格列齊特對(duì)小鼠成骨細(xì)胞樣細(xì)胞mc3t3-e1增殖、分化及凋亡的影響

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1、學(xué)校代碼10459.學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?01212443187.密級(jí)公開.碩士學(xué)位論文格列齊特對(duì)小鼠成骨細(xì)胞樣細(xì)胞MC3T3-E1增殖、分化及凋亡的影響作者姓名:靳爽導(dǎo)師姓名:張會(huì)娟教授學(xué)科門類:醫(yī)學(xué)專業(yè)名稱:內(nèi)科學(xué)(內(nèi)分泌)培養(yǎng)院系:鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院完成時(shí)間:2015年5月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTheeffectsofgliclazideonproliferation,differentiationandapoptosisinmouseosteo

2、blastic-likecellsMC3T3-E1.ByShuangJinSupervisor:Prof.HuijuanZhangDepartmentofEndocrinologyandMetabolismTheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay,2015原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研宄工作所取得的成果。除論文中已經(jīng)加以注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的科研成果。對(duì)本文的研宄作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均

3、已在文中作了明確的說(shuō)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。作者簽名:爽日期:年t月M日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品,知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被査閱和借閱;本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí),第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)

4、定。作者簽名:日期:抓年i""月2^日摘要格列齊特對(duì)小鼠成骨細(xì)胞樣細(xì)胞MC3T3-E1增殖、分化及凋亡的影響研究生靳爽導(dǎo)師張會(huì)娟鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科河南鄭州450000摘要目的探討格列齊特在正糖環(huán)境中對(duì)小鼠成骨細(xì)胞樣細(xì)胞MC3T3-E1增殖、分化及凋亡的影響方法體外培養(yǎng)小鼠成骨細(xì)胞樣細(xì)胞MC3T3-E1,分為正常對(duì)照組和不同濃度格列齊特組(10μmol/L、20μmol/L、100μmol/L),格列齊特干預(yù)48h后,采用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖率,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,熒光定量PCR檢測(cè)成骨細(xì)胞分化標(biāo)志物I型膠原(COL-I

5、)、骨橋蛋白(OPN)和成骨因子Runt相關(guān)基因2(Runx2)基因的表達(dá),Westernblots檢測(cè)凋亡蛋白(Bax)和抗凋亡蛋白(Bcl-2)的表達(dá)。結(jié)果(1)與對(duì)照組相比,不同濃度格列齊特均能促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖,20μmol/L時(shí)促進(jìn)增殖的作用最強(qiáng),10μmol/L格列齊特組、20μmol/L格列齊特組、100μmol/L格列齊特組與對(duì)照組相比細(xì)胞增殖率依次增加16.6%,20.2%,13.7%(P<0.05)。I摘要(2)對(duì)照組、10μmol/L格列齊特組、20μmol/L格列齊特組、100μmol/L格列齊特組的早期凋亡率分別

6、為:8.83%,5.47%,2.87%,7.33%。與對(duì)照組相比,不同濃度格列齊特均降低成骨細(xì)胞早期凋亡率(P<0.05),20μmol/L抑制凋亡作用最顯著。(3)與對(duì)照組相比,不同濃度格列齊特(10μmol/L、20μmol/L、100μmol/L)均能促進(jìn)功能蛋白COL-1、OPN、Runx2的mRNA的表達(dá)(P<0.05),20μmol/L格列齊特作用最顯著,且COL-1、OPN與Runx2基因的表達(dá)呈顯著正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r分別為0.899、0.854,均P<0.01)。(4)對(duì)照組、10μmol/L格列齊特組、20μmol/L

7、格列齊特組、100μmol/L格列齊特組Bcl-2/β-actin的值依次為1.22±0.025,1.48±0.035,1.81±0.066,1.30±0.015;Bax/β-actin的值依次為0.83±0.046,0.62±0.0150.53±0.0360.72±0.025。與對(duì)照組相比,不同濃度格列齊特組Bcl-2蛋白表達(dá)量增高,Bax蛋白表達(dá)量降低(P<0.05),20μmol/L作用最顯著。Bcl-2/Bax比值與細(xì)胞早期凋亡率呈顯著負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=-0.935,P<0.01)。結(jié)論格列齊特能促進(jìn)正糖環(huán)境下培養(yǎng)的成骨細(xì)胞樣

8、細(xì)胞MC3T3-E1的增殖、分化,抑制其凋亡,對(duì)成骨細(xì)胞起保護(hù)作用。關(guān)鍵詞:格列齊特;MC3T3-E1細(xì)胞;增殖;分化;凋亡IIAbstractTheeffectsofgliclazideonprolife

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