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《谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶在近江牡蠣耐受腹瀉性貝毒中的作用研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文題名（中英對照）：谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶在近江牡蠣耐受腹瀉性貝毒中的作用研究Theroleofglutathione-S-transferaseinresistancemechanismofCrassostreaariakensistodiarrheticshellfishpoisoningtoxins作者姓名：鄒穎指導(dǎo)教師姓名：楊維東及學(xué)位、職稱：博士教授學(xué)科、專業(yè)名稱：生物學(xué)動物學(xué)學(xué)位類型：學(xué)術(shù)學(xué)位論文提交日期：2015年6月28日論文答辯日期：2015年6月4日答辯委員會主席：論文評閱人：學(xué)位授予單位和日期：暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要
2、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶（glutathione-S-transferases,GST）是生物轉(zhuǎn)化II相反應(yīng)的重要酶，主要負責(zé)催化外源物質(zhì)與還原性谷胱甘肽（GSH）形成親水性共軛物，再由ABC轉(zhuǎn)運蛋白（ATP-bindingcassettetransporter,ABC）泵出細胞外從而達到清除毒物和外源物質(zhì)的目的，并在氧化應(yīng)激過程中發(fā)揮重要作用。為揭示GST在貝體腹瀉性貝毒（DSP）代謝解毒中的作用，本研究在實驗室條件下，以利瑪原甲藻（Prorocentrumlima）為DSP毒素的來源，通過實時熒光定量PCR（qPCR）分析了染毒后近江牡蠣（Crass
3、ostreaariakensi）鰓和消化腺組織中GST-α、GST-ζ、GST-ω、GST-π、GST-μ、GST-ρ、GST-θ和微粒體GST（microsomalGST）mRNA表達的變化，采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）測定了五種GST亞型蛋白水平的變化，并分析了貝類鰓和消化腺組織中總GST活性的變化。進一步利用GST特異性抑制劑依他尼酸（ethacrynicacid），觀察了GST活性受到抑制時貝類鰓和消化腺組織中OA含量、P-gp和MRP外排活性的變化。5實驗結(jié)果顯示，在投喂2×10cells/L利瑪原甲藻之后，鰓組織中GST-π、GST-μ、
4、GST-θ、GST-ζ和mGSTmRNA表達水平顯著上升，消化腺組織中只有GST-α和GST-ζ表達受到誘導(dǎo)。與mRNA表達變化相類似，GST蛋白水平的變化也存在差異，當(dāng)利瑪5原甲藻密度為2×10cell/L的情況下，鰓組織中GST-θ和微粒體GST的蛋白含量顯著5增加，當(dāng)利瑪原甲藻密度為20×10cell/L時，GST-π蛋白含量顯著增加。鰓組織中GST活性顯著提高，但消化腺中GST活性并無明顯變化。這些結(jié)果提示GST可能參與DSP毒素的代謝解毒，不同GST亞型在耐受DSP毒素的過程中的作用可能不同。加入GST特異性抑制劑依他尼酸后，與未添加依他尼
5、酸的利瑪原甲藻染毒組相比，鰓和消化腺組織中OA含量顯著下降，P-gp和MRP外排活性顯著提高，抗氧化酶SOD、GSH-Px和CAT的活性、丙二醛的水平并未發(fā)生明顯變化，表明GST活性的抑制可改變DSP毒素在貝體中代謝過程，進一步說明GST在DSP毒素代謝解毒過程中發(fā)揮重要作用。關(guān)鍵詞：近江牡蠣；谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶；腹瀉性貝毒；OA；依他尼酸I暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractGlutathione-S-transferases(GST)arephaseIIenzymesthatfacilitatethedetoxificationofxenobi
6、otics,whichcatalyticreducingglutathione(GSH)-xenobioticsconjugatecomplex,againtransportedbyATP-bindingcassettetransportersoastoachievetheaimofremovingpoisonandexogenoussubatances,atthesametimeGSTplayimportantrolesinantioxidantdefense.Here,toexploretherolesofGSTinresistantmechan
7、ismanddetoxificationofDSPtoxinsinshellfish,changesineightGSTsmRNAlevelincludingGST-α,GST-ζ,GST-ω,GST-π,GST-μ,GST-ρ,GST-θandmicrosomalGST(mGST)intheoysterCrassostreaariakensisafterexposuretoP.limawereevaluatedbyquantitativereal-timePCR(qPCR).SomeGSTsisoformscontentsandtotalGSTse
8、nzymeactivitiesweredetected.Additionally,theaccumulati
