否保密IJ‘獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料,指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明,并表示了謝意。研究生簽名:鋤’時(shí)間:矽侈年多月占日學(xué)位論文使用授權(quán)書本人完全了解華中農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)生必須按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本;學(xué)校有權(quán)保存提交論

3、文的印刷版和電子版,并提供目錄檢索和閱覽服務(wù),可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人同意華中農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,為存在館際合作關(guān)系的兄弟高校用戶提供文獻(xiàn)傳遞和交換服務(wù),同時(shí)本人保留在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)力。注:保密學(xué)位論文(印涉及技術(shù)秘密、商業(yè)秘密或申請專利等潛在需要提交保密的論文)在解密后適用于本授權(quán)書?!疘/,學(xué)位論文作者鮐穆繹.糊鮐互重死簽名日期:如侈年易月6日簽名日期:知,弓年‘月<日盾殼霉產(chǎn)孢和生長相關(guān)基因的克隆及功能驗(yàn)證目錄摘要??????????????

4、???????????????~iABSTRACT?????????????????????????????????????iii縮略詞表?????????????????????????????vi第一章前言????????????????????????????11.1植物病原真菌核盤菌的危害與菌核病的防治??????????。11.1.1核盤菌及其危害????????????????????11.1.2核盤菌的致病與侵染機(jī)理????????????????11.1.3作物菌核病的防治???????????????????21.2生

5、防真菌盾殼霉研究進(jìn)展??????????????????..31.2.1盾殼霉的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)特性研究????????????31.2.2盾殼霉的生防機(jī)制研究?????????????????41.2.3盾殼霉的生防潛力及生產(chǎn)應(yīng)用研究????????????61.3真菌的分生孢子發(fā)育研究進(jìn)展????????????????..71.3.1G蛋白相關(guān)信號途徑參與調(diào)控真菌分生孢子的形成?????81.3.2MAPK信號途徑參與調(diào)控真菌分生孢子的形成???????81.3.3cAMP信號相關(guān)途徑參與調(diào)控真菌分生孢子的形成?????.91.3.

6、4其他參與調(diào)控真菌分生孢子形成的信號途徑???????.101.3.5盾殼霉分生孢子發(fā)育的研究進(jìn)展????????????.111.4蛋白質(zhì)互作的研究?????????????????????121.4.1酵母雙雜交?????????????????????一121.4.2雙分子熒光互補(bǔ)???????????????????..131.4.3免疫共沉淀?????????????????????.131.5論文的研究目的和意義???????????????????l3第二章構(gòu)建盾殼霉T—DNA插入體庫?????????????????l5

7、2.1材料與方法????????????????????????152.1.1盾殼霉菌株和培養(yǎng)條件????????????????.152.1.2菌株和載體?????????????????????.152.1.3農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化盾殼霉????????????????.162.1.4DNA的抽提和Southern雜交??????????????172.1.5反向PCR克隆T—DNA插入破壞的基因?????????.172.2結(jié)果與分析????????????????????????182.2.1表型異常突變體的篩選????????????

8、????.182.2.2Southern雜交驗(yàn)證T—DNA插入的拷貝數(shù)?????????18華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2013屆博士研究生學(xué)位論文2.2.3反向PCR克隆T.DNA插入側(cè)端的核苷酸序列??????.192

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