大豆鐵蛋白吸收鐵的途徑及體外細胞吸收研究

大豆鐵蛋白吸收鐵的途徑及體外細胞吸收研究

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1、分類號:單位代碼:密級學(xué)號:博士學(xué)位論文大豆鐵蛋白吸收鐵的途徑及體外細胞吸收研究研究生呂晨艷指導(dǎo)教師趙廣華教授申請學(xué)位門類級別工學(xué)博士專業(yè)名稱食品科學(xué)研究方向食品生物化學(xué)與營養(yǎng)所在學(xué)院食品科學(xué)與營養(yǎng)丁程學(xué)院二零一五年六月分類號:單位代碼:密級學(xué)號雋弋、博士學(xué)位論文大豆鐵蛋白吸收鐵的途徑及體外細胞吸收研究研究生:呂晨艷指導(dǎo)教師:趙廣華教授申請學(xué)位門類級別:工學(xué)博士專業(yè)名稱:食品科學(xué)研究方向:食品生物化學(xué)與營養(yǎng)所在學(xué)院:食品科學(xué)與營養(yǎng)工程學(xué)院二零一五年六月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行

2、的研究工作及取得的研宄成果。盡我所知,除了文中已經(jīng)注明引用和致謝的內(nèi)容外,論文中不包含本人和其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研宄所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名:時間:年《月化日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。本人同意中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有權(quán)保存及向國家有關(guān)部門和機構(gòu)送交論文的紙質(zhì)版和電子版,允許論文被查閱和借閱,本人同意中國農(nóng)業(yè)大學(xué)將本學(xué)位

3、論文的全部或部分內(nèi)容授權(quán)匯編錄入《中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》或《中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》進行出版,并享受相關(guān)權(quán)益。保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)學(xué)位論文作者簽名:時間:么年月日中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文摘要摘要鐵蛋白是廣泛存在于生物體細胞中的一類鐵貯藏蛋白,具有調(diào)節(jié)鐵代謝平衡以及去除亞鐵離子毒性的雙重功能。與動物鐵蛋白相比,關(guān)于植物鐵蛋白的結(jié)構(gòu)和功能的研宄甚少。目前己發(fā)現(xiàn)豆類植物中以上的鐵以鐵蛋白的形式藏在淀粉體中。因此,豆類種子鐵蛋白是研宄植物鐵蛋白的理想模型。植物鐵蛋白與動物鐵蛋白相比,其在

4、結(jié)構(gòu)上具有三個明顯的特征:、植物鐵蛋白端含有肽段,而動物鐵蛋白沒有。該肽段位于植物鐵蛋白的外殼表面,參與鐵的結(jié)合和氧化。、動物鐵蛋白由和型亞基組成,而植物鐵蛋白只含有型亞基,和。和型亞基具有的同源性,二者在鐵氧化沉淀過程中起著協(xié)同作用。在不同來源的植物鐵蛋白中,和亞基的組成比例不同。、植物鐵蛋白的三重軸通道和四重軸通道均為親水性通道,而動物鐵蛋白的三重軸通道為親水性通道,四重軸通道為疏水性通道。鐵蛋白的通道是與外界進行物質(zhì)交換的重要途徑。本文以植物鐵蛋白(和亞基)為研宄對象,一方面,從植物鐵蛋白的結(jié)構(gòu)特點出發(fā)

5、,研究植物鐵蛋白的三重軸和四重軸通道在鐵氧化沉淀過程中的作用,揭示為什么植物鐵蛋白的三重軸和四重軸通道為親水性通道?另一方面,從鐵蛋白的應(yīng)用出發(fā),在體外和體內(nèi)研宄鐵蛋白的消化穩(wěn)定性,進而對不同來源的植物鐵蛋白的吸收率進行鑒定,闡明其細胞吸收機制。研究成果將為開發(fā)高效的功能性補鐵制劑奠定理論基礎(chǔ)。具體研究結(jié)果如下:利用分子克隆、點突變、載體構(gòu)建、表達及重組蛋白的分離純化的方法制備了重組大豆鐵蛋白、、及的突變體,和采用柱層析方法純化得到了電泳純的及其突變體。得到了充足的植物鐵蛋白,為后續(xù)蛋白質(zhì)的性質(zhì)研宄提供了保障

6、。通過比較重組大豆鐵蛋白(及其三重軸和四重軸突變體(,的鐵氧化沉淀活性、聚合特性以及鐵釋放活初步闡明鐵蛋白的親水性(三重軸和四重軸)通道均為鐵離子擴散和氧化沉淀的主要途徑。通過建立體外消化模型比較不同亞基組成的植物鐵蛋白(,,和的消化穩(wěn)定性以及在體外和體內(nèi)研宂加工條件和食品組分對鐵蛋白消化穩(wěn)定性的影響,闡明大部分植物和動物鐵蛋白能夠抵抗住腸胃的消化作用到達小腸,并且食品組分中脫脂奶粉對鐵蛋白具有保護作用。采用同位素標記不同亞基組成的植物鐵蛋白(,和和動物鐵蛋白,通過細胞模型鑒定其鐵的吸收率和鐵蛋白與細胞表面的

7、相互作用。本文研宄發(fā)現(xiàn)大豆鐵蛋白的吸收率最高,與細胞表面的特異性結(jié)合強度最大。因此,大豆鐵蛋白是一種潛在的新型高效補鐵功能因子。關(guān)鍵詞:大豆鐵蛋白,鐵吸收,消化穩(wěn)定性,吸收率,鐵中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文,中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文,中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文目錄目錄第一章文獻綜述及立題分析鐵鐵的生理學(xué)意義鐵在人體中的分布鐵缺乏鐵在人體內(nèi)的吸收途徑鐵蛋白的結(jié)構(gòu)與功能鐵蛋白的結(jié)構(gòu)動物鐵蛋白與植物鐵蛋白的區(qū)別鐵蛋白的功能鐵蛋白的營養(yǎng)鐵蛋白中鐵的吸收率鐵蛋白的消化穩(wěn)定性鐵蛋白的細胞吸收與代謝研究目的與意義研究內(nèi)容與技術(shù)路

8、線研宄內(nèi)容技術(shù)路線第二章重組大豆鐵蛋白突變體的制備及純化材料與方法材料、主要試劑與儀器實驗方法結(jié)果與分析大豆鐵蛋白四重軸突變體(的構(gòu)建鐵蛋白三重軸通道突變體和名大豆鐵蛋白亞基突變體的分離純化中國農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文目錄離第三章三重軸和四重軸通道在大豆鐵蛋白吸收鐵中的作用研宄材料與方法材料、主要儀器與設(shè)備實驗方法結(jié)果與分析及其突變體的結(jié)構(gòu)表征及其突變體的功能鑒定討論與結(jié)論第四章植物鐵蛋白與動物鐵蛋白的

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