黃芩素抑制金黃色葡萄球菌生物膜形成的作用機制

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3、；早接媒，冷＇；‘奇々Ｉ４；；勝，殺、又學位論文獨創(chuàng)性聲明本人承諾：所呈交的學位論文是本人在導師指導下所取得的研究成果。論文研中除特別加Ｗ標注和致謝的地方外，不包含他人和其他機構已經(jīng)撰寫或發(fā)表過的究成果，其他同志的研究成果對本人的啟示和所提供的幫助，均己在論文中做了明確的聲明并表示謝意。學位論文ｔ學位論文版權作者簽名：的使用授權書學校本有學權位保論文作者完全了解遷寧師范大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，及留并向國家有關部口或機構送交復印件或磁盤，允許論

4、文被查閱和借閱。本文授權迂寧師范大學，可將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫并進行檢索，可Ｗ采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文，并且本人一保電密子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相致。的學位論文在解密后使用本授權書。ｖｆ＾學位論文作者簽名：ｉ指導教師簽名：為鳴簽名日期：年（５月＞日分類號：學校代碼：10165密級：學號：201211001084碩士學位論文黃芩素抑制金黃色葡萄球菌生物膜形成的作用機制作者姓名：王海婷學科、專業(yè)：微生物學研究方向：微生

5、物生化導師姓名：謝明杰教授2015年05月黃芩素抑制金黃色葡萄球生物膜形成的作用機制摘要金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）是威脅人類的重要病原菌，是臨床上常見的致病菌之一，它可黏附于醫(yī)療器械表面、人類組織器官表面形成生物膜，導致反復發(fā)作、難以徹底治愈的疾病，如慢性呼吸道感染、肺結核、前列腺炎等。目前臨床上常用抗生素類藥物治療生物膜引起的感染，但由于耐藥菌群的大量出現(xiàn)，迫切需要尋找一種新型高效的藥物治療生物膜引起的感染。本文對黃芩素抑制Staphylococcusaureu

6、s26112生物膜形成的作用機制進行了研究，結果如下：（1）本文采用剛果紅平板法及結晶紫半定量法篩選得到一株產(chǎn)膜菌株——Staphylococcusaureus26112（SA26112），并測定了該菌株生物膜的形成過程，實驗結果顯示，培養(yǎng)3d的SA26112菌株能形成成熟的生物膜；（2）采用TTC法及平板法測定了黃芩素對SA26112菌株生物膜形成的抑制作用，實驗結果顯示，黃芩素能抑制SA26112菌株生物膜的形成，其MIC和MBC均為0.04mg/ml；（3）本文測定了黃芩素對SA26112

7、菌株成熟生物膜的作用，結果顯示，黃芩素能使成熟生物膜變薄，但不能完全殺死膜內(nèi)的細菌；（4）采用TTC法測定了黃芩素與環(huán)丙沙星聯(lián)用后對SA26112菌株成熟生物膜的作用，實驗結果顯示，當黃芩素濃度為0.12mg/ml、環(huán)丙沙星為16μg/ml時能完全殺死生物膜內(nèi)的細菌；（5）通過Dot-blot法檢測黃芩素對SA26112菌株PIA合成的影響，發(fā)現(xiàn)隨著黃芩素濃度增加PIA合成量減少，當濃度為1MIC（0.04mg/ml）時可明顯抑制PIA合成；（6）通過微量紫外分光光度計測定黃芩素對SA26112

8、菌株eDNA釋放量的影響，發(fā)現(xiàn)隨著黃芩素濃度增加eDNA釋放量逐漸降低，當黃芩素濃度達到1MIC（0.04mg/ml）時eDNA的釋放量減少了97%（p＜0.01）；（7）通過RT-PCR技術測定黃芩素對SA26112菌株icaA及cidA基因表達量的影響，結果顯示隨著黃芩素濃度的增加基因的表達量降低，當濃度達到1MIC（0.04mg/ml）時，與對照組相比icaA及cidA基因的表達量均分別減少了62%和41%（p＜0.01）。關鍵詞：生物膜；金黃色葡萄球菌；黃芩素；icaA；cidAII遼寧