高糖對人臍靜脈內(nèi)皮細胞cd26的表達及mbl補體激活途徑的影響及作用機制

高糖對人臍靜脈內(nèi)皮細胞cd26的表達及mbl補體激活途徑的影響及作用機制

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1、中圖法分類號:R5學校代碼:10661學號:2012263密級:公開碩士學位論文(專業(yè)型學位)高糖對人臍靜脈內(nèi)皮細胞CD26的表達及MBL補體激活途徑的影響及作用機制姓名:潘登專業(yè):腎病風濕科研究方向:糖尿病腎病導師:顏曉勇教授培養(yǎng)單位:遵義醫(yī)學院2015年5月遵義醫(yī)學院碩士研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。學位論文中除了特別加以標注和致謝的地方外,不包含其他人或其它機構已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究的啟發(fā)和所做的貢獻均已在學位論文中作了明確的說明并表示了謝意。學位論文作

2、者簽名:簽字日期:年月日遵義醫(yī)學院學位論文版權使用授權書本人完全了解遵義醫(yī)學院有關保留、使用學位論文的規(guī)定,即:遵義醫(yī)學院有權保留并向有關部門或機構送交學位論文的復印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權遵義醫(yī)學院可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以公布學位論文的全部或部分內(nèi)容,可以采用影印、縮印或其它復制手段保存學位論文,即:遵義醫(yī)學院具有學位論文的數(shù)字化制品復制權,信息網(wǎng)絡傳播權和匯編權。保密的學位論文在解密后適用本授權書。學位論文作者簽名:導師簽名:簽字日期:年月日簽字日期:年月日目錄1、論文:高糖對人臍靜脈內(nèi)皮細胞CD

3、26的表達及MBL補體激活途徑的影響及作用機制中英縮略詞對照表………………………………………………………1中文摘要…………………………………………………………………2英文摘要…………………………………………………………………4前言………………………………………………………………………6材料與方法………………………………………………………………8結果……………………………………………………………………16討論……………………………………………………………………29結論……………………………………………………………………32參考文獻……………………………

4、…………………………………332.綜述……………………………………………………………………363.致謝……………………………………………………………………464.作者簡介………………………………………………………………47基金課題編號:貴州省科學技術基金項目(CK-825)號中英文縮略詞表縮略詞英文全稱中文全稱CD26DipeptidylpeptidaseIV二肽基肽酶IVMBLMannose-bindinglectin甘露聚糖結合凝集素DNDiabetesnephropathy糖尿病腎病MACMembraneattackcomplex膜攻擊復合物H

5、UVECHumanumbilicalveinendothelialcell人臍靜脈內(nèi)皮細胞DMEMDulbecco'sminimumessentialmedium達爾伯克(氏)必需基本培養(yǎng)基NF-kBNuclearfactorkB核因子kBIL-6Interleukin-6白介素-6MASPsMBL-associatedserineproteases與MBL相關性絲氨酸蛋白酶RT-PCRreversetranscriptionPCR實時熒光定量PCRWBWesternBlot蛋白質(zhì)印跡法DMDiabetesmellitus糖尿病GLP-1Glucag

6、onlikepeptide-1胰高血糖素樣肽-1CRDCarbohydraterecognitiondomainC未端糖識別域PKCProteinkinaseC蛋白激酶CADAAdenosinedeaminase腺苷脫氨酶1高糖對人臍靜脈內(nèi)皮細胞CD26的表達及MBL補體激活途徑的影響及作用機制中文摘要目的:觀察高糖培養(yǎng)下人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)的CD26表達變化、甘露聚糖結合凝集素(MBL)補體途徑的激活及炎癥因子(IL-6和NF-kB)的表達情況,探討CD26在糖尿病腎?。―N)慢性炎癥發(fā)病機制中的作用,為CD26抑制劑治療DN尋求基礎研究

7、依據(jù)。方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞,分別設置正常對照組(含葡萄糖5.5mmol/L),甘露醇組(含葡萄糖5.5mmol/L+甘露醇24.5mmol/L),高糖組(含葡萄糖30mmol/L),采用免疫組織化學法檢測細胞表面CD26、MBL、C3和膜攻擊復合物(MAC)的表達,采用WesternBlot檢測細胞的CD26、MBL、C3及MAC的蛋白表達,采用實時熒光定量PCR(real-timePCR)檢測細胞中CD26、IL-6和NF-kBmRNA的表達情況。結果:⑴免疫組化提示:在HUVEC中CD26、MBL、C3、膜攻擊復合物(MAC)主要表達于

8、胞膜和胞漿。高糖組CD26、MBL、C3及MAC的蛋白表達均明顯高于正常組與甘露醇組(P<0.05);在正常

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