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《豬流行性腹瀉病毒hbmc2012株的致病性與免疫研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、_^^fAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI碩士學位（畢業(yè)）論文豬流行性腹瀉病毒HBMC/2012株的致病性與免疫研究學位申請人：朱衛(wèi)霞指導教師：宋勤葉教授學科專業(yè)：預防獸醫(yī)學學位類別：農學碩士授予單位：河北農業(yè)大學答辯日期：二〇一五年五月二十四讀分類號：S855.3單位代碼：10086密級：公開學號：2012359豬流行性腹瀉病毒HBMC/2012株的致病性與免疫研究PathogenicityandImmunityStudyofPorcineEpidemicDiarrheaVirusStrainHBMC/2012學位申請人：朱衛(wèi)霞指導教師：宋勤葉教授學科專業(yè)：預防獸
2、醫(yī)學學位類別：農學碩士授予單位：河北農業(yè)大學答辯日期：二〇一五年五月二十四獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人己經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得河北農業(yè)大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名：簽字日期：yar年Jr月對円學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解河北農業(yè)大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱
3、和借閱。本人授權河農業(yè)大學可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。(保密的學位論文在解密后適用本授權書）學位論文作者簽名：導師簽名：年如4簽字日期：乂比年丨月、円簽字日期：M丨年1月、円學位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：電話:通訊地址：郵編:摘要豬流行性腹瀉（PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）引起豬的一種高度接觸性的急性腸道傳染病，主要以嘔吐、水樣腹瀉和脫水為特征。2010年以來，我國多個地區(qū)突然爆發(fā)由PEDV變異株引起的初生仔豬腹瀉，其臨床癥狀、發(fā)病率和死亡率均較此前常見的PED嚴重，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經濟損失。
4、目前對PEDV的致病性與免疫特征了解不夠深入，缺乏標準防控程序，本研究旨在探索PEDV流行毒株與宿主間的感染免疫特性，為進一步闡明該病的發(fā)病機制奠定基礎。用自河北省某豬場分離的PEDVHBMC/2012株分別感染3日齡和21日齡健康仔豬，評價該毒株的致病性。3日齡仔豬感染后2-3d（dpi）出現(xiàn)嚴重的腹瀉和嘔吐等典型癥狀，持續(xù)3d左右逐漸好轉，感染后8h即可在肛拭子中檢測到病毒，并一直持續(xù)到實驗結束（13d）。剖檢可見小腸壁變薄，腸絨毛脫落或增粗，內充滿淡黃色內容物，部分小腸內充滿氣體，腸系膜淋巴結出血。21日齡仔豬的臨床表現(xiàn)較3日齡仔豬輕，感染后2d出現(xiàn)不同程度的腹瀉，沒有出現(xiàn)嘔吐癥狀，
5、病理變化也較輕。感染后3、7d在血清和腸道內可檢測到病毒核酸，感染后23d在相應樣品內未檢測到。免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)PEDV主要分布在小腸的中后段，小腸絨毛上皮細胞內的病毒檢出率最高。該結果表明PEDVHBMC/2012毒株具有明顯的致病性，其所致疾病的嚴重程度與日齡密切相關。進而通過流式細胞術、ELISA和免疫組化等手段，評價PEDV感染21日齡仔豬的全身和局部免疫反應及相關免疫分子的變化。感染后19d（dpi）仔豬體內的抗體水平達到高峰，感染++-早期（3dpi），外周血淋巴細胞（PBMC）的特異增殖能力有所提高，CD3CD4CD8Th、+-++----+CD3CD4CD8Tc、CD3CD
6、4CD8γδT和CD3CD4CD8細胞亞群的含量顯著增加；7dpi，--+++-+-+CD3CD4CD8細胞顯著低于對照組，CD3CD4CD8Th、CD3CD4CD8Tc細胞含量回落，與+--對照組無顯著差異，而CD3CD4CD8γδT的含量仍然極顯著高于對照組。感染后3d，感染+++組CD3CD4CD8Tm細胞亞群含量顯著低于空白對照組，而感染后7d高于空白對照組，但兩組差異不顯著。該結果提示PEDV能夠誘導機體特異性免疫應答，不同T細胞亞群參與了免疫應答。PEDV感染仔豬的十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結腸與腸系膜淋巴結等局部組織中的肥大++細胞、單核-巨噬細胞以及SWC1a或/和SWC
7、8的粒細胞增多，杯狀細胞分泌MUC2的功能明顯下降，但是腸系膜淋巴結細胞的增殖活性沒有明顯變化。此結果表明肥大細胞、單核-巨噬細胞以及粒細胞等均參與了局部免疫反應，腸道黏膜MUC2黏蛋白含量的降低可能是PEDV導致仔豬腹瀉的關鍵因素。對PEDVHBMC/2012株致病性與感染免疫特性的初步探索，可以為進一步闡明該病毒的致病與免疫機制提供科學依據(jù)。關鍵詞：豬流行性腹瀉；HBMC/2012株；致病性；全身免疫；局部免疫Pat
