苧麻木質(zhì)素合成關(guān)鍵酶4cl和ccr基因cdna序列的克隆與表達分析

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2、逼些-畫__學(xué)科專業(yè)作物遺傳削驕究方向作物細工程與分巧種.爾■’:、—..:二O五年六月.、’.、.?.■.‘..■?-'一i;-.V..VV—‘'';::4請皆,.V洩s."巧誠記;'請芯托記;請々式;視辟/-"蔚潔坦驗滬麟:;蓉昭為‘.軍背於■’'-'’''古‘.?'詩>;瑞.,..:vv:::片;品,;..;,f’.:古.扣立賞巧賠拓:城摩窺卻敲韓站茲靖蹲掩;'-.‘:..記.北.記V二藏駕貨駕終簾;媽其巧.吉‘:'..vV:巧神:甘夸.其潔;產(chǎn)心..V;,;心評>心,也^?..?

3、????.-.,;..;;.分類號密級公開UDC單位代碼10537蝴齋祭巫夫#碩±學(xué)位論文蘭麻木廣素合成關(guān)鍵酶4CL和CC艮基因cDNA序列的克隆與表達分析ThecDNAcloninandexressionanalsisofgpykeenzme4CLandCC民eneinlininyyggsnthesisathwaofBoehmerianiveaypy研究生姓名唐映紅指導(dǎo)教師郭清泉教授邢虎成副教授學(xué)科專業(yè)作物遺傳育種研究方向作物基因工程與分子育種

4、論文答辯日期心‘今答辯委員會主席■:分論文評閱人、、冬1^呼聲鱗二〇—五年六月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在指導(dǎo)老師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究,成果,除論文中不包含其他人己經(jīng)。盡我所知了文中特別加W標(biāo)注和致謝的地方外發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料一。與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。^t移棘知/研究生簽名:時間:咬年月日/關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,目P:

5、學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和電子稿,允許論文被查閱和借閱,可W采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)可W用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,并同意將由此產(chǎn)生的收益捐贈給學(xué)校教育基金會用于發(fā)展研究生教育。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽名:I苯化作時間:年冷/曰7(,導(dǎo)師簽名:參/成私時間:知少年^月7日j摘要摘要一空麻是重要的纖維作物之,它在水止保持、藥用開發(fā)、能源開發(fā)和飼料用等領(lǐng)域也獲得了開發(fā)應(yīng)用,具有很大的經(jīng)濟利用價值。然而,些麻中木質(zhì)素的存在也給纖維

6、脫膠,、藥用價值和飼草的營養(yǎng)價值帶來了不利因素。因此進行查麻木質(zhì)素生物合成途徑中關(guān)鍵酶家族基因的研究,為從分子水平探明關(guān)鍵酶基因的功能、木質(zhì)素生物合成調(diào)控過程與成分積累原理提供理論研究數(shù)據(jù)。本研究基于巧麻轉(zhuǎn)錄組測序信息,利用民ACE法首次克隆出2個肉桂醜輔酶A還原酶基因全長cDNA序列-,2個4cDNA序列香豆酸輔酶A連接酶基因部分。對這4個基因進行生物信息學(xué)分析,并利用巧光定量技術(shù)對巧麻快速生長期、成熟初期和成熟后期4個基因在木質(zhì)部和初皮部的表達模式進行了研究。,公心CL2cDNA片段長為,539巧麻4CL家族基因克隆結(jié)果表明18的bp編碼

7、個,氨基酸;公心CZ3基因cDNA部分片段長為938bp;通過在線BLAST及保守結(jié)構(gòu)域的分析cDNA4-,證實克隆獲得的4CL序列為3麻香豆酸輔酶A連接酶基因,具有植物4-香豆酸輔酶A連接酶典型的結(jié)構(gòu)域和保守區(qū)化樹分析結(jié)果表明這兩個基因在;進兩個不同的分支上。巧麻(:01家族基因克隆結(jié)果表明,公nCCKi全長l,0%bp,編碼277個氨基酸;公uCC7?2基因全長U91bp,編碼248個氨基酸;通過在線化AST及保守結(jié)構(gòu)域的分析,證實克隆獲得的CC民cDNA序列為3麻肉桂酷輔酶A還原酶基因,

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