褐盤二孢兩?；颓秩具^程中黑楊基因表達及內(nèi)生真菌關(guān)系

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1、分類號S763密級______________________公開UDC_________________________________學(xué)位論文褐盤二孢兩專化型侵染過程中黑楊基因表達及內(nèi)生真菌關(guān)系SomeGeneExpressionsofaAigeirosHostResponsivetoMarssoninabrunneaTwoFormaSpecialisInfectionandEndophyticFungiinLeaves孫曉明指導(dǎo)教師姓名嚴(yán)東輝副研究員申請學(xué)位級別碩士專業(yè)學(xué)位專業(yè)名稱森林保護學(xué)研究方向森林病理學(xué)論文提交日期2015年5月論文答辯日期201

2、5年6月學(xué)位授予日期2015年7月答辯委員會主席評閱人北京·中國林業(yè)科學(xué)研究院學(xué)位論文褐盤二孢兩?；颓秩具^程中黑楊基因表達及內(nèi)生真菌關(guān)系學(xué)位論文作者孫曉明指導(dǎo)教師姓名嚴(yán)東輝副研究員申請學(xué)位級別碩士專業(yè)名稱森林保護學(xué)研究方向森林病理學(xué)論文答辯日期2015年6月中國·北京DissertationfortheDegreeSomeGeneExpressionsofaAigeirosHostResponsivetoMarssoninabrunneaTwoFormaSpecialisInfectionandEndophyticFungiinLeavesCandidat

3、e:SunXiao-mingSupervisor:YanDong-huiAcademicDegreeAppliedfor:MasterofProfessionalDegreeSpeciality:ForestprotectionDateofDefence:June2015Degree-conferring-institution:ChineseAcademyofForestry獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研巧工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加Ｗ標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究

4、成果，也不包含為獲得本研究生培養(yǎng)單位或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料一。與我同工作的同志對本研巧所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。。學(xué)位論文作者簽名如日期：牟以日令學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解中國林業(yè)科學(xué)研究院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，中國林業(yè)科學(xué)研究院有權(quán)保留并向國家有關(guān)部口或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)中國林業(yè)科學(xué)研巧院可Ｗ將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可＾采用影印、縮印或掃描等復(fù)制［手段保存、匯編學(xué)位論文。（保密的學(xué)位

5、論文在解密后適用本授權(quán)書）八？學(xué)位論文作者簽名：知導(dǎo)師簽名：３。卑備月曰方＊護年曰＜月１方４＞？學(xué)位論文作者畢業(yè)聯(lián)系方式摘要楊生褐盤二孢菌（Marssoninabrunnea）在楊屬的不同寄主上存在兩個?；?，從形態(tài)特征和現(xiàn)有的一些核酸分子序列標(biāo)記上不易區(qū)分。研究病原菌在侵染寄主過程中對寄主的作用機理，分析兩?；途甑牟町愋?，同時對楊樹葉片上的內(nèi)生真菌種類進行調(diào)查，分析其與楊樹黑斑病的關(guān)系。應(yīng)用新的技術(shù)手段對病原菌的鑒定以及其與寄主的互作關(guān)系研究提供了新方向。本研究采集病原菌材料樣本及健康葉片材料，組織分離得到病原菌和內(nèi)生菌菌株，總

6、DNA為模板進行PCR擴增ITS序列。聯(lián)合盤二孢屬核糖體轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹和ITS2的二級結(jié)構(gòu)，來區(qū)分這兩個?；?。采用離體葉片接種病原菌孢子，篩選出致病性強的?；途?。再將篩選出的菌株接種到黑楊盆栽苗葉片上，利用熒光顯微鏡觀察菌株孢子侵染葉片的過程，選出孢子侵染葉片的時間節(jié)點，應(yīng)用Real-timePCR檢測分析在這幾個時間節(jié)點寄主的相關(guān)基因表達情況。結(jié)果表明：（1）分離得到的內(nèi)生真菌主要包括37個屬，257株菌株，其中優(yōu)勢菌群為鏈格孢屬（Alternaria）、假尾孢菌屬（Pseudocercospora）、葡萄座腔菌屬（Botr

7、yosphaeria）、暗球腔菌屬（Phaeosphaeria）。同時篩選出兩株菌株對病原菌生長有抑制作用。（2）在寄主葉片上挑取的病原菌孢子形態(tài)比較典型，而在培養(yǎng)基上培養(yǎng)的孢子形態(tài)差異較大，我們不能依據(jù)傳統(tǒng)的芽管萌發(fā)數(shù)有效區(qū)分兩個?；汀ＨN構(gòu)建的ITS序列系統(tǒng)發(fā)育樹的方法只能說明盤二孢屬3個種的種間關(guān)系，卻無法將參考ITS序列準(zhǔn)確定位到?；椭?。在ITS2二級結(jié)構(gòu)預(yù)測模型中，通過比較盤二孢屬ITS2二級結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)：M.rosae和M.coronariae種內(nèi)的菌株以及包括參考ITS序列在內(nèi)的M.brunnea同一?；偷腎TS2二級結(jié)構(gòu)模型完全相同，但在這

8、三個種之間及M.brunnea兩專化型之間，ITS2