線粒體atp敏感性鉀離子通道在大鼠心肌缺血損傷后修復(fù)中的作用

《線粒體atp敏感性鉀離子通道在大鼠心肌缺血損傷后修復(fù)中的作用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、線粒體ATP敏感性鉀離子通道在大鼠心肌缺血損傷后修復(fù)中的作用TheprotectiveroleofmitochondrialATP-sensitivepotassiumchannelsinmyocardialischemiainjuryinrats作者姓名：高丹專業(yè)名稱：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：張秀英教授李玉林教授學(xué)位類別：醫(yī)學(xué)碩士答辯日期：2015年5月21日內(nèi)容提要心肌缺血（myocardialischemia）是臨床常見的病理過程，常由冠心病導(dǎo)致的冠脈狹窄或閉塞引起。當(dāng)供給心肌的血流量減少時，

2、細(xì)胞從血液中攝取的氧減少，導(dǎo)致心肌細(xì)胞的有氧代謝減弱，ATP生成減少，不能滿足機體維持正常功能的需要。同時，代謝廢物也不能夠被有效的清除，引起組織酸中毒、鈣超載、ROS蓄積等，導(dǎo)致心肌受損，心臟功能減退。線粒體ATP敏感性鉀離子通道（mitoK-ATP）廣泛存在于線粒體內(nèi)膜上，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)ATP濃度明顯降低，如組織發(fā)生缺氧，代謝受到抑制，ATP合成受阻或大量分解時，會引起該通道的開放。我們基于mitoK-ATP通道的生理功能和目前國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，推測開放mitoK-ATP通道可能是通過保護線粒體結(jié)構(gòu)的完整和

3、維持線粒體功能的穩(wěn)定，使細(xì)胞在缺血、缺氧條件下的氧化磷酸化效能增強，減輕組織內(nèi)的氧化應(yīng)激水平，減少心肌細(xì)胞凋亡等，發(fā)揮心臟保護作用。本研究通過給予異丙腎上腺素的方法，模擬臨床上因冠心病導(dǎo)致冠脈狹窄或閉塞造成的心肌缺血，建立大鼠心肌缺血損傷模型。探討mitoK-ATP通道在大鼠心肌缺血損傷后修復(fù)中的作用及機制。首先，本實驗通過制備大鼠心肌缺血損傷的模型來探究開放mitoK-ATP通道對心肌缺血損傷后的保護作用。分別從對大鼠心臟的大體標(biāo)本檢測（TTC染色）以及對石蠟切片進行組織學(xué)檢測（HE染色）兩個方面，對

4、各組心臟組織的損傷情況進行評估。證明了開放mitoK-ATP通道對大鼠心肌缺血損傷具有保護作用。其次，通過對大鼠心肌細(xì)胞凋亡情況的檢測，證明開放mitoK-ATP通道可以通過減少細(xì)胞凋亡來保護心肌抵抗缺血、缺氧損傷。接下來，我們驗證了Kir6.2亞基的表達情況，其表達量代表細(xì)胞內(nèi)mitoK-ATP通道的開放程度。結(jié)果證明了給予mitoK-ATP通道開放劑能夠提高Kir6.2亞基的表達水平，以促進mitoK-ATP通道的開放，發(fā)揮心臟保護作用。最后，本實驗為了進一步探討mitoK-ATP通道對心肌缺血后保

5、護作用的機制，檢測了能夠反映組織細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平的重要標(biāo)記物Nitrotyrosine的表達水平以及細(xì)胞凋亡通路的關(guān)鍵蛋白酶活性Caspase-3的表達水平，證明開放mitoK-ATP通道可以減輕組織ROS的氧化損傷、降低活性Caspase-3的表達，從I而抑制凋亡的發(fā)生。綜上所述，本實驗通過制備大鼠心肌缺血模型，探究mitoK-ATP通道對心肌缺血損傷后的保護作用及機制。結(jié)果闡明了mitoK-ATP通道能夠通過減少組織ROS的蓄積以減輕細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷，減少心肌細(xì)胞凋亡，從而保護心臟。II中文摘要

6、線粒體ATP敏感性鉀離子通道在大鼠心肌缺血損傷后修復(fù)中的作用研究背景：心肌缺血（myocardialischemia）是臨床常見的病理過程，常由冠心病導(dǎo)致的冠脈狹窄或閉塞引起。當(dāng)供給心肌的血流量減少時，細(xì)胞能夠從血液中攝取的氧減少，心肌細(xì)胞的有氧代謝減弱，ATP生成減少，不能滿足機體代謝的需要，同時，代謝廢物也不能被有效的清除，引起組織酸中毒、鈣超載、ROS蓄積等，導(dǎo)致心肌細(xì)胞損傷，心臟功能減退。線粒體能夠通過氧化磷酸化產(chǎn)生ATP，是真核細(xì)胞能量產(chǎn)生的主要場所，線粒體的損傷被認(rèn)為是引起細(xì)胞衰老、氧化應(yīng)激

7、損傷、細(xì)胞凋亡的直接因素。因此，在抵抗心肌缺血、缺氧損傷中，防止線粒體發(fā)生功能障礙可能是一個有效的治療策略。線粒體ATP敏感性鉀離子通道（mitoK-ATP）廣泛的存在于線粒體內(nèi)膜上，受細(xì)胞內(nèi)ATP濃度調(diào)節(jié)，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)ATP濃度明顯降低時，會導(dǎo)致該通道開放。我們基于mitoK-ATP通道的生理功能及目前國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，推測開放mitoK-ATP通道可能是通過保護線粒體結(jié)構(gòu)的完整和維持線粒體功能，提高細(xì)胞在缺血、缺氧條件時氧化磷酸化效能，減輕氧化應(yīng)激損傷，減少心肌細(xì)胞凋亡等發(fā)揮心臟保護作用。本研究通過給予異

8、丙腎上腺素的方法，模擬臨床上因冠心病導(dǎo)致冠脈狹窄或閉塞引起的心肌缺血，建立大鼠心肌缺血損傷模型。通過運用組織學(xué)及分子生物學(xué)等方法探究mitoK-ATP通道在大鼠心肌缺血損傷后修復(fù)中的作用及機制。實驗方法：將清潔級雄性Wistar大鼠（200g±20g）隨機分成4組，分別為對照組（Control組），心肌缺血損傷組（ISO組），鉀離子通道開放組（Nic組）及鉀離子通道阻斷組（5-HD組）。Control組大鼠：使用同等劑量的生理鹽水代替藥物。