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《氯化鑭對人卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞skov3ddp的耐藥逆轉(zhuǎn)作用及其機(jī)制探討》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號:密級:UDC:學(xué)號:416523312224南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文氯化鑭對人卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞SKOV3/DDP的耐藥逆轉(zhuǎn)作用及其機(jī)制探討Anexplorationonthedrug-resistantreverseeffectsandrelatedmechanismoflanthanumchlorideagainstthecisplatin-resistantcellsSKOV3/DDPinhumanovariancancer周夢妮培養(yǎng)單位(院、系):南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院指導(dǎo)老師姓名、職稱:劉絲蓀主任醫(yī)師申請學(xué)位的學(xué)科門類:臨床醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名
2、稱:婦產(chǎn)科學(xué)論文答辯日期:2015年6月答辯委員會主席:評閱人:2015年6月一、學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得南昌大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名(手寫):簽字日期:年月日二、學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校有權(quán)保留并向國家有
3、關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)北京萬方數(shù)據(jù)股份有限公司和中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表,并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù),同意按―章程‖規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。學(xué)位論文作者簽名(手寫):導(dǎo)師簽名(手寫):簽字日期:年月日簽字日期:年月日氯化鑭對人卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞SKOV3/DDP的耐藥逆轉(zhuǎn)作用及其機(jī)制探論文
4、題目討姓名周夢妮學(xué)號416523312224論文級別博士□碩士□√院/系/所研究生院醫(yī)學(xué)部專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)E_mail備注:□公開□保密(向校學(xué)位辦申請獲批準(zhǔn)為―保密‖,年月后公開)I摘要摘要目的:體外培養(yǎng)人卵巢癌細(xì)胞SKOV3,誘導(dǎo)篩選出順鉑耐藥細(xì)胞SKOV3/DDP。研究稀土氯化鑭對人卵巢癌DDP耐藥細(xì)胞是否有逆轉(zhuǎn)作用,并初步探討其相關(guān)機(jī)制。方法:1、以低濃度DDP逐漸遞增,誘導(dǎo)卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞SKOV3/DDP,倒置顯微鏡下觀察兩株細(xì)胞形態(tài)學(xué)的差別,用CCK8法測定DDP(1、2、4、6、8、16、32μg/ml)對SKOV3細(xì)胞及SKOV3/DDP細(xì)
5、胞的生長抑制率,分別得出IC50,計算得到耐藥細(xì)胞的耐藥指數(shù)。2、CCK8法檢測以一定濃度梯度氯化鑭作用36、48h后對SKOV3/DDP細(xì)胞的增殖活力影響,并選取生長抑制率小于5%濃度為相對無細(xì)胞毒性氯化鑭濃度;CCK8法檢測無細(xì)胞毒性濃度的氯化鑭與DDP(1、2、4、6、8、16、32μg/ml)聯(lián)用對SKOV3/DDP細(xì)胞的生長抑制率,比較聯(lián)合用藥與單用DDP作用的IC50。3、實驗設(shè)四組:空白對照組、單獨氯化鑭10μg/ml組、單獨DDP5μg/ml組、氯化鑭10μg/ml+DDP5μg/ml組。用克隆形成實驗檢測不同實驗組SKOV3/DDP細(xì)胞的
6、克隆形成能力,以流式細(xì)胞術(shù)檢測不同實驗組SKOV3/DDP細(xì)胞凋亡率。Westernblot檢測不同實驗組SKOV3/DDP細(xì)胞內(nèi)Caspase-3、ERCC1蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:1、成功誘導(dǎo)SKOV3耐DDP細(xì)胞,其能夠在1μg/mlDDP中生長良好。SKOV3/DDP細(xì)胞較SKOV3細(xì)胞生長緩慢。倒置顯微鏡下觀察SKOV3細(xì)胞株形態(tài)呈鵝卵石樣,大小一致,形態(tài)規(guī)則;SKOV3/DDP細(xì)胞株呈長形梭形,相對扁平,多角,折光性稍差。2、SKOV3/DDP細(xì)胞相對SKOV3細(xì)胞具有一定耐藥性,耐藥指數(shù)RI為2.09倍。不同濃度DDP處理SKOV3細(xì)胞和SKO
7、V3/DDP細(xì)胞24h,DDP對SKOV3的IC50為4.96μg/ml,對SKOV3/DDP細(xì)胞的IC50為10.37μg/ml。II摘要3、氯化鑭(10~320μg/ml)能抑制SKOV3/DDP細(xì)胞的體外增殖,10μg/ml氯化鑭對SKOV3/DDP生長抑制率小于5%,無直接細(xì)胞毒作用,以10μg/ml氯化鑭作為后續(xù)研究耐藥逆轉(zhuǎn)的濃度;氯化鑭濃度(≤10μg/ml)時隨著時間增加抑制率上升不顯著,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。在較高濃度氯化鑭作用時,呈現(xiàn)一定的濃度和時間依賴性。4、10μg/ml氯化鑭和DDP聯(lián)合作用可增強(qiáng)DDP對SKOV3/DDP細(xì)胞的細(xì)胞毒作
8、用。10μg/ml氯化鑭聯(lián)合不同濃度的DDP作用24h,DDP對S