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1、分類號密級UDC編號碩士學位論文大葉補血草活性成分的研究池曉會(1218003)指導教師姓名譚成玉專業(yè)名稱環(huán)境科學論文答辯日期2015年6月1日學位授予日期2015年6月ThesisfortheDegreeofMasterStudiesonBioactiveComponentsfromLimoniumgmeliniiSupervisor:ChengyuTanMasterCandidate:XiaohuiChiEnvironmentalScienceDalianOceanUniversityDalian,LiaoningProvince,PR
2、.ChinaJUNE2015摘要摘要本論文以新疆特色鹽生植物——大葉補血草(Limoniumgmelinii)為研究對象,通過多種色譜分離純化方法相結合,對其石油醚、乙酸乙酯和正丁醇浸膏進行了系統(tǒng)分離純化,共分離得到10種化合物,通過理化性質分析、光譜數據分析等,鑒定了其中8種化合物,分別為楊梅素(C-1)、β-谷甾醇(C-2)、二氫楊梅素(C-3)、沒食子酸(C-4)、楊梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷(C-5)、槲皮素(C-6)、胡蘿卜苷(C-7)和蘆丁(C-8),其中化合物C-3、C-6、C-7和C-8為首次從該植物中分離得到。考察了閃
3、式輔助萃取-熱回流法提取制備大葉補血草總黃酮的工藝條件。熱回流提取中以50%乙醇作為溶劑,料液比為1:70,閃式輔助萃取時間15min,熱回流溫度為90?C。利用大孔吸附樹脂進一步純化總黃酮,篩選到AB-8型大孔吸附樹脂對補血草總黃酮具有較好的吸附率和解吸率,其吸附率為62.6%,解析率為79.3%??疾炝薃B-8大孔吸附樹脂對總黃酮的靜態(tài)吸附曲線,并對溶劑濃度和溶劑用量進行了優(yōu)化。建立了RP-HPLC同時測定大葉補血草中的四種黃酮醇類化合物——楊梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷、楊梅素、蘆丁和槲皮素的方法。采用色譜柱KromasilC18柱
4、,甲醇-水-磷酸(40:60:0.4)作為流動相,265nm下進行檢測,結果表明,該方法在檢測條件下對四種化合物的分離具有精密度好、重現性高、穩(wěn)定性好、平均加樣回收率高等優(yōu)點,可用于大葉補血草中四種黃酮醇的含量分析。對大葉補血草的提取物及總黃酮進行了體外清除自由基、抑制ACE活性以及對急性酒精性肝損傷活性肝臟保護作用實驗。結果表明,大葉補血草總黃酮在濃度分別為50,100,200μg/mL時對DPPH?具有一定的清除活性,其活性大小與濃度成劑量依賴關系,對OH?的清除活性不強。乙醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水層萃取物在濃度為10
5、0mg/mL時具有相對較高的抑制ACE活性。對制備的總黃酮進行了急性酒精性肝損傷模型小鼠的肝臟影響實驗,結果表明,總黃酮具有降低肝臟指數,降低肝組織中ALT、AST活力,提升SOD活力,減少MDA、LDH、TC和TG的含量,從而起到肝臟保護作用。其作用機制可能與總黃酮的抗氧化活性有關。關鍵詞:大葉補血草;化學成分;含量分析;總黃酮工藝;活性研究IAbstractAbstractInthispaper,tenchemicalconstituteswereisolatedbyvariouschromatographicandrecrystall
6、izedmethodsfromLimoniumgmeliniiinXinjiang.OnthebasicofanalysisofNMRdataandmeasurementofphysico-chemicalcharacters,thestructuresof8compoundswereidentifiedasMyricetin(C-1),β-sitosterol(C-2),dihydromyricetin(C-3),gallicacid(C-4),myricetin-3-O-α-L-rhamnoside(C-5),quercetin(C-6
7、),daucosterol(C-7)andrutin(C-8).Amongthem,compundsC-3、C-6、C-7andC-8wereisolatedfromthisplantforthefirsttime.TogetthetotalflavonoidsfromLimoniumgmelinii,itwasextractedwith50%ethanolbyusingheatrefluxextractioncombinedwithflashextraction.Thebestconditionswereasfollows:materia
8、ltoliquidwas1:70g/mL,flashextractiontimewas15minutesandthetemperatureofheatrefluxextracti