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1、第34卷第3期林業(yè)科學(xué)Vol34,No31998年5月SCIENTIASILVAESINICAEMay,1998*我國楊生褐盤二孢菌菌株比較韓正敏李傳道黃敏仁(南京林業(yè)大學(xué)森林資源與環(huán)境學(xué)院南京210037)摘要從我國江蘇、河南、山東、陜西、北京和吉林6個省(市)的不同楊樹上收集了42個楊生褐盤二孢菌(Marssoninabrunnea)標(biāo)本,比較和分析了它們的分生孢子大小和形態(tài)、培養(yǎng)性狀、致病性方面的差異;并觀察了它們之間的菌絲融合情況。42個菌株間的分生孢子平均長度、平均寬度和分隔位置存在差異不顯著。菌株個體內(nèi)單個分生孢子變異幅度很大。
2、分離自白楊派楊樹上的菌株孢子萌發(fā)時均產(chǎn)生一個芽管;在PDA培養(yǎng)基上菌落生長速度較快(25d菌落直徑在1cm以上),菌落顏色為深褐色,并產(chǎn)生醬紅色的孢子堆。來自黑楊派和青楊派上的菌株,孢子萌發(fā)時產(chǎn)生多個芽管;在PDA培養(yǎng)基上菌落生長速度較慢(25d菌落直徑不超過1cm),顏色較淺,產(chǎn)生黃綠色孢子堆。人工接種測定各個菌株對不同楊樹的致病力,發(fā)現(xiàn)來自白楊派的5個菌株對毛白楊有較強的致病力,但對青楊派和黑楊派樹種幾乎不致病或致病力很弱。來自黑楊派和青楊派樹種的37個菌株,對黑楊派樹種I-45楊和加楊有較強的致病力;對青楊派樹種青楊和小葉楊,對白楊派的毛白楊具有中等程
3、度的致病力。聚類分析表明,來自白楊派的5個菌株為一個類群,來自黑楊派和青楊派的37個菌株為另一類群。菌株的致病性和菌株的地區(qū)來源也不存在相關(guān)性。菌絲融合結(jié)果表明,來自白楊派的幾個菌株菌絲可以相互融合;來自黑楊派和青楊派的菌株之間菌絲可發(fā)生融合;但來自白楊派的菌株和所有黑楊派、青楊派的菌株之間不能發(fā)生融合。研究結(jié)果進(jìn)一步證明,將我國楊生褐盤二孢菌劃分為單芽管專化型(M.brunneaf.sp.monogermtubi)和多芽管?；?M.brunneaf.sp.multigermtubi)是恰當(dāng)?shù)?。關(guān)鍵詞楊樹,楊生褐盤二孢菌,專化型,菌株楊樹黑斑病是楊樹重要
4、病害之一,發(fā)生范圍相當(dāng)廣泛,幾乎有楊樹栽培的地方都有分布。病害主要為害楊樹葉片和葉柄,有時也為害嫩梢、蒴果和果穗柄。受害楊樹光合效率下降并提早落葉,嚴(yán)重影響樹木生長量。寄生在楊樹上的引起楊樹黑斑病的Marssonina屬真菌曾報道有十幾種,但這些種的分類缺乏統(tǒng)一指標(biāo)。Spiers(1988)研究了歐洲和美洲各地保存的近300個楊樹黑斑病標(biāo)本,根據(jù)分生孢子形態(tài)大小和分隔位置,將它們歸納為[1]4個種兩個?；汀０碨piers分類標(biāo)準(zhǔn),我國的楊樹黑斑病菌主要為楊生褐盤二孢菌[2](Marssoninabrunnea),這個種分布于我國除新疆以外的大多數(shù)楊樹栽培區(qū)
5、。李傳道(1984)曾將華東地區(qū)的楊樹黑斑病菌鑒定為M.populi,并劃分為兩個?；痆3]型。后賀偉和楊旺(1991)按Spiers的標(biāo)準(zhǔn)更改為M.brunnea,仍承認(rèn)兩個?；偷膭漑2]分。兩個專化型的特點為:單芽管?；?M.brunneaf.sp.monogermtubi),分生孢子本文于1997年8月27日收到。*南京林業(yè)大學(xué)畢業(yè)生楊開風(fēng)、李明參加了部分研究工作,深表謝意。60林業(yè)科學(xué)34卷萌發(fā)時產(chǎn)生一個芽管,在自然條件下以侵染白楊派樹種及其雜交種為主。多芽管?；?M.brunneaf.sp.multigermtubi)分生孢子萌發(fā)時產(chǎn)
6、生1~5個(通常2~3)芽管,在自然條件下以侵染黑楊派樹種及其派內(nèi)雜交種和黑楊派同青楊派的雜交種為主,人工接種時[3]也能侵染幾種青楊派樹種和兩種白楊派樹種。由于Marssonina屬真菌在形態(tài)學(xué)和寄生?；苑矫娲嬖谟休^大變異,楊生褐盤二孢菌在我國的地理分布和寄生范圍又相當(dāng)廣泛,可能存在有分化現(xiàn)象。所以有必要對我國各地楊生褐盤二孢菌種內(nèi)群體的多樣性作進(jìn)一步研究。1材料和方法1.1菌株來源42個菌株分別來自于江蘇、山東、河南、陜西、北京和吉林,寄主包括白楊派、黑楊派和青楊派不同楊樹種類和無性系。采集帶有黑斑病病斑的楊樹鮮葉片,經(jīng)組織分離法(01%升汞滅菌
7、3~35min)分離出病菌純培養(yǎng)。菌株來源如表1。1.2分生孢子測量方法從病葉片上直接挑取病菌分生孢子和從生長12~15d的PDA斜面培養(yǎng)基上挑取分生孢子,制成臨時玻片,在顯微鏡下隨機選取50個分生孢子,觀察并精確測量分生孢子的長度、寬度和小細(xì)胞長度。進(jìn)而再計算出分生孢子的長寬比和孢子中間分隔的位置,即小細(xì)胞長度占整個孢子的百分比[分隔位置(%)=(小細(xì)胞長度/孢子總長度)100]。1.3致病性測定方法接種試驗采用摘葉噴霧接種法。各菌株在PDA斜面培養(yǎng)基上,25培養(yǎng)15d。用滅菌的自來水洗下斜面上的分生孢子,2000r/min,5min離心兩次,洗
8、去孢子萌發(fā)抑制物質(zhì)。5再用滅菌的自來水調(diào)節(jié)孢子懸浮液
