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《bmscsepcs聯(lián)合移植治療兔股骨頭壞死實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào)民６８單位代碼：１０１６０學(xué)號(hào)；２０１２２００７２？ｆ覆審轉(zhuǎn)碩ｉ學(xué)位論文題目；ＢＭＳＣｓＥＰＣｓ／聯(lián)合移植治療兔股骨頭壞死實(shí)驗(yàn)研究Ｓｔｕｄｙｏｆｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆｃｏｍｂｉｎｅｄｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｒｏｅｎｉｔｏｒｃｅｌｌｓｗｉｔｈｂｏｎｅｐｇｍａｒｒｏｗｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓｆｏｒｆｅｍｏｒａｌｈｅａｄｎｅｃｒｏｓｉｓｉｎｒａｂｂｔｉｓ硏究生：於紹龍導(dǎo)?zhēng)煟海墑⒌て剑崳妼W(xué)科專業(yè)：骨科學(xué)２０
2、一１３３２０１４論文課題起止時(shí)間：年月年６月論文完成時(shí)間：２０１５年３月遼寧醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加Ｗ標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含一為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)巧學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料，與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。乏處一申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)，本人承擔(dān)巧相關(guān)責(zé)任。如
3、、：日期論文作者簽著：遼寧醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解巧寧醫(yī)學(xué)院有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬迂寧醫(yī)學(xué)院。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為巧寧醫(yī)學(xué)院，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為巧寧醫(yī)學(xué)院。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和猶盤，允許論文被查＾閱和借閱！乂公。學(xué)?？刹紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容（保密巧容除外），從采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽遂：
4、指導(dǎo)教師簽名目錄一、摘要中文論著摘要……………………………………………………………………1英文論著摘要……………………………………………………………………5二、英文縮略語(yǔ)………………………………………………………………………8三、論文正文前言………………………………………………………………………………9實(shí)驗(yàn)材料與方法…………………………………………………………………10實(shí)驗(yàn)結(jié)果…………………………………………………………………………20討論………………………………………………………………………………3
5、0結(jié)論………………………………………………………………………………32四、本研究創(chuàng)新性的在自我評(píng)價(jià)……………………………………………………33五、參考文獻(xiàn)…………………………………………………………………………34六、附錄綜述………………………………………………………………………………36在校期間科研成績(jī)………………………………………………………………45致謝………………………………………………………………………………46個(gè)人簡(jiǎn)介…………………………………………………………………………47·中文論著摘要·B
6、MSCs/EPCs聯(lián)合移植治療兔股骨頭壞死實(shí)驗(yàn)研究目的檢測(cè)骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞聯(lián)合移植到股骨頭缺血壞死部位促進(jìn)壞死區(qū)局部成骨和成血管能力。方法1、密度梯度離心法分離培養(yǎng)兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞并進(jìn)行鑒定。2、采用相同方法獲取兔內(nèi)皮祖細(xì)胞并進(jìn)行鑒定。3、共培養(yǎng)的兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞與內(nèi)皮祖細(xì)胞之間最佳比例采用堿性磷酸酶活性檢測(cè)以確定。4、Real-TimePCR檢測(cè)細(xì)胞成骨及成血管相關(guān)基因的表達(dá)。5、采用激素方法構(gòu)建兔ANFH模型并進(jìn)行檢測(cè)。6、實(shí)驗(yàn)分4組：A組：空白對(duì)照B組：?jiǎn)为?dú)植入骨髓基質(zhì)細(xì)胞懸液C組：?jiǎn)为?dú)植
7、入內(nèi)皮祖細(xì)胞細(xì)胞懸液D組：植入骨髓基質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞混合的細(xì)胞懸液7、移植用細(xì)胞懸液的制備。8、根據(jù)組別將不同種類細(xì)胞移植到兔ANFH部位。9、股骨頭壞死區(qū)域檢測(cè)。(1)HE染色檢測(cè)植入細(xì)胞后ANFH修復(fù)情況(2)免疫組化染色檢測(cè)植入細(xì)胞后ANFH模型BMP-2表達(dá)(3)CD34免疫組化檢測(cè)植入細(xì)胞后ANFH模型新生血管1結(jié)果1、兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞鑒定（1）鏡下可見(jiàn)剛培養(yǎng)1d的細(xì)胞由于貼壁數(shù)目較少而呈現(xiàn)出圓形，細(xì)胞的體積較小。6d后可以觀察到大部分細(xì)胞已經(jīng)貼壁，細(xì)胞形態(tài)由之前的圓形變?yōu)樗笮巍＝臃N9d后可以觀察
8、到細(xì)胞的數(shù)目明顯較之前增多，細(xì)胞之間排列規(guī)律并且有融合的趨勢(shì)。傳代后的細(xì)胞形態(tài)更加單一，可見(jiàn)細(xì)胞鋪滿瓶底，旋渦狀融合生長(zhǎng)，排列有規(guī)則。（2）HE染色鏡下可見(jiàn)，細(xì)胞出現(xiàn)長(zhǎng)的梭型，生長(zhǎng)旺盛,可見(jiàn)有核分裂出現(xiàn)。（3）第21d進(jìn)行茜素紅染色，可見(jiàn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞聚集，形成明顯鈣結(jié)節(jié)結(jié)構(gòu)。（4）流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示，粘附分子CD44（97.85±1.56）%和受體分子CD90（96.83±1.83）%在骨髓基質(zhì)細(xì)胞中高表達(dá)。而造
