低載荷機(jī)械振動(dòng)對小鼠mc3t3-e1細(xì)胞增殖及分化的影響

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2、?≯、≮,:_.。,,?≯I.:慧≯1。:j....:∥i∥河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫,文責(zé)自負(fù)。研究生簽名問鈉目錄中文摘要??????????????????????????1英文摘要???????????????????????????3研究論文低載荷機(jī)械振動(dòng)對小鼠MC3T3.E1細(xì)胞的增殖及分化的影響前言????????????????

3、?????????5一刖吾?????????????????????????材料與方法??????????????????????1l結(jié)果?????????????????????????16附圖??????????????????????????18附表?????????????????????????23討論?????????????????????????24結(jié)論?????????????????????????27參考文獻(xiàn)????????????????????????28綜述流體切應(yīng)力對成骨細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制影響的

4、研究進(jìn)展???34致謝????????????????????????????40個(gè)人簡歷??????????????????????????41中文摘要低載荷機(jī)械振動(dòng)對小鼠MC3T3.E1細(xì)胞增殖及分化的影響摘要目的:運(yùn)用低載荷機(jī)械振動(dòng)細(xì)胞模型,評價(jià)力學(xué)載荷作用對小鼠MC3T3.E1細(xì)胞生物活性的影響,探討低載荷機(jī)械振動(dòng)作用小鼠MC3T3.E1細(xì)胞成骨相關(guān)信號分子基因蛋白表達(dá)的變化。方法:1研究低載荷機(jī)械振動(dòng)模型對小鼠MC3T3.E1細(xì)胞增殖的影響采用35Hz,加速度0.259的低載荷機(jī)械振動(dòng)裝置,作用于小鼠MC3T3.

5、E1細(xì)胞,按每天振動(dòng)時(shí)間,分為A,B,C,D四組,時(shí)間分別為0min,15min,30min,60min,連續(xù)7天。通過光鏡及MTT增殖實(shí)驗(yàn)檢測不同振動(dòng)條件下小鼠MC3T3.E1細(xì)胞增殖的變化情況2研究低載荷機(jī)械振動(dòng)模型對小鼠MC3T3.E1細(xì)胞分化能力的影響。按上述分組,應(yīng)用低載荷機(jī)械振動(dòng)裝置連續(xù)干預(yù)14天,通過茜素紅染色及顯微鏡觀察鈣化結(jié)節(jié)數(shù)目及AIP活性測定,研究不同振動(dòng)條件對小鼠MC3T3.E1細(xì)胞分化能力的影響。3研究低載荷機(jī)械振動(dòng)對小鼠MC3T3一E1細(xì)胞成骨相關(guān)信號分子基因及蛋白表達(dá)的影響按上述分組,連續(xù)干預(yù)

6、7天,采用Real—timePCR檢測不同振動(dòng)條件下成骨相關(guān)信號分子基因TGF.B及BMP一2,Runx2的轉(zhuǎn)錄變化,WesternBlot檢測不同振動(dòng)條件下成骨相關(guān)蛋白TGF.131、pERK及Runx2的表達(dá)水平。結(jié)果:1A、B、C、D組MTT實(shí)驗(yàn)分別為(O.292+0.0254)、(O.553+0.041)、(O.596+0.078)、(O.313士0.037),與A組對比,B組、C組的成骨細(xì)胞增殖變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(尸0.05);2A、B、C、D組ALP活性測分別為(5.014

7、+0.094)、(7.2594-0.314)、(8.529+0.186)、(5.299+0.136)。B組、C組的鈣化結(jié)節(jié)數(shù)目及ALP活性較A組、D組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(尸0.05)。WesternBlot證實(shí)B組、C組成骨細(xì)胞的低載荷機(jī)械振動(dòng)刺激TGF.B1、pERK及Runx2蛋

8、白表達(dá)水平與A組、D組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異儼0.05)。結(jié)論:1低載荷機(jī)械振動(dòng)(35Hz,加速度0.259),每天振動(dòng)1次,每次15min、30min,連續(xù)7天,可提高小鼠MC3T3一E1細(xì)胞的增殖能力;連續(xù)14天,可提高分化能力。2低載荷機(jī)械振動(dòng)(35Hz,加速

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