胡椒有效成分（dmf）對(duì)人卵巢癌干細(xì)胞樣細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移及snail蛋白表達(dá)的影響

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1、分類號(hào)：學(xué)校代碼：學(xué)號(hào)：密級(jí)：從湖南中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文胡椒有效成分對(duì)人卵巢癌干細(xì)胞樣細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移及蛋白表達(dá)的影響學(xué)科專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合臨床研究方向：婦科腫瘤疾病的研究作者姓名：張青導(dǎo)師姓名、職稱丁青教授學(xué)位類型：專業(yè)學(xué)位中國(guó)湖南長(zhǎng)沙二零一五年五月原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的研究成果。除文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文中不包含任何他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得湖南中醫(yī)藥大學(xué)或其他單位學(xué)位、證書而使用過(guò)的材料。與我共同對(duì)本研宄所作過(guò)重要貢獻(xiàn)的單位及個(gè)人均已在論文中作了明確說(shuō)明并致謝。作者簽名年：月關(guān)于學(xué)位論文使用

2、授權(quán)說(shuō)明本人完全了解湖南中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)收集、保留及使用學(xué)位論文的規(guī)定，艮口：學(xué)?？梢圆捎脧?fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文；可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？筛鶕?jù)國(guó)家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文或通過(guò)國(guó)內(nèi)有關(guān)權(quán)威機(jī)構(gòu)收錄論文全文，向社會(huì)提供信息服務(wù)。保密論文在解密后守此規(guī)定）年月片胡椒有效成分對(duì)人卵巢癌干細(xì)胞樣細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移及蛋白表達(dá)的影響中文摘要目的：研究中藥胡椒有效成分二甲氧基黃酮（，，對(duì)人卵巢癌細(xì)胞系干細(xì)胞樣細(xì)胞（，侵襲、轉(zhuǎn)移及蛋白表達(dá)的影響，初步探討中藥胡椒有效成分（是否能夠抑制侵襲、轉(zhuǎn)移及下調(diào)蛋白表達(dá)，并觀察發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移是否與蛋白的調(diào)控相關(guān)，

3、以期為卵巢癌的治療提供一種新思路。方法：體外培養(yǎng)人卵巢癌細(xì)胞系，采用干細(xì)胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)法富集并擴(kuò)增得到卵巢癌球形成細(xì)胞，并鑒定作為，試驗(yàn)檢測(cè)卵巢癌細(xì)胞系細(xì)胞與的侵襲、轉(zhuǎn)移能力，以及胡椒有效成分（對(duì)其侵襲、轉(zhuǎn)移的作用；分析檢測(cè)胡椒有效成分（對(duì)蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果：人卵巢癌細(xì)胞系在干細(xì)胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)中，成球生長(zhǎng)，形成卵巢癌球。試驗(yàn)表明具有高侵襲、高轉(zhuǎn)移性。以劑量依賴式顯著抑制細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移率。以劑量依賴式下調(diào)蛋白表達(dá)。結(jié)論：采用千細(xì)胞培養(yǎng)基懸浮法富集、擴(kuò)增得到的人卵巢癌細(xì)胞系卵巢癌球形成細(xì)胞具有高侵襲、轉(zhuǎn)移的特性。具有抑制高侵襲、高轉(zhuǎn)移的能力，呈濃度依賴性。抑制侵襲、轉(zhuǎn)移可能與

4、其下調(diào)腫瘤干細(xì)胞信號(hào)分子蛋白表達(dá)相關(guān)。抑制侵襲、轉(zhuǎn)移特性，下調(diào)蛋白表達(dá)，可能與其針對(duì)卵巢癌“虛、寒、痰、瘀、毒的發(fā)病根本，發(fā)揮溫陽(yáng)散寒、化痰祛瘀解毒功效，達(dá)到抗卵巢癌效應(yīng)的途徑之一。關(guān)鍵詞：胡椒有效成分，二甲氧基黃酮；卵巢癌干細(xì)胞樣細(xì)胞；侵襲轉(zhuǎn)移；蛋白EffectofPipernigrum'sactiveconstituent(DMF)oninvasionandmetastasisandexpressionofSnailinOCSLCsderivedfromovariancancerSKOV3celllineObstractObjective:Toinvestigatetheeffect

5、ofthepipernigrum'sactiveconstituent557-dimethoxyflavone(DMF)oninvasion、，，，，withthedose—、、；；目錄中文摘要英文摘要引言材料和方法實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞系藥品與試劑儀器設(shè)備主要試劑配制實(shí)驗(yàn)方法細(xì)胞培養(yǎng)及傳代細(xì)胞凍存細(xì)胞復(fù)蘇干細(xì)胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)富集卵巢癌球形成細(xì)胞的傳代藥物處理細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析設(shè)計(jì)路線圖結(jié)果千細(xì)胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)獲得人卵巢癌細(xì)胞系卵巢癌球形成細(xì)胞人卵巢癌細(xì)胞系細(xì)胞與的體外轉(zhuǎn)移能力比較人卵巢癌細(xì)胞系細(xì)胞與的體外侵襲能力比較胡椒有效成分（對(duì)源自人卵巢癌細(xì)胞系卵巢癌球形成細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的

6、影響胡椒有效成分（對(duì)源自人卵巢癌細(xì)胞系卵巢癌球形成細(xì)胞侵襲能力的影響胡椒有效成分（抑制的蛋白表達(dá)5it176mit19S[m20參考文獻(xiàn)：附錄英文縮略詞索引附錄綜述研究生期間發(fā)表的論文：1引言卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，致死率位居?jì)D科腫瘤之首。的患者發(fā)現(xiàn)卵巢癌時(shí)已屬晚期⑴。而且僅有的卵巢癌在早期（期）能診斷出來(lái)。早期確診率偏低與卵巢的解剖位置較深且繁雜、發(fā)病較隱匿、又缺少特異性早期檢測(cè)手段相關(guān)。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，腫瘤干細(xì)胞“（已經(jīng)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)以及皮膚系統(tǒng)等常見的惡性腫瘤中被成功分離出來(lái)。且證實(shí)這些均具備極強(qiáng)的自我更新能力、高侵襲轉(zhuǎn)移及特異性高表達(dá)某些蛋

7、白等特性。尤其是高侵襲、轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致腫瘤耐藥、復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的主要原因，目前這些問(wèn)題仍未得到解決，其機(jī)制尚不明了，常規(guī)的西醫(yī)放化療雖有很好的抗腫瘤作用，但副作用較大，且癌癥晚期患者耐受力差、免疫功能低下，容易發(fā)生感染致死。所以探求一種低毒、高效的向卵巢癌干細(xì)胞的藥物是目前根治卵巢癌的迫切愿望。中醫(yī)中藥在增效減毒方面有較強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)。藥理學(xué)研宄顯示許多中藥有效成分如：金雀異黃素、人參阜苗等可誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡、抑制腫瘤細(xì)胞增殖，且具有在移植腫瘤血管生