骨髓間充質(zhì)干細胞對pof大鼠卵巢修復作用研究

《骨髓間充質(zhì)干細胞對pof大鼠卵巢修復作用研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。

1、＇ｒ４？ｊｉ＼１分類號Ｒ７：０１６０１１．５９單位代碼學號：２０１２２００８０？ｆ番寒後碩±學位論文題目：骨髓間充質(zhì)干細胞對ＰＯＦ大鼠卵巢修復作用研究民ｅｓ化ｒａｔｉｖｅＥｆｆｅｃｔｓｏｆ目ＭＳＣｓｏｎＯｖａｒｉｅｓｉｎＰＯＦＲａｔｓ研究生；劉加賓導師：艾浩學科專業(yè)：知產(chǎn)科學一論文課題起止時間：２０１３年４月２０１５年３月論文完成時間；２０１５年３月遼寧醫(yī)學院研究生學位論義獨創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學位論文是我

2、本人在導師指導下進行的研究工Ｌ作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加乂標注和致謝的地方外，，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果化不包含一為獲得我?；蚱渌逃龣C構(gòu)的學位或證書而使用過的材料，與我同工作的罔志對本巧究所做的任何貢獻均臣在論文中作了明確的說明并表示謝意。一申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔巧相關(guān)責任。論文作者簽連：目期：ｗＬＬ心．狂寧醫(yī)學院硏究生學位論文版校使用授權(quán)書本人完全了解迂寧醫(yī)學院有關(guān)保護知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，邵：研究生在攻讀學位期間論文王作的知

3、巧產(chǎn)權(quán)單位屬巧寧醫(yī)學院。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使巧論文工作成果時署名單化為巧寧蔭學曉，且導師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為巧寧醫(yī)學曉。學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部口或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學?？桑ü紝W位論文的全部或部分內(nèi)容（保密內(nèi)容除外），Ｌ義采用影印、縮印或其他手段保存論論文。文作者簽卡少指導教師簽?。夯崳娔夸浺?、摘要中文論著摘要…………………………………………………………………1英文論著摘要…………………………………………………………………4二、英文縮

4、略語表…………………………………………………………………7三、論文前言……………………………………………………………………………8實驗材料與方法………………………………………………………………9實驗結(jié)果………………………………………………………………………16討論……………………………………………………………………………27結(jié)論……………………………………………………………………………29四、本研究創(chuàng)新性的自我評價……………………………………………………30五、參考文獻………………………………………………………………………

5、31六、附錄綜述……………………………………………………………………………34在學期間科研成績……………………………………………………………40致謝……………………………………………………………………………41個人簡介………………………………………………………………………42?中文論著摘要?骨髓間充質(zhì)干細胞對POF大鼠卵巢修復作用研究目的探討骨髓間充質(zhì)干細胞（Bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells,BMSCs）在POF（Prematureovarianfailure,POF）大鼠卵巢內(nèi)

6、的歸巢及對卵巢功能調(diào)節(jié)作用，為BMSCs移植治療卵巢早衰提供實驗基礎(chǔ)。方法1、大鼠BMSCs的體外分離、培養(yǎng)、鑒定及標記：通過差異貼壁法從SD大鼠骨髓中分離BMSCs，用含10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng)。采用流式細胞儀檢測BMSCs表面因子CD29、CD45、CD34及CD90的表達鑒定BMSCs。流式細胞儀檢測BMSCs細胞周期明確細胞的生長特性。用攜帶增強型綠色熒光蛋白基因的腺病毒（Ad-EGFP）轉(zhuǎn)染BMSCs，分別用轉(zhuǎn)染復數(shù)（Multiplicityofinfection,MOI）為50、100、150

7、、200、400的Ad-EGFP轉(zhuǎn)染BMSCs，在24小時、48小時及72小時用倒置熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白表達及細胞形態(tài)變化，尋找最佳MOI。2、體外BMSCs對順鉑損傷顆粒細胞的影響：分離培養(yǎng)大鼠卵巢顆粒細胞（granulosacells,GCs），通過免疫細胞化學檢測促卵泡激素受體（folliclestimulatinghormonereceptor,FSHR）在顆粒細胞中表達來鑒定GCs。GCs加入不同濃度的順鉑（分別為1mg/L、2.5mg/L、5mg/L、7.5mg/L、10mg/L），通過CCK-8檢測順鉑

8、對GCs生長影響，選用最佳濃度。在最佳濃度的順鉑作用下將BMSCs和GCs以1:1比例共培養(yǎng)，48小時后收集GCs，Annexin-V/PI法檢測GCs凋亡率，并用結(jié)晶紫染色，觀察GCs形態(tài)變化。應(yīng)用Transwell法檢測BMSCs向順鉑損傷的GCs遷移能力。3、BMSCs在順鉑所致POF大鼠卵巢內(nèi)歸